冷凍細胞的復甦

細胞復甦的原則

在實際操作中，凍存細胞要進行復甦，再培養傳代。復甦細胞一般採用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內，再次形成胞內結晶損傷細胞。

所需材料

? 含有細胞的凍存管

? 37℃水浴鍋

? 37℃預熱的生長培養基

細胞的復甦流程

1．佩戴眼鏡和手套，從液氮罐中取出冷凍管。

2．迅速放入37℃水浴中，並不時搖動，在1分鐘內使其完全融化，然後在無菌下取出細胞。

3．在150g速度下離心5～10分鐘，棄去上層液

4．加入適量培養液後接種於培養瓶中，接種濃度1×109 cell/L，置37℃溫箱靜置培養

5．次日更換一次培養液，繼續培養，觀察生長情況。

6．若細胞密度較高，及時傳代。

注意事項

在細胞復甦操作時，應注意融化凍存細胞速度要快，可不時搖動冷凍管，使之儘快通過最易受損的溫度段(-5～0℃)。這樣復甦的凍存細胞存活率高，生長及形態良好。

本內容來自威斯騰生物

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