介紹一種快速胃幽門螺桿菌染色法
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來源:91360智慧病理網
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胃幽門螺桿菌(簡稱HP)是從人胃黏膜分離培養出的一種細菌,研究表明其與胃十二指腸潰瘍、慢性胃炎、胃癌、黏膜相關性淋巴瘤等發生密切相關。目前病理中HP診斷的方法很多,如HE染色法,鹼性品紅染色法、等,但它們都有一定的局限性。現在我們介紹一種新的HP病理診斷方法,即BASO幽門螺桿菌染色法,它與上述染色方法相比,具有快速、簡便、定位準確、易於觀察,單張切片就能很好顯示HP形態特徵,並可重複染色等優點。
1.材料和方法
1.1材料 ①取成人胃黏膜活檢組織,4%中性緩衝甲醛液固定,常規石蠟切片厚4~6靘。②BASO幽門彎曲桿菌染色液,即BASO即用型試劑,有3種包裝規格:20ml、100ml和250ml,珠海貝索生物技術有限公司。註:【醫療器械生產企業許可證編號】粵食葯監械生產許20010407號。【醫療器械註冊證編號】粵珠食葯監械(准)字第1400002號。【產品標準編號】YZB/粵珠0011-2013。
1.2方法 ①W-S銀染色法:此法是顯示螺旋菌的經典方法。近年來將此法稍加改進應用於顯示幽門螺桿菌。該方法染色時需要加熱,顯影后還需要在熱水中浸洗,並嚴格掌握顯影時間。②鹼性品紅法:該法是目前彎曲桿菌的常用於篩查染色方法。此法為一步染色操作,鹼性品紅染色30 min,用蒸餾水沖洗乾淨晾乾即可。③H&E染色:此法是病理診斷常規染色,但顯示幽門螺桿菌不夠理想。④BASO快速染色法染色步驟:(1)常規石蠟切片4~6 靘,80℃烤片30 min ,常規脫蠟至水。(2)瀝干切片上的水分。(3)直接將試劑滴加於組織切片上,並覆蓋組織。(4)常溫下胃幽門螺桿桿菌染色液染色5~10 min。(5)流水沖洗至染液不再脫落。(6)乾燥切片,中性樹膠封固。(7)顯微鏡觀察。
2.結果
W-S銀染色法細菌呈棕黑色或黑色,背景呈淡黃色(圖1);鹼性品紅染色法細菌和背景均呈紫紅色(圖2);H&E染色法(圖3);BASO染色法胃幽門螺桿桿菌呈藍色,紅細胞綠色,背景藍色(圖4)。
圖1示:W-S銀染色×400,見胞核呈藍色,胞核與HP呈黑色,胞質黃色。
圖2示:鹼性品紅染色×400,見組織和HP均呈紫紅色,細菌形態模糊不易辨認。
圖3示:HE染色×400,見HP形狀同上,胞質和HP均呈紅色,細菌形態不清楚。
圖4示:BASO染色×400,HP呈藍色,紅細胞綠色,背景藍色。
3.討論
胃幽門螺桿菌是存在於胃幽門等部位的一種細菌,主要生存於胃黏膜上皮和胃腺體黏膜屏障之間,其形態特點是短桿狀,兩端微彎曲的革蘭陰性桿菌,所以稱為胃幽門彎麴菌(Campylobracter pyloridis)。研究已經證實胃幽門螺桿菌可能與慢性胃炎、消化性潰瘍和胃腫瘤等多種胃部疾病有密切關係。其分布以胃竇最高,胃體、胃底次之,有時在十二指腸也可檢出。胃幽門螺桿菌適合於中性環境,故常見於胃表面上皮黏液內和胃小凹內。HP與胃病的關係密切,其染色結果對治療方法、藥物的選擇有著重要關係。
胃幽門螺桿菌含有蛋白和多糖物質,在一定溫度硝酸銀溶液作用下能夠吸附銀離子,再經過還原的顯色劑使彎麴菌被還原為金屬,也成為嗜銀性胃幽門螺桿菌。顯示胃幽門螺桿菌一般採用傳統的硝酸銀法,但該法的試劑組成與操作步驟都比較複雜,而Baso胃幽門螺桿菌染色液是採用單試劑染色法,主要成分是天青Ⅱ,能夠清晰顯示胃幽門螺桿菌。現將一些常用胃幽門螺桿菌染色方法與BASO快速法比較如下見表1:
表1 常用胃幽門螺桿菌染色方法與BASO快速法比較
由此可見,上述傳統胃幽門螺桿菌染色方法都有一定的局限性,而我們應用的BASO快速法顯示胃幽門螺桿菌有以下優點:(1)操作簡便,只需將染液直接滴入脫蠟後的切片組織上;(2)方便快捷,整個操作過程只需5~10 min;(3)單張切片就可很好顯示HP形態特徵、並可重複染色;(4)結果穩定,可長期保存;(5)定位準確,易於觀察,在40×物鏡下就可直接觀察到HP形態。
在日常使用過程中,我們建議應注意以下幾點:(1)原包裝未開封試劑有效期為18個月,在有效期內的已開封試劑應在開封后6個月內使用完,每次用後應及時擰緊瓶蓋,以免揮發或變質。(2)試劑盒應儲存於相對濕度不大於80%,無腐蝕性氣體和通風良好的5℃~30℃室溫環境。(3)組織片應充分固定和脫蠟完全。(4)用後按醫院或環保部門要求處置廢棄物。
參考文獻
[1]樓方岑主編.醫療護理技術操作常規[M].北京:人民衛生出版社.1987.
[2]張 哲,陳 輝主編.實用病理組織染色技術[M].瀋陽:遼寧科學技術出版社,1988.249-250.
[3]凌啟波 編著.實用病理特殊染色和組化技術[M].廣州:廣東高等教育出版社,1989.42-45.
[4]龔志錦,詹鎔洲編著.病理組織製片和染色技術[M].上海:上海科學技術出版社,1994.224-230.
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