3.2白細胞介素6(IL-6)
3.2.1IL-6的生物學特點
白細胞介素-6(Interleukin- 6),簡稱白介素6 (IL-6),是一種功能廣泛的多效性細胞因子。IL-6可調節多種細胞的生長與分化,具有調節免疫應答、急性期反應及造血功能,並在機體的抗感染免疫反應中起重要作用。
3.2.2診斷炎症及感染性疾病的臨床建議
IL-6指標比CRP在早期感染中更為靈敏,升高更早,恢復時下降更快,幅度更大。
在感染早期、微弱的炎症刺激IL-6較CRP更靈敏可提供更好的鑒別。
3.2.3IL-6的臨床意義(2017《感染相關生物標誌物臨床意義解讀專家共識》)
(1)在炎症反應中,IL-6的升高早於其他細胞因子,也早於CRP和PCT,而且持續時間長,因此可用來輔助急性感染的早期診斷;
(2)IL-6也可用來評價感染嚴重程度和判斷預後,當IL-6>1000 ng/ml時提示預後不良;
(3)動態觀察IL-6水平也有助於了解感染性疾病的進展和對治療的反應
白介素6 ( IL-6)是細胞因子網路中的重要成員,在急性炎症反應中處於中心地位,IL-6產生後誘導產生C反應蛋白(CRP)和降鈣素原(PCT)生成,與炎症性疾病及感染程度直接相關。IL-6檢測的相對優勢在於急性感染的早期發現,能更快的診斷早期炎症及預警膿毒症的發生。另外,IL-6半衰期要短於CRP和PCT,能更快的反應抗生素治療的效果,更好的反應患者的預後。
IL-6在多種疾病時有明顯改變,其表達失調可引起許多疾病,其臨床表現主要為發病時IL-6水平增高。在發生內外傷、外科手術,應激反應,感染,腦死亡,腫瘤產生以及其它情況的急性炎症反應過程中IL-6會快速生成。手術病人的IL-6濃度能夠預示是否會有手術併發症的產生。連續檢測重症監護病人血清或血漿中IL-6的水平能有效的評估系統性炎症反應綜合症(SIRS)的嚴重程度,膿毒血症以及膿毒血症性休克的預後情況。IL-6的血清濃度水平增高早於PCT和CRP,能作為膿毒血症的早期警告指標。IL-6還在慢性炎症反應(如類風濕關節炎)中扮演著重要角色。
科賽格最新推出的抗人IL-6單克隆抗體,可用於雙抗夾心法免疫檢測。利用我公司化學發光檢測平台對自產IL-6抗體進行系統評價,檢測範圍為0.3-1500 pg/mL,將所推薦的抗體對經過大量的血清樣本測試,檢測結果和比對試劑盒測試結果符合率高。
性質參數靶標種屬人類宿主Balb/c小鼠融合細胞Sp2/0免疫原人白介素6蛋白純化方式,純度Protein G 親和純化,>90%(SDS-PAGE)保存緩衝液磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)應用範圍化學發光法等貨號CSB-DA436EmN①
CSB-DA436EmN④
所有的單克隆抗體分別用作捕獲抗體和標記抗體,然後組成不同抗體對,應用於化學發光平台,分別對0、2.5、25、250、750和1500 pg/mL的IL-6進行定量檢測,最後選擇出最好的配對組合如下(捕獲抗體-標記抗體):
A組合: CSB-DA436EmN①- CSB-DA436EmN④;
B組合: CSB-DA436EmN②- CSB-DA436EmN④;
C組合: CSB-DA436EmN③- CSB-DA436EmN④;
D組合: CSB-DA436EmN④- CSB-DA436EmN②.
圖1.四組IL-6抗體組合檢測白介素6的校準曲線
利用我公司的化學發光平台對不同批次的CSB-DA436EmN②,CSB-DA436EmN④進行精密度分析,通過10次反覆檢測低值質控品(5 pg/mL)和高值質控品(700 pg/mL),計算出變異係數(CV)均小於10%,精密度較好。
質控點檢測次數平均檢測濃度(pg/mL)標準誤差變異係數(%)低值104.570.337.2高值10741.1922.703.1
通過回收試驗分析B組合的IL-6抗體應用在化學發光平台檢測的準確度,平均回收率91.8%,由此可見準確度較高。
臨床比對
為驗證抗體適用於臨床檢測,利用自製抗體對和比對試劑盒同時檢測72例血清,通過Passing-Bablok回歸分析,科賽格檢測值與比對試劑檢測值相關係數0.9左右,這一結果展示抗體適用於臨床檢測。
圖2.科賽格IL-6抗體用於化學平台檢測血清樣本
將CSB-DA436EmN②和CSB-DA436EmN④兩種IL-6單克隆抗體(未添加保護劑)置於-20°C、4°C和37°C存放,在0、3和第10天測三種溫度下的抗體效價,以-20°C作為對照組,將4°C和37°C與之對比,效價變化在10%左右,證明穩定性良好。
圖3.不同溫度對IL-6抗體穩定性影響
科賽格亦提供高質量的IL-6蛋白,貨號為CSB-DP436E。該蛋白以液體形式供應,可用於免疫測試的校準品、免疫印跡(WB)等方面。
—未完待續—
—全球專業的診斷試劑原料供應商—
—下期預告—
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