參加比對實驗的心得體會 | 實驗室

08-31

參加比對實驗的心得體會 | 實驗室

自2017年開始，出口食品、水產品、農副產品等生產加工企業對加工用原輔料及成品的微生物、營養指標、食品添加劑等項目進行自檢自控。

目前，企業自檢自控工作已經實施近 1 年。定期開展實驗室間和實驗室內人員之間的質量控制盲樣比對試驗，是保證測試結果準確性、可靠性和可比性的關鍵要素。

為了加強遼寧地區出口食品、水產品、農副產品檢驗工作，保障出口食品、水產品、農副產品等質量安全衛生。遼寧局技術中心特於 2018年4月開展遼寧省食品生產加工企業實驗室間質量控制比對試驗，並發放比對試驗合格通知書。

2018年3月1日，遼寧省出入境檢驗檢疫局技術中心以文件的形式（技〔2018〕15 號）下達了《關於開展遼寧省食品生產加工企業實驗室間質量控制比對試驗的通知》

參加的對象主要是：

1、遼寧局各分支機構

2、食品、飲料、罐頭、乳品、水產品、農副產品等生產加工企業。

3、其他相關行業意向參加室間比對的機構及個人等。

實驗室間質控比對試驗項目主要是：

（一）食品微生物檢測 1、菌落總數 2、大腸菌群定量 3、大腸桿菌定量 4、金黃色葡萄球菌定性及定量 5、沙門氏菌、 — 2 — 6、副溶血性弧菌 7、單核細胞增生李斯特氏菌。

（二）食品理化指標檢測 1、脂肪 2、蛋白質 3、食鹽(氯化物) 4、灰分 5、總糖 6、氨基酸態氮 7、總酸 8、二氧化硫 9、亞硝酸鹽。

考慮到本公司實驗室剛成立不久，綜合技術力量薄弱、人員短缺、實驗設備簡陋，目前只能開展食品微生物的常規檢測工作。如果硬行參加多項檢測項目，只能再添置大量設備、試劑和人員。特別是理化部分，對實驗室的環境和設備要求很高，作為一個企業搞這麼多名堂是不現實的。

因此經研究決定只參加食品微生物檢測部分的兩個項目——菌落總數和大腸菌群定量測試。這兩個項目是在食品微生物檢測中最基本的，通過考核最能反應出實驗室人員檢測基礎操作水平和結果判定的精確性水平。

根據文件要求：按照保護參加實驗室機密的規則，他們給每個參加實驗室指定一個唯一的代碼，在隨後公開發布的結果通知單、最終報告等文件中僅使用該代碼代表對應的參試實驗室。

考核的具體步驟的說明是這樣的：

一、參試實驗室編號

按照保護參加實驗室機密的規則，每個參加實驗室指定一個唯一的代碼，實驗室代碼在隨樣品發放的紙質《樣品發放通知書》中，請各實驗室檢視。在隨後公開發布的結果通知單、最終報告等文件中僅使用該代碼代表對應的參試實驗室。

二、樣品描述、分發與接收要求

本次能力驗證共8個項目，每個項目對應1個樣品，根據各實驗室報名參加的項目發放相應的樣品，檢測項目和樣品標識如下：

分別標記為：

樣品 PT Sample L__菌落總數的定量檢測。

樣品 PT Sample G__大腸桿菌的定量檢測；

樣品 PT Sample D__大腸菌群的定量檢測；

樣品 PT Sample JL__金黃色葡萄球的定量檢測；

樣品 PT Sample JX__金黃色葡萄球的定性檢測；

樣品 PT Sample S__ 沙門氏菌的定性檢測（要求鑒定到屬，如有可能最好鑒定到種）；

樣品 PT Sample Z__單核增生李斯特氏菌的定性檢測；

樣品 PT Sample F__副溶血性弧菌的定性檢測；

樣品編號粘貼在包裝外。樣品採用快遞運輸。

隨樣品發送的文件如下：（樣品發放通知書隨測試樣品由快遞傳輸，其餘文件通過電子郵箱傳輸）

● 參試指導書

● 樣品確認函

● 測試結果報告單

● 測試記錄單

● 樣品發放通知書

1、樣品在發送前已經過均勻性和穩定性試驗，保證分發到各參加實驗室的樣品在運輸和檢測期間是穩定的。

2、生物安全說明：能力驗證樣品製備所選用的菌株為非產毒株。但在實驗過程中，各參加實驗室應該嚴格按照生物實驗室安全通則進行實驗操作。

3、當樣品到達實驗室，應立即放在4℃或-20℃冰箱中保存，2日內必須對樣品進行檢測，10個工作日內必須報送結果。

4、針對各樣品的檢測項目要求，進行樣品標識。請各實驗室根據參試項目核對樣品標識。

樣品到達當日，如樣品有問題請詳細描述並傳真至本項目協調人。如果發生樣品包裝破損、編號污損或模糊等異常情況，請勿開封樣品，同時將原樣品寄回，本中心將考慮重新寄送樣品。樣品僅可用於本計劃的相關測試工作，不得挪作他用，更不得食用，如果參加實驗室將樣品用於本計劃以外的其他目的，則本中心不承擔由此引起的任何責任。

三、測試過程要求

1、無菌開啟西林瓶，立即（1分鐘內）加入少量（2~5ml）稀釋液（可以用無菌生理鹽水或磷酸鹽緩衝液）進行再水化，待溶解後，吸出放入無菌瓶中，反覆用稀釋液重複清洗西林瓶內壁，回收清洗液放入上述的無菌瓶中，稀釋液合計40ml，此溶液即是待測樣品原液（針對定量檢測項目，該40ml液體即為待測原液，即100），全過程20分鐘內完成，上述製備的40ml待測原液按標準方法進行後續操作。

*註：因為樣品量少且不可重複使用，所以定量檢測時的稀釋倍數應足夠，避免出現因稀釋倍數不夠而無法獲得檢測結果的情況。MPN法測試須報具體數值。

2、注意事項：

*使用樣品時，請從冰箱中取出，待樣品達到室溫方可開啟使用；

*西林瓶中處於高真空狀態，開啟時要小心；

*從開啟樣品到測試結果均應按照無菌操作進行；

*該樣品為一個樣品單元，是不可分割的一個整體，勿取其中一部分凍乾粉作為測量樣品；

*第一步水化（2~5ml稀釋液）必須在西林瓶中進行，不允許將西林瓶中的樣品倒出西林瓶再水化；

*樣品中含有活的微生物，不要直接用手接觸西林瓶內樣品，請在符合生物安全規定的條件下操作。

3、如果是MPN法定量檢測，請在八個稀釋度中確定最適合的三個連續稀釋度報告結果。對於定量檢測項目要報具體數值結果，不能報大於或小於值。

四、測試結果報告

1、本次能力驗證目的在於檢驗參加實驗室的檢測能力和檢測水平，而不是對所使用的檢測方法和所使用儀器、試劑等進行評價，也不用於其他商業性行為。故不限定（或推薦）檢測方法、試劑和儀器等。但需在結果報告單和原始記錄單上註明檢測相關信息。

2、請於收到樣品10個工作日內，按照給出的格式填寫《結果報告單》，並經實驗室負責人簽字、加蓋公章。

請於收到樣品10個工作日內（以當地郵戳為準），將簽字蓋章後的《結果報告單》正本及測試原始記錄單郵寄至協調人，其他相關材料可一同郵寄。如果不能按期報告結果，請儘快通知能力驗證協調人並註明理由。如在測試過程中有何疑問，請隨時與技術負責人聯繫。

接到的樣品是這樣的：

對於本公司的產品，根據產品的加工特點、形態特徵和性質，再加上以前的實驗數據，一般對細菌總數的可能發生存在範圍都能有個大致的判斷，是在幾百、幾千或者上萬，檢測時做2~3個稀釋度，就可以抓住，使培養皿中的菌落達到清晰可數的水平，以便得到準確結果。由於以前沒有檢測過濃縮的、凍乾的菌種樣品，再加上操作指導書上的說明：

*註：因為樣品量少且不可重複使用，所以定量檢測時的稀釋倍數應足夠，避免出現因稀釋倍數不夠而無法獲得檢測結果的情況。

意思是樣品必須一次性使用，只許成功，不能失敗。雖然考慮到樣品是凍乾的菌株，細菌含量應該很大，但是考核不應該出極端的問題，比如細菌總數就幾個、幾十個，或者是幾千萬甚至上億。設計稀釋度的時候，不敢經驗主義，麻痹大意，決定做5個稀釋度。

對於大腸菌群定量測試，同樣考慮到應該含量較大，（日常檢測很難遇到上千或者上萬的情況），因此決定採用9管MPN法，就按操作指導書上說的8個稀釋度好了。同時以美國3M大腸菌群試紙作為輔助。

菌落總數測定，指導書上說是實驗室檢測能力測試，不限定用什麼方法，用什麼儀器和試劑，只要能得出準確結果就行。這我很喜歡，同時對省檢疫局的這種考核方式表示贊同，靈活性強，不拘泥於那些勞什子國標方法又或是行業標準、認證組織和檢測機構認可的方法，這樣能充分發揮檢測人員的主觀能動性，讓他們去研究改進檢測方法，而不是去墨守成規機械地、被迫地、必須地使用某種方法。

那我就使用經過我自己改良的菌落總數測試培養基，同時以美國3M測試紙作為輔助檢測方法，最後綜合分析結果、報告數據來對付他們。

檢測結果拍照為證