【技術帖】製藥過程中微生物的污染的防範措施

微生物的概念

　　在自然界里，有許多肉眼不能直接看見，必須藉助於顯微鏡放大才能觀察到的微小生物，這些微小生物總稱為微生物。

微生物在自然界的分步

　　簡單的講微生物主要分布：空氣..水.食物.人體.等。在一般空氣中，微生物800~3500/m3,在嚴重的污染的水中可達到107個/ml。

外界因素為微生物的影響

　　微生物的生命活動與外界環境有著極為密切的關係，適宜的外界環境，能促進微生物的生長繁殖；環境不適宜時，微生物的代謝活動也隨著改變，引起微生物的變異或死亡。

　　1.溫度和化學因素對微生物的生長繁殖影響極大。

　　2.濕度可以促使細菌的生長，特別對黴菌繁殖有更快。因此防止濕度過大對於避免染黴菌有一定的作用。

空氣中的微生物

　　空氣中的微生物及微粒，是空氣潔凈技術要解決的主要對象。儘管空氣不是適合微生物生長繁殖的天然環境（因不含必需的水分和營養），但是一般的大氣環境仍含有不少的細菌、黴菌和酵母菌。例如，葡萄球菌屬、鏈球菌屬、桿菌屬、梭狀芽胞桿菌屬、棒狀桿菌屬、青黴屬、麴黴屬、毛霉屬和紅酵母屬等。

　　空氣中的微生物來自灰塵微粒（自然因素如風，人為因素如車），來自人的皮膚與衣服，以及由談話、咳嗽、打噴嚏等造成的飛沫。空氣中微生物數量取決於灰塵量和活動狀況，例如，有活躍人群比無人群的地方微生物多，不潔的房間比清潔的房間多，潮濕的地方比乾燥的地方多。

常用的減少空氣中微生物數量的方法

　　1．空氣潔凈技術採用的過濾方法過濾是最常用的方法。過濾介質種類很多，例如：纖維素、玻璃棉或人造纖維等。一般應除去大於0.1um 的微粒及微生物。空氣凈化裝置可用於整個房間如無菌操作室，也可只限於操作區域局部如超凈工作台。它允許經過濾的空氣氣流不斷地流過工作區，氣流方向可以是垂直的或者是橫向的，取決於設備的類型及設計。製藥企業應對空氣凈化裝置定期監測檢查，確保各種技術參數符合法定的技術標準。

　　2．化學消毒方法化學消毒劑種類較多，有一些化學消毒劑如甲醛，因有刺激性，所以作用受到局限。福爾馬林為40%的甲醛溶液，熏蒸在空氣中的濃度為1-2mg/L，相對濕度為80-90%時效果較好，但現已較少用。使用臭氧發生器的效果已得到證實，現已開始廣泛應用。其滅菌是物理、化學及生物學等綜合作用。

　　3．紫外線照射方法房間安置固定的或可移動的紫外線燈，採用紫外線波長為240-280nm之間，以253.7nm處殺菌力最大。但穿透力較差，可被不同的物品表面反射。使用時應考慮燈具的壽命，約1400h時需更換。

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製藥用水中的微生物

　　工藝用水在製藥企業防止污染及作為製藥用水方面至關重要。因為它不僅作為產品的一個成分，而且需用其洗滌或冷卻。藥品的微生物污染的關鍵環節在於工藝用水，因為水是微生物生長代謝的一個必要成分。

　　水中的微生物種類較多見的有：假單胞菌屬、產鹼桿菌屬、產黃菌屬、產色細菌屬和沙雷菌屬等。這些細菌營養要求不高，適宜溫度較低，一般來自土壤侵蝕、雨水沖刷及腐敗動植物的污染。被糞便污染的水中含有大腸桿菌、變形桿菌屬、其他腸道菌、糞鏈球菌和梭狀桿菌屬。

　　在飲用水標準中，大腸桿菌（又稱大腸埃希菌）的含量是判斷飲用水水質污染程度的指標。

　　垃圾和工業廢液污染的水源中約98%含有革蘭陰性細菌、微球菌屬、噬細胞菌屬，此外還有酵母菌、類酵母菌和放線菌。

　　製藥用水的質量，根據工藝需要選用飲用水、純化水或注射用水。例如，製備注射劑必須採用注射用水，製備口服製劑需用純化水。中國藥典收載了純化水和注射用水的質量標準。

　　常用的對水消毒的方法，與空氣消毒的方法一樣，也是化學消毒劑、過濾與紫外線照射3種。

　　化學消毒劑方法對水的消毒以化學消毒劑方法較常用，效果也最好。常使用次氯酸鈉或通氯氣。在使用中，應注意到水系統中不能留有消毒不到的「死角」。膜過濾法適用於水系統的連續循環處理。常用的微孔濾膜的孔徑為0.22um。在此之前，還應有其他過濾方法配合。

　　紫外線照射法在水系統中應用紫外線照射消毒，適用於需要特殊處理的水（如光學透明度要求高），一般在末端之前。這種方法因處理過的水無臭無味，而優於化學消毒劑方法；因不產生微生物移居濾器的現象，而優於膜濾器。因此，在水系統中，這3種方法綜合應用，設計安裝在適當的位置。對製藥用水的消毒方法除應用於水的本身消毒以外，還必須包括水系統中的設備、管道的消毒問題。

廠房建築與設備表面的微生物

　　廠房建築物的內表面，以及設備表面、容器內外表面等，都可能是微生物寄存的地方。

　　製藥企業生產車間的廠房、庫房及實驗室都必須清潔整齊。建築物表面不透水，光滑平整、無裂縫、介面嚴密、無顆粒物脫落，並能耐受清洗和消毒。設備、管道應易於拆卸、結構簡單，便於清潔和消毒。特別是藥品生產過程中使用的容器，包括內包裝容器，都應進行清洗和消毒。4.人體的微生物和微粒

人體的微生物

　　微生物廣泛分布於自然界，人體與自然環境接觸，當然也不能例外。凡是人體體表皮膚與外界相通的腔道如口腔、鼻咽腔、腸道、眼結膜、泌尿生殖道均存在不同種類的微生物，其中有些微生物可以長期寄居在人的體表、皮膚和黏膜上。這種正常狀態的微生物群有一定的種類和數量，與宿主及體外環境三者保持動態平衡，有益於宿主健康，構成相互依賴、相互制約的生態學體系，這類微生物稱為「正常菌群」，這種生態環境稱為「微生態平衡」。

防止微生物污染的原則

　　1. 了解污染源

　　對藥品生產全過程可能造成污染的來源，進行深入的了解研究，從而設計一個完好的生產工藝，制定規章制度和標準操作規程，從各個環節採取消毒和衛生措施來防止微生物污染，使產品達到所要求的衛生學質量，包括穩定性及各種微生物參數。

　　2. 進行微生物監測

　　在藥品生產過程中，應按GMP要求不斷進行各項微生物衛生學監測。例如：對潔凈室空氣中的浮游菌、沉降菌的監測；對無菌設備清潔滅菌的驗證；對非無菌藥品進行細菌和活菌數測定和病原菌的限制性檢查等。

　　3．藥品生產人員衛生注意事項：

　　3.1新進人員的健康檢查：藥品生產企業在招收新職工時，一定要對新職工進行全面的健康檢查，要確保新進廠的職工不患有急性或慢性傳染病。另外還要根據新進職工安排的具體崗位性質再確定其它具體檢查的項目。建立生產人員健康檔案：藥品生產企業應對職工建立個人健康檔案，以便於檢查、了解、追蹤個人健康好壞的狀況。

　　3.2培養藥品生產人員良好的個人衛生習慣 ：

　　勤洗手、勤剪指甲、 定期洗澡、勤理髮、勤換衣服、勤洗工作服 。

　　3.3在生產區內做到三個嚴禁 ：禁止吃東西、禁止吸煙、禁止大聲喧嘩。

　　4.潔凈區生產人員要求：

　　4.1 鞋的凈化：可使用一種地墊，它具有粘性表面，能殺滅細菌並經抗靜電劑的處理，可除去人員腳上的塵粒。

　　4.2工作服的凈化：工作服的使用，可沉積吸附大量微生物和不清潔物，衣服本身也會散發纖維屑，故應經常清潔、滅菌。

　　4.3手的凈化：手是交叉污染的媒介，要教育生產人員警惕對產品的污染。用消毒皂和酒精清洗。

　　4.4頭罩：頭罩必須把全部毛髮遮住。

　　4.5口罩：常用的口罩由4～6層紗布製成。帶口罩一定要遮住口、鼻；不能帶潮濕的口罩；使用不能超過4h；不可正反兩面使用。

　　5.潔凈區工作人員要儘可能少而精，只有工作需要時才能進入；操作人員在潔凈區動作盡量要緩慢，避免劇烈運動，以減少人的發塵量；潔凈區的門應關緊，避免不必要的移動，以保持潔凈區的風速、風量、風型和風壓；如果是無菌區的話，操作人員的自我約束就更多，要嚴格按無菌操作規程執行。

　　6.日常工作：

　　6.1生產前開啟紫外燈滅菌；

　　6.2生產結束後崗位人員的工作：徹底清潔生產現場和設備表面；

　　6.3生產結束後滅菌人員的工作：用消毒劑擦拭頂（包括高效送風口）、牆壁、地面等，並開啟紫外燈；