大菱鮃盾纖毛蟲的病理觀察及流行調查
07-16
水產養殖專業 李永勝指 導 老 師付國慶老師摘要:大菱鮃自引入我國10年來,在北方沿海地區已迅速發展成為一項特色產業,產生了很好的經濟效益和社會效益。但是伴隨著養殖範圍的擴大和養殖密度的增加,以及品種的退化,大菱鮃的病害問題日趨嚴重。特別是由盾纖毛蟲引起的病害最為嚴重。盾纖毛蟲傳染力強,危害性大,一旦發生就會給大菱鮃養殖業造成巨大損失。纖毛蟲主要是從魚鰓部侵染魚體,發病期進入腦部、肝臟等器官。發病率高,流行時間長,經常同其它細菌性疾病並發,發病魚死亡率最少30%,很多死亡率接近100%,且死亡多半集中於8周之內。本文將大菱鮃盾纖毛蟲病的病原,癥狀,組織病理學觀察及流行情況作一介紹,以利於養殖戶在生產中防治此病,減少經濟損失、創造更大的經濟效益。關鍵詞:大菱鮃 盾纖毛蟲 病理觀察 流行調查引言大菱鮃屬於鰈形目鰈科,英文名是Turbot,其身體扁平近似圓形,雙眼位於身體左側,有眼側呈青褐色,有點狀黑色素和少量皮刺,無眼側光滑呈白色,背鰭與臀鰭無硬刺,很長,頭部及尾鰭均較小,身體中部肉厚,內臟團小,整個身體的可食用部分比牙鮃多。大菱鮃分布於大西洋東側歐洲沿岸,自圖1 大菱鮃外觀北歐南部直至北非北部均有分布,黑海和地中海沿岸也有分布,主要分布還是北海和黑海沿岸。整個歐洲和西亞沿岸的年捕撈量不超過一萬噸。英國自50年代就已開始養殖大菱鮃,短期內獲得較理想的結果開創了海水魚類養殖的新局面。目前,英國比目魚類已節選出兩個優良品種,即大菱鮃和鰨(Solea solea),其中大菱鮃已達到工廠化生產水平。1992年由黃海水產研究所引進我國,開始示範養殖並取得很好的經濟效益。大菱鮃最高致死溫度是28℃—30℃,最低致死溫度是1℃—5℃,最高生長溫度是21℃—22℃,最低生長溫度為7℃—8℃,最適合生長溫度為14℃—18℃。對鹽度的耐受力最高為40,最低為12。大菱鮃幼魚期攝食甲殼類和多毛類,成魚期攝食小魚小蝦[1]。大菱鮃為底棲型魚類,平時遊動較少,覓餌是越起捕食,性格溫順,互相殘食現象很少見.仔稚魚期,由捕食或餌料至捕食魚肉糜或配合餌料.餌料轉化率相當高,在人工養殖條件下可達到1平方米40千克以上的放養密度,只有鰓及頭部暴露,其他部位相互重疊達60%以上對生長無妨.成魚養殖:大菱鮃養殖可以使用網箱養殖也可以進行溫流水養殖.溫流水養殖,是利用地下井水進行高密度精養.這種井水冬季水溫可達到16度,夏季水溫為16度-23度,大菱鮃的適宜生長水溫為12℃-19℃,其耗氧量遠較虹鱒魚低,在12℃時,0.25千克左右的大菱鮃耗氧量為96毫克/千克,池水PH值=7.3即可.池子直徑為5.5-6米,容積為30-40立方米的水泥池子,每池可放養5厘米的魚苗10000尾,五個月後體重增至100克左右可移入另一池,放養密度是2000-3000尾.再過五個月體重增至300-400克,可移入另一池,放養密度控制在700-800尾。再飼養3-5個月體重可達0.5-0.7千克,即可出池上市。養殖期間,5厘米左右的魚苗每天投餌3-5次,餌料以全價配合飼料為主,當魚苗長至200克左右時可投喂小鮮雜魚、切碎的小雜蝦。大菱鮃的網箱養殖以表層浮式網箱較多,方形,容積為25立方米,先將魚苗放在水泥池裡暫養一個冬天(水溫保持12-15度)使體重增至50克左右,至第二年3-5月份分級放入網箱養殖,放養密度為60千克/立方米,目前英國養殖大菱鮃的最高單位產量為75千克/立方米。大菱鮃是個優良養殖品種,其經濟價值高、餌料轉化率高、生長迅速、耗氧率低、適合高密度養殖。是個很有前途的養殖品種。現在大菱鮃已成為我國北方沿海工廠化養殖的主導品種,養殖地區遍及環渤海,黃海北部和江蘇北部沿岸,少量輻射至福建,廣東沿海。形成了 「溫室大棚 深井海水」[2]開放式養殖模式和「南北接力」「海陸接力」的養殖格局。自引入我國10年來,在北方沿海地區已迅速發展成為一項特色產業,產生了很好的經濟效益和社會效益。但是伴隨著養殖範圍的擴大和養殖密度的增加,以及品種的退化,大菱鮃的病害問題日趨嚴重。特別是由盾纖毛蟲引起的病害最為嚴重,盾纖毛蟲傳染力強,危害性強,一旦發生就會給大菱鮃養殖業造成巨大損失。通過近兩年的研究發現,纖毛蟲主要是從魚鰓部侵染魚體,發病期進入腦部等器官。發病率高,流行時間長,經常同其它細菌疾病並發,發病魚死亡率最少30%,很多死亡率接近100%,且死亡多半集中於8周之內。本文將大菱鮃盾纖毛蟲病的病原,癥狀,危害程度,病理觀察,防治措施及流行情況作一介紹,以利於養殖戶在生產中防治此病,減少經濟損失。1 病原盾纖毛蟲,又叫嗜腐蟲,指狀擬舟蟲,屬纖毛蟲門、少膜綱、腹口亞綱、盾纖目[3]。蟲體略成葵花籽形,長50-75um,寬20-50um,內質不透明,常有多個事物泡及內儲顆粒。蟲體的前半部稍向內側彎曲,頂端裸毛區形成明顯的喙狀突起,程指狀或尖角狀。體被纖毛,後端有一根較長的尾毛,大核位於身體的中央,近球形,小核一個,通常不易觀察到。以橫二分裂進行繁殖[4]。盾纖毛蟲是一種兼性寄生蟲,由於集約化的育苗、養殖,密度大,排泄物多,投餌過量,致使水質過於富營養化,以及日常操作不慎致使魚體受傷或者養殖水體中大量存在該蟲時,便可能侵入魚體導致該病發生。該病全年均會發生,一般多發生於5~8月,有的地區在三月初就開始發病,魚苗、幼魚、商品魚皆可發生。該類纖毛蟲一般斷面為圓形或近圓形, 腹面觀呈水滴狀、長橢球或紡錘狀, 前端常稍尖, 後端鈍圓, 尾端通常存有一根較長的尾纖毛(CC)。胞口(Cs) 位於腹面的淺凹後部(通稱口區) ,口器結構在絕大多數種類包括3 片位於口前的小膜(M 1- 3) 和一列沿口區右側分布的口側膜(PM ) , 胞口後方具由若干對毛基粒組成的盾片(Sc)。體纖毛通常遍體勻布, 體動基列呈子午線方向排列, 多為單- 雙動基系的混合式構造, 即前端為雙動基系, 後部為單動基繫結構。本目種類多具一尾端分布的伸縮泡(CV ),開口常於第二條動基列(SK2) 末端.圖2 盾纖類纖毛蟲的一般形態結構模式[5]CC, 尾纖毛; CCo, 尾纖毛複合體; Cs, 胞口; CV , 伸縮泡; CyP, 胞肛; M 123, 小膜123; M a,大核; M i, 小核; N K, 裸毛區; PM , 口側膜; Sc, 盾片; SK1, SKn, 第1, n 列體動基列F ig. 12 癥狀被感染的大菱鮃攝食量減少或停止攝食,在育苗池或養殖池中分布散亂且常不安地狂動、上浮,狂游。體表、鰭、腮蓋內側發紅,嚴重者吻端和腮蓋潰爛或出血,鰓絲蒼白,粘液增多[6]。有的體色變黑,眼球突出,腹部膨脹[7](見圖3)。解剖檢查可發現腮絲、肝臟退色,腸道鬆弛,腹腔積水。盾纖毛蟲不僅大量存在於大菱鮃患部、體表、腮,也大量見於肝、脾、腎、腦、心,同時大量見於腹水。許多患魚脾、腎、腹水充滿病原體,個別患魚腹水中病原體數量多達每毫升40萬-50萬個。圖3大菱鮃盾纖蟲病癥狀A 顯示成體病魚病灶部位呈白色,出現充血和潰瘍。B 顯示大菱鮃幼體的頭部或鰭部發白Symptoms of infected turbot associated with scuticociliatosisA:Showing severe haemrrhage and ulceration on the whitish foci B:The infected turbot fries showing whitish discoloration commonly the head or fin areas3 病理觀察3.1 材料大菱鮃取自海陽,取個體處於7-10月齡魚種。根據外觀癥狀初步診斷後,自病魚潰瘍部用鑷子或載玻片刮取粘液也可解剖病魚,從鰓或腦顱中取樣做成水晶片在顯微鏡下鏡檢,若發現葵花籽狀、活潑遊動、全身被覆纖毛、大小20~40微米的蟲體,即可確診[8](見圖4)A 正常的纖毛蟲 B用藥後蟲體呈球形圖4顯微鏡下觀察(鰓部取樣)3.2方法3.2.1石蠟包埋切片取材所取材料越新鮮越好,最好在心臟還在跳動時立即進行取材,馬上投入固定液,切取組織的刀剪必須鋒利,切分組織塊時不可來回切割,夾取組織時不要損傷組織,組織塊盡量小而薄,厚度不超過0.5厘米為宜,取材時應注意清潔,組織塊上如有血液、污物及黏液黏著,應用生理鹽水迅速洗滌後再入固定液。固定固定能迅速阻止死後變性,防止組織自溶與腐敗,使細胞內物質(如蛋白質、糖、脂肪、酶等)凝固成不溶性物質,盡量與生活時的形態相仿,能使組織硬化,為製作薄片點滴良好的基礎,使組織內各種物質成份產生不同的遮光率,以達到染色後易於鑒別和觀察各種不同結構。常用固定液有甲醛固定液、Bouin固定液、Carnoy固定液等,直接固定一至二小時.脫水固定後的組織內仍充滿水份.由於石蠟為非水溶性物質,不能與水融合,所以浸蠟前必須用脫水劑除去組織內的水份,這一過程稱做脫水.Bouin固定液固定的材料用70%的酒精浸泡至少14小時,材料要切成薄片必須用石蠟包埋.為使石蠟能透入材料內部,必須除去其內部的水份.在本實驗中用70酒精浸泡,脫水從80%開始,即80%(I)-90%(II)-95%(III)-100%(IV)。透明組織塊經酒精脫水後還不能直接用石蠟包埋,因為乙醇與石蠟不相溶,還必須用石蠟誘導劑即透明劑過渡,能夠同時溶解與脫水劑和包埋劑中。將透明劑逐漸滲入組織,將脫水劑完全排出的過程稱做透明.此時組織塊往往呈現透明狀態。常用透明劑有二甲苯、香柏油等。方法為材料先浸於二甲苯與純酒精的等量混合液中,,然後浸入純二甲苯Ⅰ、純二甲苯Ⅱ。每級20分鐘。浸蠟浸蠟是為包埋做準備,因二甲苯或其他透明劑具有與石蠟相溶的性質,所以將已經透明的組織塊放入熔化的石蠟中,石蠟浸入組織並替換出透明劑,使組織內部硬度均勻,以助切出光整確切片。方法為將標本移入溶解的純石蠟中,放入恆溫箱2小時,中間需換一次蠟,完全除去二甲苯,使石蠟滲入組織。包埋包埋是將組織埋入熔化的石蠟中,待其凝固後使它成包有組織的蠟塊。包埋器有金屬包埋筐、紙制的長盒等。方法為將溶化的石蠟倒入包埋器中,用熱鑷子把材料迅速移入紙盒中,並擺好位置,及時補充紙盒內流失的蠟,等石蠟完全凝固後,註明包埋物的名稱、日期等。修塊、切片將材料連同周圍的石蠟用解剖刀切成小塊,四周離材料1—2毫米,前端離材料宜近,切面應呈矩形,上下兩邊應平齊。將切片固定在切片機上,一般切片厚度為6—8微米。貼片取一滴蛋白甘油,滴到潔凈的載玻片上,用小拇指外側將它塗成薄層,塗抹面積要超過蠟片所用的面積,塗抹得越均勻、越薄越好,用制好的載玻片撈取蠟片,用小鑷子擺正蠟片位置。在濕潤下及時放入64℃的溫箱中兩小時直到蠟片熔化,使蠟片牢固附於玻片上。蘇木精—伊紅染色因染色液為水溶性,故切片經烤乾,必須脫蠟至水方能進行染色。烘片將貼有切片的載玻片放在64℃的溫箱中烘2個小時,以除去殘留的水分,還可以使切片牢牢的貼在載玻片上。3.2.2H.E染色脫蠟把玻片放入盛有二甲苯的染缸中兩次脫蠟,分別為20分鐘,10分鐘。復水經100%-95%-90%-80%-70%各級酒精入水,每級3-5分鐘.蘇木精染色入蘇木精染液,切片染5~7分鐘,至核為鮮紅色,再用流水洗至核為鮮紅色,然後在1%的鹽酸酒精中蘸3-4下,因為適度的酸性環境可以脫去細胞質著染的蘇木精,然後用流水沖洗20分鐘.伊紅染色入伊紅染液5-7分鐘,伊紅主要染細胞質,著色濃淡應與蘇木精染細胞核的濃淡相配合,要求對比鮮明.染色好的切片應該是細胞核為蘇木精染成鮮明的藍色,細胞質為伊紅所染呈桃紅色.脫水、透明在70%—80%—90%的酒精中每級各蘸3—4下,再經95%—100%Ⅰ—100%Ⅱ梯度酒精,每級各5分鐘。在二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中分別透明10分鐘。封片從二甲苯中取出玻片,放在乾淨的吸水紙上,迅速在組織上滴加適量樹膠,上面再加蓋玻片封固.3.3 組織病理學觀察3.3.1胃的外結締組織 胃黏膜上皮細胞壞死,脫落於腔中。纖毛蟲在胃的外結締組織分布較多,主要分布在血管與組織的間隙中(圖5)。3.3.2肝臟在肝臟組織中發現有大量纖毛蟲的寄生,發生較明顯的組織變化,諸如肝細胞腫大,細胞空泡化,細胞結構模糊,胞核固縮以及細胞崩解,可導致局灶性壞死(圖6)。3.3.3腦 在腦組織中出現充血現象,有的毛細血管強烈擴張,裡面充滿了大量的紅細胞,部分腦組織發生局灶性壞死,並發現有大量纖毛蟲寄生(圖7)。3.3.4體表及其皮下深層組織 病灶多發於鰓蓋、鰭基部和背面。纖毛蟲大量寄生於皮下結締組織和肌肉組織中,除了使組織水腫,大量的纖毛蟲寄生繁殖也使組織體積擴大,所以表皮病灶處多有浮腫現象。感染初期纖毛蟲只在組織間隙中出現,而後隨著纖毛蟲大量繁殖,組織壞死,大片的組織空間被纖毛蟲佔據,並引起細胞核固縮、碎裂、溶解,組織變性、潰散、壞死,結締組織炎性細胞增多(圖8)。3.3.5脾臟 纖毛蟲寄生使得組織體積擴大,組織變性、潰散、壞死,結締組織炎性細胞增多,出現紅腫現象(圖9)。3.6 鰓 大量的盾纖毛蟲侵入初級鰓絲和次級鰓絲,特別是次級鰓絲竇狀隙充滿了蟲體,致使鰓小葉的支柱細胞被破壞,血細胞減少,上皮細胞胞核固縮、細胞壞死,最終導致鰓絲竇狀隙強烈擴張,鰓絲變形(圖10)。組織病理學觀察分析表明:腎臟組織變化不明顯,未發現纖毛蟲寄生。嚴重感染的大菱鮃大多數組織器官可見盾纖蟲,尤其在結締組織和組織間隙居多,蟲體寄生處組織破壞嚴重,結構鬆散,細胞稀疏。另外,在體腔中空穴處也積聚了大量纖毛蟲。有時在血管中也能發現少量蟲體。在蟲體大量滋生處以盾纖蟲為主要入侵微生物,常伴有細菌存在。圖5 圖6圖7 圖8圖9 圖10盾纖毛蟲入侵後引起的病理變化4 防治4.1 預防大菱鮃盾纖毛蟲病的大規模發生與魚類的生存環境條件密不可分,環境條件好,魚的抗病能力和應急能力強,受感染的幾率就小,因此增強魚體自身的體質非常重要。大菱鮃養殖在生產上對該病應以預防為主,從源頭上入手,保持水質及飼養環境的整潔,及時清除池底污物減少纖毛蟲滋生條件。日常管理尤其是苗種及商品魚倒池時操作要小心謹慎,防止魚體受傷。育苗養殖控制合理密度,防密度過大。投餌不要過大,堅持「四定原則」。苗種及商品魚倒池時操作要小心謹慎防魚體受傷。勤觀察勤檢查,早發現早治療,對病魚和發病魚魚池進行隔離消毒。4.2 治療目前國內報道中治療盾纖毛蟲類病害的有效方法不多,在實際生產中,胡亂用藥,用禁藥的現象很普遍。本文將作者在實習過程中總結的較為有效的治療方法做簡單介紹,以供廣大養殖戶參考。一旦發現纖毛蟲病,首先應弄清楚發病原因,採取對症下藥,綜合治療的辦法。發病初期,蟲體僅寄生在魚體表淺處時可治癒,若侵入肌肉、腦、內臟深處、鰓絲腐爛嚴重時則回天乏術。如果到發病後期,到目前來說尚無好的藥物、方法治癒。發病初期可採用以下方法治療。4.2.1配合抗菌葯(治療細菌感染併發症),採用200~400ppmd的福爾馬林浸浴l~2小時,連續3~5日。4.2.2加大水交換量,提高水體流量,減少纖毛蟲的附著機會。4.2.3採用淡水浸浴20~30分鐘,連續3~5天。滲透壓是影響原生動物生命活動最重要的限制因子之一,在顯微鏡下觀察一含有大量纖毛蟲的組織液,加淡水浸泡後蟲體在30秒內膨脹死亡。實際生產中使用淡水浸浴魚體20-30分鐘對預防及治療體表的纖毛蟲有很好的療效[8]。4.2.4升降水溫,大多數原生動的生存溫度是4—30度,當水溫高於30度時會因高溫致死,而在低於4度的環境下也不能生存。對犯病魚池通過提溫(24度以上)可以抑制和消除纖毛蟲病。4.2.5在使用各種藥物浸浴的同時,給苗種或商品魚的配合餌料中添加免疫多糖及多維素(特別是Vc、VE),以增強魚體自身的免疫力及體質[9]。一般經過上述治療,3天以後初見成效。一星期明顯見效。實踐證明,按照上述方法科學管理,能夠有效地預防目前蝦類流行病的發生。可再用一星期鞏固療效。從我們治療的病例來看,療效不好的主要原因是耽誤治療或治療方法不當。患病後期,鰓絲嚴重腐爛或纖毛蟲進入腦部的魚體治不好,但大多數魚還可治好。因此發病初期,首先應弄清楚發病原因,採取對症下藥,綜合治療的辦法顯得尤為重要。5 流行調查大菱鮃分布於大西洋東側歐洲沿岸,自北歐南部直至北非北部均有分布,黑海和地中海沿岸也有分布,主要分布還是北海和黑海沿岸。整個歐洲和西亞沿岸的年捕撈量不超過一萬噸。英國自50年代就已開始養殖大菱鮃,短期內獲得較理想的結果,開創了海水魚類養殖的新局面。目前,英國比目魚類已節選出兩個優良品種,即大菱鮃和鰨(Solea solea),其中大菱鮃已達到工廠化生產水平。1992年由黃海水產研究所引進我國,開始示範養殖並取得很好的經濟效益。大菱鮃是個優良養殖品種,其經濟價值高、餌料轉化率高、生長迅速、耗氧率低、適合高密度養殖。是個很有前途的養殖品種。現在大菱鮃已成為我國北方沿海工廠化養殖的主導品種,養殖地區遍及環渤海,黃海北部和江蘇北部沿岸,少量輻射至福建,廣東沿海。形成了 「溫室大棚 深井海水」開放式養殖模式和「南北接力」「海陸接力」的養殖格局。自引入我國10多年來,在北方沿海地區已迅速發展成為一項特色產業,產生了很好的經濟效益和社會效益。目前我國環渤海的山東半島、遼東半島和河北、天津沿海地區均適合於養殖大菱鮃,尤其是能打出優質海水井的沿岸帶地區更具有開發優勢。但是伴隨著養殖範圍的擴大和養殖密度的增加,以及品種的退化,大菱鮃的病害問題日趨嚴重。特別是由盾纖毛蟲引起的病害最為嚴重,盾纖毛蟲傳染力強,危害性強,一旦發生就會給大菱鮃養殖業造成巨大損失。通過近兩年的研究發現,纖毛蟲主要是從魚鰓部侵染魚體,發病期進入腦部、肝臟、脾臟、腎臟等器官。發病率高,流行時間長,經常同其它細菌疾病並發,患此病的大菱鮃一般日死亡率0.5%~2%,累積死亡率達30%~70%,很多死亡率接近100%,且死亡多半集中於8周之內。本文將大菱鮃盾纖毛蟲病的種苗來源、放養密度、水質管理、發病情況、發病率、死亡率、流行特點、防治措施等進行認真調查。以利於養殖戶在生產中防治此病,減少經濟損失。這次調查從3月初到5月15日開始,主要針對海陽市大閆家鎮養殖魚棚進行調查了解。據官方統計海陽市大閆家鎮朝里、朝外、莊上三個村共有魚棚600個。由於去年遭遇颱風和水源緊張、水質惡化等問題,現有魚棚504個正在養殖。養殖模式為「溫室大棚 深井海水」工廠化養殖。全年水溫控制在7--22度,適養水溫為10--22度,最佳水溫為15--18度,此時大菱鮃生長速度最快。而這個溫度正是盾纖毛蟲大量繁殖的適宜溫度。2000—2004年山東省海陽市大閆家鎮有多家養殖戶先後發生過此病,引起苗種及商品魚大量死亡,死亡率高達70%以上,危害很大,目前尚無特效療法。養殖死亡率很高,是大菱鮃工廠化養殖中危害最嚴重的疾病之一,在實際生產中主要以預防為主。實習過程中以走訪的形式對大閆家鎮305個魚棚進行調查。這305個魚棚在去年養殖過程中有39家患上了纖毛蟲。患病魚棚占所調查魚棚的12.79%。其中患病魚棚中最嚴重的死亡率高達90﹪以上。盾纖類纖毛蟲除侵害魚體表、皮膚、鰭、肌肉外,也會侵入到腹腔、腎臟、胰臟甚至腦,而造成大菱鮃特別是稚、幼魚大量死亡,其危害程度很大,一般在發生此病的同時還可並發其它疾病,若不及時採取措施危害將會更大。去年有一家大菱鮃養殖戶有20000尾魚發病,每天死亡100—400尾,日死亡率0.5%~2%,累積死亡率達90% 以上,出現「治到最後,死到最後」的悲慘局面,直接經濟損失達二十餘萬元。給養殖戶帶來的損失可謂慘重!通過近三個月的調查發現,纖毛蟲主要是從魚鰓部侵染魚體,發病期進入腦部等器官。導致魚體直接死亡的原因是魚鰓部腐爛,而致死亡。纖毛蟲病的發病時間少則半個月,多則一二個月,發病時間很長,目前來看,混合感染或繼發性感染導致纖毛蟲病有以下幾個情況:①鰓絲弧菌感染引起的繼發性纖毛蟲病。②細菌性魚病引起的併發症纖毛蟲病。③抽入含有大量纖毛蟲的蝦池中的海水。④仔、秩魚本身在魚苗廠引入的纖毛蟲[10]。當前大菱鮃盾纖毛蟲病的主要癥狀:被感染的大菱鮃攝食量減少或停止攝食,在育苗池或養殖池中分布散亂,且常不安地狂動、上浮、狂游。體表、鰭、腮蓋內側發紅,嚴重者吻端和腮蓋潰爛或出血,鰓絲蒼白,粘液增多,嚴重者糜爛,粘臟,或附著纖毛蟲。有的體色變黑,眼球突出,腹部膨脹。解剖檢查可發現腮絲、肝臟退色,腸道鬆弛,空胃,胃內充滿淡黃色積液,腫脹;腸道內無食物,發炎腫脹變紅;肝胰腺腫大,顏色變淺,腹腔積水。病魚反應遲鈍,浮游於水面或沉于于水底,不久死亡。盾纖毛蟲病流行的主要特點:一是發病時間提前2004年大菱鮃集中發病時間在7月下旬-8月上旬,發病時大菱鮃體重達400-600克左右,發病後死亡率高,群眾損失慘重。今年從3月中旬開始發病,發病時間大體提前4個月,發病魚大、小均有,群眾損失較大。二是病程較長,呈遲緩狀態調查中發現,發病魚池發病初期1-3天魚死亡量不大,從第4天開始死亡量急劇增加,有時達到幾百尾,採用藥物控制後,一般5-6天後死亡量逐漸減少,攝食量逐漸恢復,但是每天仍然能夠發現部分魚死亡,數量減少而趨於穩定,但不能完全痊癒。三是發病範圍廣,傳播速度快調查後發現,朝里村發病率較高,基本達到30%左右,而且傳播速度很快。這與養殖大環境息息相關。整個養殖模式為魚棚周圍為蝦池,由於水源緊張,養殖戶把井打在蝦池附近或在蝦池裡面,這就為後期不同魚棚之間盾纖毛蟲的交互感染埋下了隱患。流行病的主要原因:一是苗種質量差大菱鮃在我國北方養殖歷史較長,在不斷的育苗過程,親魚種質不斷退化,後代抗病力逐漸減弱,體質越來越差,此種病具有垂直傳播的特點,相當一部分仔魚就是病原攜帶者。當然,育苗過程中的一些措施不當也是導致魚苗質量差的重要原因。二是水質污染嚴重養殖所用水源,主要是地下井水,水井離蝦池太近,養殖用水從魚棚流入蝦池,過濾至井中循環使用,水中大量病原體滋生,養殖業存在嚴重的致病隱患。連續多次超劑量使用消毒藥物,使水體中細菌抗藥性不斷增強,纖毛蟲經過變異毒力增加,病害控制更加困難。調查中我們發現,在病害流行前,魚鰓絲水腫、固著性纖毛蟲病以及亞硝酸鹽中毒等病害時有發生,這些病害都與水質不良有直接或間接的關係,也是導致目前纖毛蟲病廣泛流行的直接原因。三是管理不夠科學大部分養殖戶普遍注意苗种放養後定期消毒和使用藥餌,但是有的環節存在較多的問題,如:放苗前水泥池、水體徹底清淤消毒,水質培養,敵害生物殺滅等;放苗以後的營養,消毒後水質的恢復,及時的增氧等;長期超量使用各種消毒藥物,藥物的配伍和禁忌等這些環節的做法不科學。由於魚類的免疫系統存在著很大的差異,養殖過程中腸炎是常見病,得腸炎後肌體抵抗力迅速下降,為病原體入侵創造條件,這是誘發纖毛蟲病非常重要的原因。一旦發現纖毛蟲病,首先應弄清楚發病原因,採取對症下藥,綜合治療的辦法。發病初期,蟲體僅寄生在魚體表淺處時可治癒,若侵入肌肉、腦、內臟深處、鰓絲腐爛嚴重時則回天乏術。一般纖毛蟲是從魚鰓部侵染魚體,發病期進入腦部等器官。導致魚體直接死亡的主要原因是魚鰓部腐爛,而致死亡。因此在養殖過程中,保持良好的養殖環境很重要。首先,注意保持水質的鹽度、溫度、透明度,不要有大的變化,有條件的廠家定期測量溶解氧、氨氮含量等水質指標。其次,定期清理池底和消毒。對養殖池採用半個月掃底、消毒一次(可採用甲醛或含碘消毒劑),一個月倒一次池子(倒池後用抗菌葯進行葯浴),投餌後大排水一次,及時清污,保持池底的清潔衛生。減少患纖毛蟲的機會。6 討論大菱鮃適應低水溫環境,抗逆性強,肉質鮮美,而且生長速度快。自引入我國10年來,在北方沿海地區已迅速發展成為一項特色產業,產生了很好的經濟效益和社會效益。但是伴隨著養殖範圍的擴大和養殖密度的增加,以及品種的退化,大菱鮃的病害問題日趨嚴重。特別是由盾纖毛蟲引起的病害最為嚴重,盾纖毛蟲為廣溫、廣鹽、偏酸性種類,對環境適應性強,傳染力強,危害大[11]。故在保證大菱鮃正常的養殖條件下,難以從水環境方面考慮控制該纖毛蟲的生長繁殖。為防止該纖毛蟲病的發生,必須適當用藥。到目前為止,還沒有有效的治療手段。作者在實習過程中總結出較為有效的預防措施供大家參考。福爾馬林、孔雀綠、高錳酸鉀、鹵素類消毒劑可在低濃度、短時間內殺死蟲體。但這幾種葯均為外用藥,僅可將魚體表、潰爛處、鰓上的蟲體殺死,對於寄生到魚體內組織器官的蟲體無作用。故該病只能以預防為主,保持水質及飼養環境清潔,及時清除池底污物,防止魚體受傷。疾病初期,蟲體僅存在於魚體表淺出尚可治癒,採用福二馬林200-300ppm葯浴1h,孔雀綠10ppm浸浴10-20min,高錳酸鉀10-15ppm浸浴10-20min,或淡水浸浴病魚5-15min[12]。葯浴過程中要時刻觀察魚的反應,若有缺氧現象要及時加水。大菱鮃背部表皮較厚,皮膚堅韌有彈性,表面分布有少量角質化鱗,不同於牙鮃,所以盾纖毛蟲很難通過體表侵入魚體,只能通過鰓部和較軟的頭部,這就為及時發現病情增加了難度,在實際生產中定期消毒可有效防止盾纖毛蟲在大菱鮃的寄生感染[13]。若纖毛蟲通過體表潰爛、鰓經過血液循環進入腦、肝臟、腎、脾臟、胃腸、腹腔時則沒有有效的治療手段。為防止大菱鮃繼發感染細菌,在使用外用藥的同時使用抗生素防止細菌感染是非常必要的。在實習過程中發現,單純使用甲醛200ppm葯浴,對纖毛蟲的殺滅效果不佳。氟苯尼考葯浴後,鏡檢發現部分昏迷的蟲體又可大量復活,未殺死的蟲體仍可繁殖,僅在一定程度上減緩了纖毛蟲的繁殖速度。而採取淡水浸泡的辦法,能使蟲體大部分脫落、死亡或昏迷。如果兩種辦法結合進行,能夠取得最佳效果可短時間抑制住纖毛蟲的繁殖[14]。通過病理切片觀察,我認為大菱鮃體表潰爛綜合症通常是養殖過程中的機械損傷, 導致一些易感個體(或群體) 在條件致病菌兔莫拉氏菌或兼性寄生纖毛蟲指狀擬舟蟲作用下發生的。養殖水體中的纖毛蟲和致病性細菌從潰爛處大量侵入大菱鮃體內, 隨血液循環至體內各組織器官。還有一種可能是,體表纖毛蟲在低濃度藥物刺激下向魚體內部鑽,特別是鰓與腦靠的很近,蟲體很容易鑽入腦。侵入的纖毛蟲主要對大菱鮃肌肉組織及腦組織造成嚴重的機械損傷, 導致組織變性、壞死, 同時纖毛蟲大量吞噬血細胞, 引起大菱鮃貧血; 致病性細菌大量侵入引起大菱鮃肝臟、胃脾臟、心臟等組織器官變性, 失去應有的功能。因此, 病原纖毛蟲導致大菱鮃貧血及組織器官嚴重的機械損傷, 而致病性細菌造成組織器官變性, 共同導致大菱鮃死亡[15]。致謝畢業論文是在付國慶老師的親切關懷和悉心指導下完成的。在此謹向付老師致以誠摯的謝意和崇高的敬意。在實驗和論文的完成過程中,得到了利洋水產科技有限公司的張新林經理,煙台大學崔龍波老師和廣大同學的的熱心幫助和支持。在此對他們在實驗過程中給予我無私的指導和幫助表示衷心的感謝!最後向參加論文修改、評閱和答辯的各位老師和資深專家教授表示深深的謝意![參考文獻][1] 姚善成 叢嬌日 海水魚類養殖技術 青島:青島海洋大學出版社,1998,10[2] 雷霽霖 大菱鮃養殖技術 (修訂版) [m]上海:上海科學技術出版社 2005[3]宋京輝張元良 大菱鮃盾纖毛蟲防治新技術 科學養魚 2005 (1) 49-50[4] 鄭春波王世黨於詩群王同永 大菱鮃與牙鮃盾纖類纖毛蟲病的防治技術2005 10[5] 宋微波 朱明壯 陳子桂 王 梅海水養殖水體中危害性纖毛蟲原生動物研究I.盾纖目習見類群的口器結構及鑒別特徵 青島海洋大學學報 2000 4 30(2):207-216[6]Xu K, SongW. 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