兒童炎症性腸病患者的胰腺和小腸杯狀細胞自身抗體檢測

07-14

原文：Pancreatic Autoantibodies and Autoantibodies Against Goblet Cells in Pediatric Patients With Inflammatory Bowel Disease(JPGN 2012: 55: 429-435)

推薦理由

炎症性腸病(inflammatory bowel disease，IBD)是指原因不明的一組非特異性慢性胃腸道炎症性疾病。常見為非特異性潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis，UC)與克羅恩病(Crohns disease，CD)，但也存在其他類型的IBD，如未定型結腸炎、膠原性和淋巴性結腸炎等。根據上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院一份最新的關於兒童炎症性腸病的調查報告：過去十年間，上海0-14歲兒童炎症性腸病的發病率從0.5/100萬上升到了2011年的6.1/100萬，增長了12倍。除了常見的腹瀉、便血、腹痛等消化道癥狀為主的臨床表現，兒童炎症性腸病也與兒童生長發育遲緩及體重減輕等全身癥狀相關。本研究第一次採用間接免疫熒光法多基質聯合檢測兒童IBD患者，尤其是採用轉染細胞區分檢測胰腺抗原rPAg1（CUZD1）和rPAg2（GP2），並系統闡述了IBD的其它各種抗原檢測與應用。

摘要：

炎症性腸病（IBDs），包括克羅恩病（CD）和潰瘍性結腸炎（UC）是一類慢性易複發的腸道炎症性疾病。病因比較複雜，是由多因素相互作用所致，主要包括環境、遺傳、感染和免疫因素。目前認為，IBD是疾病易感人群體由於異常的免疫反應和正常腸道菌群的耐受缺失導致的慢性腸道炎症反應[1]。這種說法的依據是發現針對微生物抗原產生的抗體以及已確認NOD2/CARD15是CD的易感基因[2]。除了基因傾向和環境因素，自身免疫反應機制認為是IBD發病的主要原因，有多例IBD相關自身抗體被陸續報道。

利用間接免疫熒光法（IIF）檢測成人CD患者，外分泌胰腺抗體（PAB）檢出率相對較低，僅27%-39%[3, 4]。而在IBD患者的未患病一級親屬中PAB的檢出率增高表明這些抗體產生的基因遺傳因素[5]。採用基於抗原轉染細胞的間接免疫熒光法來檢測抗外分泌胰腺的自身抗體，代表了目前IBD血清學檢測的新方向[6,7]，如蛋白多糖CUZD1和GP2轉染細胞，轉染了重組抗原1和2：rPAg1和rPAg2。基於成人的關於PAB抗體和CD亞型之間關係的研究結果是相互矛盾[4,5,8,9]。

據報道,抗小腸杯狀細胞抗體（GAB）在UC患者中的檢出率為28%-30%，在IBD患者一級親屬中為20%[3,10]。針對成人的研究結果存在不一致的情況，目前尚未在兒科患者中進行相關抗體檢測。

另外兩個研究最深入的保守抗體是與UC相關的抗中性粒細胞自身抗體（核周型，即pANCA）和與CD相關的抗釀酒酵母抗體（ASCA）。在兒科IBD患者中，UC中pANCA的靈敏度為57%至83%，特異性為65%至97%，而在CD中ASCA的靈敏度為44%至76%，特異性為88%至95%。ASCA的陽性率或者高滴度可以用來提示患者是否需要外科手術[15-17]。pANCA與「UC樣」的CD亞型相關。

本研究的目的是確認PAB，rPAB，GAB，ASCA和pANCA在兒科IBD患者中的檢出率。同時，我們也對不同抗體和NOD2/CARD15多態性、臨床表現，對治療的反應以及腸外表現（EIMs）的相關性展開研究。

本研究首次在兒童期IBD發病患者中評估檢測PAB、rPAB和GAB的診斷價值以及抗體-臨床表型間的相關性。此外，我們研究了ASCA和pANCA、NOD2/CARD15突變體指標聯合檢測的準確性。從目前的研究中可以看出，兒童CD患者中的PAB陽性率為34%，這與成人中的檢出率相似。rPAB的檢出率比PAB要高。PAB在CD成人患者中有27%到39%的檢出率，在UC患者中只有0%到5%。Stocker等（3）報道PAB僅能在CD患者中檢出，而其它研究發現和我們的研究結果一致，均發現UC患者中PAB有更高的檢出率（20.4%）（4,5,26）。即使CD和UC中的PAB特異性較高，而靈敏度較低，但聯合檢測多種抗體可明顯提高靈敏度。最近的研究發現，GP2表達在濾泡相關上皮的腸膜細胞的頂端表面，這對宿主微生物接觸和激發細菌特異的粘膜免疫反應是必須的（24,25）。

成人中，PAB和CD亞型之間的關聯性是存在矛盾結果的。在比利時的一項研究中，PAB與CD的狹窄性病變是負相關的（5）。相反，其它的歐洲的研究發現，在狹窄或穿透亞型的患者中PAB的檢出率是增加的（4,9,26）。Lakatos等報道了PAB陽性和肛周疾病及EIMs是有關聯的（4）。在一個法國研究中，PAB與CD的早期發病相關（23）。本研究發現，在UC或CD中，胰腺自身抗體與臨床表現，治療方案，手術的必要性或EIMs無關聯。

針對不同的結腸抗原的自身抗體在UC患者中被發現，比如GAB。在以前的研究中，GAB在成人UC患者中被檢測出，其發病率為28%到30%（3,10）。相反，在其它的研究中，GAB在UC和CD的發病率都很低（4,11）。這些差別的原因可能是因為不同的方法學，比如酶聯免疫吸附法和熒光模型的抗原基質是不同的，GAB產生具有多功能的粘蛋白：它作為一種潤滑劑，為宿主防禦微生物入侵提供非特異性反應。通過複雜和嚴格的調節性糖基化，粘蛋白作為結合微生物的誘餌，維持了正常的腸道菌群。然而，這些抗體的意義尚不清楚。

綜上所述，胰腺自身抗體（PAB，rPAB）和GAB是IBD特異性的抗體，但是靈敏度較低，且它們不與臨床亞型相關。這些抗體的聯合檢測能夠提高檢測的靈敏度，因此，在IBD的檢測中，聯合檢測被推薦使用。

參考文獻（略）