蛋白質鑒定方法及流程

蛋白質鑒定方法及流程

蛋白質鑒定流程據鑒定方法的不同,蛋白質鑒定的流程也會不同。

常見的蛋白質鑒定方法有:

一、最簡單的方法就是對所要鑒定的物體進行灼燒

二、使用化學藥劑進行化學反應來鑒定蛋白質

三、較為精準的方法是使用儀器進行蛋白質鑒定,如質譜儀等

在生物學研究中經常會遇到一些關於蛋白質鑒定的問題,如單一蛋白質或者簡單混合物的鑒定;對單一蛋白質的序列分析等。這一類蛋白質鑒定,在精密度上要求較高,所以幾乎都是採用質譜儀器,來對蛋白質進行精密鑒定。

質譜技術是鑒定蛋白質的其中一種平台技術。可用到的質譜儀有Thermo Fisher的Q Exactive質譜儀,LTQ Orbitrap Velos質譜儀,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP質譜儀。所在鑒定機構的不同,在硬體品牌的使用上也會有不同。

蛋白質鑒定的流程一般分三大步:蛋白質提取、純化、鑒定。這個流程是一個將蛋白質層層「解剖」的過程,從中我們可以對蛋白分子量進行測定,蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質進行鑒定,非變性質譜分析以及Pull-down靶蛋白質譜鑒定等,較為細緻的去分析蛋白質中的各種物質、性質等。


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