MCAO動物模型

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腦是人類的重要器官之一，其重量僅為體重的2%，但其耗氧量則佔全身耗氧量的20%，其所需血供占心輸出量的15%，因此對氧和血的要求特別高，極易受到缺血性損害，其中由大腦中動脈梗塞造成的腦缺血尤為常見。中華人民共和國衛生部官方網站提供的統計數據顯示，2003年腦血管疾病在城市和農村疾病死亡原因中均排名第二位，僅次於惡性腫瘤。腦血管病包括缺血性和出血性腦血管病，其中缺血性腦血管病佔80-85%。大腦中動脈是常見的出血或梗塞發生部位。製作模擬人腦缺血模型對腦缺血發病機制及藥物篩選有重要意義。

MCAO是middle cerebral artery occlusion 的縮寫形式，中文意思為中腦動脈栓塞。大腦中動脈栓塞模型並不是把線栓插進大腦中動脈，而是經頸內動脈入顱並插入大腦前動脈，從而阻塞來自栓塞側的大腦前動脈的血供，以及堵塞接受後交通動脈血供的的頸內動脈顱內段。 本課題採用線栓法，線栓法具有不開顱、效果肯定、可準確控制缺血及再灌注時間的優點。

線栓法大鼠MCAO模型的建立

實驗器材：

干棉球、酒精棉球、75%酒精、生理鹽水、注射器（1ml）、黑色記號筆、固定大鼠用自製拉鉤、大鼠板、EP管。 手術器械：眼科剪1、彎鑷1對、（動脈夾2）、止血鉗2-3、縫合線、縫合針。 栓線：採用特製購買栓線（北京西濃，A2432-A4適用於200~240g大鼠，A2636-A4適用於250~280g大鼠）。

實驗試劑：

TTC染液的配製：TTC（南京奧多福尼，10g，4℃）用去離子超純水配成2%TTC溶液（pH7.4），避光保存。麻醉劑：7%水合氯醛

造模過程：

SD大鼠稱重，7%水合氯醛（0.5ml/100g）麻醉。將大鼠用醫用膠帶固定於操作台上，頸部剃毛。

頸部酒精棉球消毒，眼科剪沿鎖骨正中做豎向切口，長度約3~4cm左右。

分離皮下肌肉組織，可見底部肌肉下方有輕微搏動即為頸總動脈，鈍性分離覆蓋於頸總動脈上方的肌肉，當分離出頸總動脈後，眼科鑷小心分離伴行於頸總動脈的迷走神經，繼續小心分離乾淨動脈周圍粘膜組織，分離出的頸總動脈大約1~1.5cm左右即可。

小心剔除覆蓋於動脈上方的粘膜組織，此時可見頸外動脈、頸內動脈與頸總動脈呈「Y字形」分布，分離出獨立的兩根動脈（頸外、頸內）。血管分離完畢後，結紮頸總動脈（越靠尾部越好）。

再結紮頸外動脈，兩個結紮之間備線，打松結。

動脈夾暫時夾閉頸內動脈。在備線與頸總動脈結紮處之間，用眼科剪做一「V字形」切口，在離Y字形分叉處約0.8 mm處位於血管的正前部剪一「V」形切口，使血管在自然狀態下，用眼科鑷夾持栓線，緩慢進入頸內動脈，到達動脈夾時，將預留的線稍微拉緊（防止遠心端迴流滲血），鬆開動脈夾，將頸總動脈稍向右拉繼續插入栓線，當特製栓線黑色標記處到達Y字形分叉口附近時，此時栓線已進入大腦中動脈且不能繼續前行。

栓線插入完畢後，將預留的結紮線拉緊固定。醫用小棉簽清理頸部血塊，逐層縫合皮膚，酒精棉球消毒，將大鼠放回籠子。1.5 h過後，麻醉大鼠，頸部消毒，打開一個小口，用眼科鑷夾住栓線固定處將栓線拔出至其頭端，剪去多餘栓線，逐層縫合，消毒；假手術組僅剝離頸總動脈後立即縫合創口。術後放回籠子，給予充足飼料和水。

大鼠蘇醒後，參照Zea Longa 5分制評分標準：0分代表無神經缺損癥狀；1分代表不能完全伸展對側前肢；2分代表行走時向偏癱側轉圈；3分代表行走時向偏癱側傾倒；4分代表不能自發行走、意識障礙；5分代表死亡。累積1分及以上即為造模成功；但凡達到5分、解剖發現蛛網膜下腔出血或無神經功能缺損癥狀（0分）均視為造模失敗。

注意事項

（1）分離頸部肌肉時，兩側小塊肌肉叫鼓泡腺體（很多人誤認為是甲狀腺），避免損傷導致出血。

（2）見到頸動脈鞘了則要注意細緻分離迷走神經，若損傷則可能影響其呼吸而死亡的。

（3）栓線不能反覆進退，否則及容易造成蛛網膜下腔出血，而且很容易誤解為模型成功，因為這時的神經功能改變也很明顯，但並不是由於栓塞引起的。

（4）大鼠大腦中動脈永久性閉塞性腦缺血模型，梗死體積出現的最小時間點可能為 2 h，體積隨時間進行性增大，至 12h 基本趨於穩定。

本文來自威斯騰生物