「三分鐘」幫您看懂抗體檢測報告——藍耳篇

隨著養殖行業，規模化，技術化的不斷發展。豬場對於免疫抗體檢測的需求越來越多。兩年前，小編在中牧生物的平台上，發表了一篇解讀豬瘟抗體檢測報告的文章，傳送：http://mp.weixin.qq.com/s/LRjJpFZ2rRpL4mZQrcCdeA今天，小編從操舊業，為大家準備了藍耳抗體檢測報告的解讀方法，與大家分享。首先，讓我們先重溫一下酶聯免疫吸附實驗（ELISA）抗體檢測的原理：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）：酶聯免疫吸附試驗，簡稱ELISA，是實驗室最常用的檢測方法。ELISA具有準確性高、檢測時間短、價格低廉、判斷結果有客觀標準、結果便於記錄和保存等優點，適合於大批標本的檢測，廣泛應用於食品安全檢測、醫療檢測以及免疫實驗分析等領域。 基本原理： 抗原抗體的特異性結合以及抗原或抗體的酶標記。酶結合物與相應抗原或抗體結合後，可根據加入底物的顏色反應來判定，是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，可根據已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪製標準曲線並依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。測定對象：可以是抗原也可以是抗體。 藍耳疫苗抗體的免疫評估：1.OD值：如果OD值＜0.6，樣品應判定為PRRSV2（藍耳抗體）陰性；如果OD值≥0.8，樣品應判定為PRRSV2（藍耳抗體）陽性。但由於假陽性抗體的存在（主要是野毒感染與隱性帶毒干擾）。目前的ELISA檢測手段並不能100%準確的反映豬群藍耳抗體情況（藍耳天津株由於配備了專用試劑盒，可以做到區分疫苗抗體和野毒抗體） 2.變異係數：Coefficient of Variation(CV)變異係數計算的是平均個體的變化，以平均滴度背離的百分數來表示公式如下： CV≤40%,顯示豬群有一個均衡的、相似反應。（表示豬群內不同個體之間抗體水平穩定，免疫效果良好）CV≥60%,顯示了豬群抗體滴度反應變化高於正常估計值。（表示豬群內不同個體之間抗體水平差異較大；生產管理水平，疫苗質量、免疫程序制定有提升與商榷的餘地） 實例報告解讀此報告樣本采自北京某豬場，存欄900頭母豬。豬群均為首次免疫藍耳，使用的疫苗為中牧股份生產的威聯（藍耳－豬瘟二聯活疫苗）。此豬場由於之前未做過藍耳疫苗免疫，免疫程序為斷奶仔豬25日齡免疫一頭份，後備豬在配種前免疫了一頭份，經產母豬普免一頭份。 藍耳抗體陽性率送檢樣本共有45個，後備母豬樣本有6個，經產母豬樣本有13個，仔豬26個。其中OD值≥0.8的合格樣本,共有43個，藍耳免疫合格率95.5%。OD值≤0.6的陰性樣本共有2個，其中經產母豬1個，仔豬1個結果出現負值，分析出現此問題的原因是由於檢測操作失誤干擾所造成的。（若OD值≥3，則懷疑豬群有野毒感染的情況發生）。 變異係數CV值變異係數作為衡量豬群抗體穩定性與均勻度的指標，對評判免疫結果同樣有重要的意義。各位豬倌在研究自己豬場的檢測報告時注意不要漏掉CV值的讀取。那麼，回到這份報告當中，通過上述公式計算，最後可算得變異係數CV值為：後備母豬26%，經產母豬為33%；仔豬群為41%。表示豬群抗體總體穩定，免疫效果確實。上面這些信息，都是對抗體檢測原理以及對其數值概念的解讀。那麼，我們應該如何利用好這些數據呢？接下來，我們就來說說檢測報告的應用。 免疫效果評估免疫評估標準：種豬群（公豬和母豬）：藍耳疫苗免疫後4-6周，檢測抗體，要求 ：免疫合格率≥90%,CV≤40%。商品豬：藍耳免疫後4-6周 ，要求：陽性率 ≥80%,CV≤40%。後備豬（全群檢測）：進入隔離舍後1-2周、進入配種舍前1個月（6-6.5月齡），要求： 免疫合格率 ≥40%，陰性豬補打疫苗，3周後複檢，不合格則淘汰。按照上述標準進行評估，使用中牧股份威聯產品免疫後的種豬群，在免疫合格率（95.5%）與變異係數（26%，33%，41%）這兩項指標均達到優秀水平。威聯免疫後仔豬藍耳抗體合格率（96.1%）優秀，變異係數（41%）合格。 推薦免疫程序仔豬：28-35日齡，免疫一頭份後備母豬：配種前 14 周免疫一次，3 周后二免 ，每次一頭份經產母豬：每3-4 個月免疫一次 ，每次一頭份
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