【生物來襲】胚胎工程梳理
07-17
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胚胎工程梳理
(一)動物胚胎髮育的基本過程(1)精子的發生:補充,精原細胞先進行有絲分裂後進行減數分裂;變形過程中,細胞核為精子頭的主要部分,高爾基體發育為頂體,中心體演變為精子的尾,線粒體在尾基部形成線粒體鞘膜,其他物質濃縮為原生質滴直至脫落。[線粒體為精子運動提供能量。(2)卵子的發生:在胎兒時期,卵原細胞進行有絲分裂演變成初級卵母細胞[被卵泡細胞包圍],減一分裂在排卵前後完成,形成次級卵母細胞和第一極體進入輸卵管準備受精;減二分裂是在受精過程中完成的。(3)受精:精子獲能(在雌性動物生殖道內);卵子的準備(排出的卵子要在輸卵管中進一步成熟到減二中期才具備受精能力);受精階段[卵子周圍的結構由外到內:放射冠、透明帶、卵黃膜],a頂體反應:精子釋放頂體酶溶解卵丘細胞之間的物質,穿越放射冠。b透明帶反應:頂體酶可將透明帶溶出孔道,精子穿入,在精子觸及卵黃膜的瞬間阻止後來精子進入透明帶的生理反應[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障];c卵黃膜的封閉作用:精子外膜和卵黃膜融合,精子入卵後,卵黃膜會拒絕其他精子再進入卵內的過程[它是防止多精子入卵受精的第二道屏障];精子尾部脫落,原有核膜破裂形成雄原核,同時卵子完成減二分裂,形成雌原核[注意:受精標誌是第二極體的形成;受精完成標誌是雌雄原核融合成合子](4)胚胎髮育:a卵裂期:細胞進行有絲分裂,數量增加,胚胎總體積不增加;b桑椹胚:32個細胞左右的胚胎[之前所有細胞都能發育成完整胚胎的潛能屬全能細胞];c囊胚:細胞開始分化,其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織;而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤;胚胎內部逐漸出現囊胚腔[註:囊胚的擴大會導致透明帶的破裂,胚胎伸展出來,這一過程叫孵化];d原腸胚:內細胞團表層形成外胚層,下方細胞形成內胚層,由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔。[細胞分化在胚胎期達到最大限度]9 胚胎工程的理論基礎(識記)(1)胚胎工程的概念及技術手段:對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術,如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎幹細胞培養等技術。(2)體外受精[屬有性生殖過程:a卵母細胞的採集和培養 對體型小的動物用促性腺激素處理,從輸卵管沖取卵子(可直接受精);對體型大的動物從卵巢中採集卵母細胞(要在體外培養成熟)b精子的採集 假陰道法、手握法和電刺激法;獲能 對嚙齒動物、兔、豬等的精子用培養法(放入人工配製的獲能液中);對牛、羊等精子用化學法(放在肝素或鈣離子載體溶液中)(3)胚胎的早期培養:a培養液成分:無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等[注意與動物細胞培養液成分的比較];b當胚胎髮育到適宜的階段時,可將其取出向受體移植或冷凍保存。(4)胚胎移植:a概念:將雌性動物的早期胚胎移植到同種的、生理狀態相同的其他雌性動物的體內,使之繼續發育為新個體的技術。是生產胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖後代的過程,通過轉基因、核移植、體外受精獲得的胚胎必須移植給受體才能獲得後代。b優勢:可以充分發揮雌性優良個體的繁殖潛力,縮短供體本身的繁殖周期。c胚胎移植的生理學基礎:同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的[對供體和受體進行同期發情處理];早期胚胎形成後處於遊離狀態,為胚胎的收集提供可能;受體對移入子宮的外來胚胎基本不發生免疫排斥反應;移入受體的供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。d胚胎移植的程序:對供、受體母牛進行選擇,用激素進行同期發情處理;對供體母牛用激素做超數排卵處理;選擇同種優秀公牛配種[有性生殖過程];對胚胎進行收集[此時胚胎處於遊離狀態];對胚胎進行質量檢查[此時胚胎應發育到桑椹胚或囊胚];胚胎移植[或冷凍保存];檢查受體母牛是否受孕;產下胚胎移植的犢牛。(5)胚胎分割:a概念:用機械方法將早期胚胎切割成2、4、8等分等,經移植獲得同卵雙胎或多胎的技術[可看作是動物無性繁殖或克隆]b基本過程:選擇良好的桑椹胚或囊胚移入培養皿中,用分割針或分割刀片將其切開,吸出其中的半個胚胎注入透明帶中或直接移植給受體。[注意:內細胞團要均等分割,否則會影響胚胎的恢復和進一步發育]10 胚胎幹細胞的移植(識記)(1)胚胎幹細胞的含義:由早期胚胎[囊胚]或原始性腺[胎兒]中分離出來的一類細胞,又叫ES或EK細胞。(2)特徵:形態上體積小、細胞核大、核仁明顯;功能上具有發育的全能性,即可分化為成年動物體內任何一種組織細胞。[體外培養下,ES細胞可以只增殖不分化](3)應用:用於治療人類疾病,如利用ES細胞誘導其分化成新的組織細胞特性,移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復。1、胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術,如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎幹細胞培養等技術。經過處理後獲得的胚胎,還需移植到雌性動物體內生產後代,以滿足人類的各種需求。2、動物胚胎髮育的基本過程(1)受精場所是母體的輸卵管。(2)卵裂期:特點:細胞有絲分裂,細胞數量不斷增加,但胚胎的總體體積並不增加,或略有減小。(3)桑椹胚:特點:胚胎細胞數目達到32個左右時,胚胎形成緻密的細胞團,形似桑椹。是全能細胞。(4)囊 胚:特點:細胞開始出現分化(該時期細胞的全能性仍比較高)。聚集在胚胎一端個體較大的細胞稱為內細胞團,將來發育成胎兒的各種組織。中間的空腔稱為囊胚腔。(5)原腸胚:特點:有了三胚層的分化,具有囊胚腔和原腸腔。(二)胚胎幹細胞1、哺乳動物的胚胎幹細胞簡稱ES或EK細胞,來源於早期胚胎或從原始性腺中分離出來。2、具有胚胎細胞的特性,在形態上表現為體積小,細胞核大,核仁明顯;在功能上,具有發育的全能性,可分化為成年動物體內任何一種組織細胞。另外,在體外培養的條件下,可以增殖而不發生分化,可進行冷凍保存,也可進行遺傳改造。3、胚胎幹細胞的主要用途是①可用於研究哺乳動物個體發生和發育規律;②是在體外條件下研究細胞分化的理想材料,在培養液中加入分化誘導因子,如牛黃酸等化學物質時,就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化,這為揭示細胞分化和細胞凋亡的機理提供了有效的手段;③可以用於治療人類的某些頑疾,如帕金森綜合症、少年糖尿病等;④利用可以被誘導分化形成新的組織細胞的特性,移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復並恢復正常功能;⑤隨著組織工程技術的發展,通過ES細胞體外誘導分化,定向培育出人造組織器官,用於器官移植,解決供體器官不足和器官移植後免疫排斥的問題。(三)胚胎工程的應用1.體外受精和胚胎的早期培養(1)卵母細胞的採集和培養:主要方法:用促性腺激素處理,使其排出更多的卵子,然後,從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第二種方法:從剛屠宰母畜的卵巢中採集卵母細胞;第三種方法是藉助超聲波探測儀、腹腔鏡等直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。採集的卵母細胞,都要在體外經人工培養成熟後,才能與獲能的精子受精。(2) 精子的採集和獲能:在體外受精前,要對精子進行獲能處理。(3) 受精:獲能的精子和培養成熟的卵細胞在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。(4)胚胎的早期培養:精子與卵子在體外受精後,應將受精卵移入發育培養液中繼續培養,以檢查受精狀況和受精卵的發育能力。培養液成分較複雜,除一些無機鹽和有機鹽外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分,以及血清等物質。當胚胎髮育到適宜的階段時,可將其取出向受體移植或冷凍保存。不同動物胚胎移植的時間不同。(牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚階段才能進行移植,小鼠、家兔等實驗動物可在更早的階段移植,人的體外受精胚胎可在4個細胞階段移植。)2.胚胎移植(1)胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎,或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態相同的其它雌性動物的體內,使之繼續發育為新個體的技術。其中提供胚胎的個體稱為「供體」,接受胚胎的個體稱為「受體」。(供體為優良品種,作為受體的雌性動物應為常見或存量大的品種。)地位:如轉基因、核移植,或體外受精等任何一項胚胎工程技術所生產的胚胎,都必須經過胚胎移植技術才能獲得後代,是胚胎工程的最後一道「工序」。(2) 胚胎移植的意義:大大縮短了供體本身的繁殖周期,充分發揮雌性優良個體的繁殖能力。(3) 生理學基礎:①動物發情排卵後,同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環境。②早期胚胎在一定時間內處於遊離狀態。這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對移入子宮的外來胚胎不發生免疫排斥反應。這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯繫,但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。(4) 基本程序主要包括①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體,有健康的體質和正常繁殖能力的受體,供體和受體是同一物種。並用激素進行同期發情處理,用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養或保存。配種或輸精後第7天,用特製的沖卵裝置,把供體母牛子宮內的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對胚胎進行質量檢查,此時的胚胎應發育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植後的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。3.胚胎分割(1)概念:是指採用機械方法將早期胚胎切割2等份、4等份等,經移植獲得同卵雙胎或多胎的技術。(2)意義:來自同一胚胎的後代具有相同的遺傳物質,屬於無性繁殖。(3)材料:發育良好,形態正常的桑椹胚或囊胚。(桑椹胚至囊胚的發育過程中,細胞開始分化,但其全能性仍很高,也可用於胚胎分割。)(4)操作過程:對囊胚階段的胚胎分割時,要將內細胞團均等分割,否則會影響分割後胚胎的恢復和進一步發育。小積累,大收穫You can do it下期更精彩來源:高考生物推薦閱讀:
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