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寫文章一如養娃兒。在自己嘔心瀝血所培養的孩子(科研成果)歷正式面見審稿人之前,總歸是認真拾掇一番的,因而大量的時間和精力必然會花費在結果和討論的撰寫上,深怕一個疏忽便被審稿人拒之門外。

然而,有專註就會有忽視,文章中「方法」部分則像家裡不受待見的孩子,其撰寫過程粗枝大葉不說,有時甚至可以說是錯漏百出。而這也就為後續文章的重複性驗證埋下了隱患,因為「方法」部分理應包含足夠的信息以供其他研究者準確重複你所描述的實驗,如果其中關鍵信息遺漏,別人就無法完全重複你的實驗條件,進而產生不一致的結果,有可能造成誤會,甚至還會被人指責造假。

所以「方法」部分著實是至關重要的,撰寫過程中要力求全面,本文則介紹了一些撰寫論文「方法」部分的小技巧。

實驗設計:影響再現性的因素01對照實驗

實驗中設置對照實驗,可以更好地排除實驗中的影響因素,並且可避免在漏掉實驗種重要結果的風險。以流式細胞術為例,即使是每日的大氣壓力波動也會影響流式細胞儀器對樣品的檢測運行,因而研究者最好每次流式實驗都進行一個空白對照,已排除此類因素對實驗的影響。

通常實驗中需要設置陰性對照和陽性對照實驗,以避免實驗結果中出現「假陰性」和「假陽性」結果。同時,實驗中的樣本最好能有個備份,這樣即使實驗中的樣本出現問題,還有備份樣品對實驗進行補救。

02盲式實驗

盲式實驗有助於減少外部因素對實驗結果的影響,在臨床試驗新葯測試中應用最為廣泛。在單盲臨床試驗中,一半試驗參與者接受試驗治療(藥物),另一半接受安慰劑(模擬)治療,其中參與者並不知道他們接受了哪種治療方式。安慰劑組作為對照,可消除參與者的期望對測試治療結果的影響可能性。而在雙盲研究中,受試者和研究者都不知道試驗參與者接受了哪種治療。

不幸的是,盲式實驗的實行有時可能困難重重,這類情況可能發生在當試驗治療是一種完全新型的干預,而對照組接受標準的治療干預或治療。在臨床試驗中,參與者和研究者知道誰獲得哪種治療的臨床試驗被稱為開放標籤研究。

03平衡性別、年齡和種族間差異

對於最終適用於男性和女性的治療方式,動物試驗和臨床試驗應包括來自每個性別的相似數量的參與者。理想情況下,研究對象或臨床試驗參與者應該在實驗/試驗的範圍內儘可能代表不同人群。同樣的道理也適用於平衡種族和年齡間的差異。當受試人群限於某一年齡段和/或種族時,結果不能被認為是普遍適用的。如果你無法做到平衡實驗對象的性別、年齡或種族差異時,請在論文的討論部分說明實驗方法的局限性。

04足夠的樣本量

樣本量的大小必須反映實驗所需的統計功效程度。例如,一項試點臨床研究通常由10到30名參與者組成。適當的樣本量取決於至少兩個重要因素:誤差範圍(即置信區間)和置信水平。

誤差範圍:如果您將誤差範圍設置為5%,且測試的治療方法對參與者的90%有積極影響,則應該預計未來人群中的85-95%(即後續試驗參與者或患者),會對測試的治療方法產生積極的反應。

置信水平:該數值反應了實際上對治療方法產生積極反應的人群百分比出現在以上誤差範圍的頻率。簡而言之,如果研究中選擇了95%的置信區間,那麼在95%的時間中,85-95%的人群對治療會作出積極回應。

綜合起來,誤差幅度和置信水平可反應出樣本量對測試的人群有多大的適用性。

05實驗對象

文章材料部分要介紹清楚實驗對象的選取方法和實驗對象的來源、特徵。如採用具商標名的儀器、化學試劑或藥品時,還應包括對儀器進行精確的技術說明,並列出試劑或藥品的主要化學和物理性質;有些甚至要求儀器和樣品製造商的名稱及所在地。

對於實驗材料,應採用國際同行所熟悉的通用名,盡量避免使用只有作者的本國同行才知道的專門名稱。實驗用的動物、植物和微組織應準確地標識出(通常按屬、種和世系名列出),並說明其來源和特殊性質(年齡、性別、遺傳學和生理學狀態)、抽樣的要求或標準等。

如果研究對象是人(志願者或病人),則應特別注意擬投稿期刊的具體要求,應交代研究對象的選擇標準,並根據情況兼顧一般性的重要統計特徵(年齡、性別和身體狀況),以及其他與論文主題相關的統計信息(如體重、身高、種族等)。

在文章中如此描述材料和方法既可以估計抽樣誤差,也可以讓讀者了解文章內容和結論的使用範圍。

06實驗試劑

在方法中要介紹清楚每種實驗的設計方案,如用了什麼樣的試劑、每一步驟處理時間、操作手法等等。最後還有必不可少的statistical analysis部分,寫出數據處理的盲選法、測量指標及判斷差異結果的標準等等。

實驗中所用的試劑儘可能選擇市售的試劑。因為市售的試劑在生產後會進行質檢驗證,其質量應該值得信賴。如果研究者根據以前發表的文章自行準備試劑(例如緩衝液),需要對該文章進行引用,同時可聯繫該文章作者以確保在試劑配製過程中出現的疑問都能得到相應的解答方案。如果緩衝試劑的配方未公開,也請清楚描述試劑配製批次中所涉及的每個步驟,包括試劑中各個成分的劑量、製造商和批號等。

07清晰和誠實

文章材料方法部分應該對實驗過程的每一步都做到實事求是、一一交代,這樣才有助於其他研究者按照你的實驗流程獲得一致的實驗結果,增強文章數據的準確性和實驗的可靠性。一般建議在此部分的撰寫中,如果有不想寫的內容大家可以少寫,或者寫的不是很詳細,但是寫下來的一定是非常正確的實驗方法。

方法描述要有的放矢

描述中應給出足夠的細節信息以便讓同行能夠重複實驗,避免混入有關結果或發現方面的內容。必要時,應該完整地描述選擇某種特定方法的理由。如果方法新穎、且不曾發表過, 應提供所有必需的細節。

如果所採用的方法已經公開報道過,引用相關的文獻即可(如果報道該方法期刊的影響力很有限, 可稍加詳細地描述)。比如完全採納了一種以前發表過的方法,在材料與方法的寫作中,一筆帶過即可。在寫作時就直接寫:XXX activity was detected according to the previous method (Tom et al, the journal of xxx, 2015);

如果對已有方法進行了新的或實質性的改進,就要清楚地說明改進的理由。此時可以這樣寫作:XXX activity was detected according to the previous method (Tom et al, the journal of xxx, 2015) with slight modification. Briefly, xxx(這裡簡述你的方法並寫出其中特別的部分即可)。或者可以這樣寫:In this report, a modified protocol based on the method reported by Tom et al was used. Briefly, xxx.

而在數據統計分析方法的描述過程中,如果是普通的統計方法則無需評論或解釋;如果是比較先進的或不常見的統計方法則需要適當引用文獻和/或對其進行適當的解釋。

常用句式

1)XXX cell lines were obtained from xxx and cultured under standard condition containing xxx medium supplemented with xxx.

2)Xxx mice were purchased from xxx company/provided by xxx laboratory. Mice were maintained and genotyped as previously described (reference). Approval for the use of mice was obtained from xxx ethic committee for laboratory animals.

3)Primary xxx culture were prepared from xxx tissue and seeded on glass coverslips coated with xxx.

4)Antibodies specific to A (name, dilution, company) and B (name, dilution, company) were applied in according to xxx protocol.

5)For histological analysis, cells were fixed with xxx and stained against xxx (dye or antibody, dilution, company).

6)Quantitative analysis was performed using xxx test if not otherwise stated. The level of significance was set at *P < 0.05.="" error="" bar="" represent="">

參考文獻:How to Write a Flawless Methodology Section


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