甲狀腺細針抽吸細胞學檢查
圖1。FNA活檢所需物品簡單而便宜。包括酒精棉球,4 x 4紗布墊,10-mL塑料注射器,25號1英寸,非切割斜面針頭,玻片,酒精,和特製的機械持針器。持針器或注射槍——通常使用的是Cameco注射槍,如圖1所示。持筆式一次性10-mL塑料注射器一次性25或27號,一英寸長針頭玻片一面末端呈毛面,厚1mm酒精棉球用於立即浸入無水酒精中濕固定塗片的酒精瓶手套——現行的職業安全健康管理制度要求活檢操作者必須戴防護手套。囊液收集容器,收集囊液後送到細胞實驗室患者的姓名,門診號碼,活檢部位,及其他相關信息都要轉交到細胞學實驗室利多卡因——準備好1%利多卡因,以備活檢時需要局部麻醉的患者患者對患者的甲狀腺腺體需要仔細的觸診,並確定擬活檢結節。應該向患者詳細解釋具體的操作程序,對患者的任何問題都應進行詳細解答。我們告訴我們的患者,FNA一般不需要局部麻醉,2-4次抽吸只需要幾分鐘,除活檢局部可能有輕微疼痛及輕微出血和腫脹外,一般不會有明顯併發症。活檢可以在病床或者醫生辦公室的檢查床上進行。不論在什麼地方活檢,都應始終有一名護士或臨床助手協助活檢。患者可取坐位或仰卧位,我們喜歡仰卧位。患者取仰卧位時需頸過伸以充分暴露甲狀腺,可以在肩部枕一枕頭以更好的暴露甲狀腺。囑患者在穿剌過程中不要吞咽、說話或活動。最好讓患者隨時了解活檢的進展情況。活檢結束時切實壓迫穿剌部位,然後讓患者坐幾分鐘後離開。偶有患者會有疼痛或頭暈等,這時最好觀察幾分鐘後如果沒有明顯問題,再讓他們離開。在操作過程中最好有護士或者臨床助手在場協助。
圖2。A FNA操作時患者的體位:仰卧位,頸肩部枕一枕頭以便頸部伸展,充分暴露甲狀腺。B 注射器固定在持針器上。C 確定結節並用非穿刺側手固定。操作者站在患者有甲狀腺結節的對面一側。現行的OSHA制度要求戴手套以避免通過血液傳播的疾病。D 針頭迅速穿過皮膚進入結節內,即刻輕緩抽吸。針頭內一旦有抽吸物出現,馬上消除抽吸負壓並拔出針頭。FNA活檢大量報道、綜述及教科書對各種FNA活檢技術均有詳細的描寫(10-15)。雖然大多數報道對這一技術基本方法的描述是一致的,但也有很多改進結果的報道。患者取正確的體位,仔細確定腫塊及其位置,穿剌時有充足的光線及有助手協助等都很重要。行活檢的醫生應該站在患者的側面,有病變的對側。確定穿刺的結節部位,用酒精消毒表面皮膚。聚烯吡酮或其他無菌技術都不必要。用Cameco持針器固定10ml塑料注射器,習慣用右手的操作者用右手握住持針器。(圖. 2 B)一隻手掌握持針器,另一隻手(左手)的兩個手指固定結節(圖2C)。針頭迅速穿過皮膚進入結節。一旦針尖進入結節,即抽吸針管產生輕柔的負壓並在結節內垂直來回穿剌(圖2D)。這種方法易於抽吸到細胞成分並很容易被吸入針管。在這一5-10秒的穿剌過程中應始終保持負壓狀態,只要看到乳頭內有液體或抽吸物出現就立即消除負壓並拔出針頭。如果吸出液體提示該結節為囊性,則保持負壓狀態持續抽吸至所有的液體都被抽吸出。在拔出針頭前鬆開注射器的針栓消除真空狀態是很重要的,這可使抽吸物保留在乳頭而不至於被吸入針管內。接著,將針頭與注射器分開(圖3A),吸入5ml空氣。將針頭重新裝在注射器上,針尖斜面朝下,在每一片玻片上滴一滴抽吸物(圖3C)。重要的是抽吸前所有的玻片都要標記好並按順序擺放在附近的桌面上。用另一張載玻片製備塗片,方法類似血塗片的製作(圖3D)。將採用巴氏染色法的玻片立即浸入95%酒精中濕固定;採用吉姆薩染色者空氣乾燥,不用固定直接送實驗室。
圖3 A從注射器上快速取下針頭。B吸入5ml空氣,將針頭重新接在注射器上。C 針頭斜面朝下,在每張玻片上滴一滴抽吸物。玻片在穿剌前標記好擺在桌上備用。D 用另一張載玻片製備塗片,類似血塗片的製作。隨後立即將塗片浸入酒精瓶中固定。儘管有些專家認為至少應該穿刺6次(16),但通常穿刺2—4次 (10,12,13) 。一般一個結節應該塗片8 ~10張。最好從結節的周邊部取材,並多部位穿刺,以保證樣本的代表性(10,12)。對大的結節,穿剌時應該避免刺入中心部分,因為中心部位常有退變和液化壞死,從而降低取得可診斷樣本的機率。對於囊性病變,應該抽出全部囊液並對殘瘤組織行FNA檢查;抽出的囊液放在塑料杯中送細胞學檢查。我們每次穿刺都用新的針頭和注射器。細針非抽吸活檢曾有幾位專家對細針非抽吸活檢方法做過描述(1,12,17),通常認為這項技術能使對甲狀腺組織的損傷減到最低,從而減少血液稀釋。行FNNA檢查患者的準備與FNA相似,但是不需要注射器或抽吸設備。將25號針頭象拿鉛筆一樣握住,輕輕刺入結節後來回移動5~10秒(圖4)。通過虹吸作用抽吸物會流入針頭,只要看到針頭內有抽吸物,就立即拔針,接上內有空氣的注射器。接著,推動針栓將吸出物打在玻片上。可重複穿剌幾次,載玻片準備同FNA一樣。
圖4。細針非抽吸活檢:示針頭、體位以及穿刺方向。針頭進入欲穿剌組織後來回移動直到看到吸出物進到針頭,然後拔出針頭。活檢後用4 x 4棉墊壓迫穿剌部位,防止出血。出血停止後用創可貼貼敷,觀察幾分鐘確定沒有問題後再讓患者離開。
圖5。FNA後立即切實壓迫活檢部位,然後用創可貼貼敷並讓患者留觀幾分鐘再離開。併發症甲狀腺FNA非常安全,尚無嚴重併發症,如神經、組織損傷或血管損傷大出血的報道(10-14)。即使局部很小血腫也很少見。可有針刺痛感及穿刺點皮膚顏色改變。使用抗凝葯和水楊酸製劑並不妨礙FNA活檢。由於穿刺引起甲狀腺癌沿穿剌道的種植轉移極少見,截止目前幾無報道,因此大多數專家並不認為這是個值得考慮的問題(18)。囊性病變穿剌後可發生囊內出血。筆者曾經見到一位患者在FNA活檢後數小時內發生結節內出血而導致劇烈疼痛,最後對他採取了外科手術切除。病理證實結節內為穿剌所導致的新鮮出血。但這是我們單位15,000多例活檢中所發生的唯一一例。細胞學診斷正常甲狀腺活檢標本中常有小量濾泡細胞和膠質。濕固定的塗片常用改良的巴氏染色法染色,巴氏染色可以清晰地顯示核的結構。空氣乾燥標本常用Romanovsky法染色。MGG是改良的Romanovsky染色,有時在甲狀腺細胞學檢查中也使用。細胞學診斷結果分四種:良性(陰性),可疑,惡性(陽性),標本不滿意(難以診斷)。良性細胞學結果多結節性甲狀腺腫,良性微小濾泡性腺瘤或正常甲狀腺一般診斷為「膠性結節」,鏡下呈較為鬆散的片樣濾泡上皮細胞及膠質,血液成分,偶見巨噬細胞。膠性結節含有豐富的膠質,濾泡細胞很少。但細胞的數量及類型、膠質的多寡都有很大變異。(圖6)
圖6.膠性結節。正常甲狀腺上皮細胞呈鞘狀,示核型一致,胞漿淡染(巴氏染色,×100)。另一良性診斷是橋本甲狀腺炎,它在FNA標本上有明顯的特徵表現:較多淋巴細胞,嗜酸性變細胞,膠質很少或缺無(圖7)。
圖7.橋本甲狀腺炎。A,嗜酸性變細胞團,胞漿豐富核較大,周圍圍繞著不同類型的淋巴細胞。(Papanicolaou; x60.) B,大量淋巴細胞和嗜酸性變細胞。(May-Grunwald-Giemsa; x250.)。亞急性甲狀腺炎(肉芽腫性)為一很少用穿剌抽吸細胞學診斷的良性疾病。細胞特點為,塗片上有多核巨細胞,上皮組織樣細胞和散在的炎性細胞(圖8)。
圖8。亞急性甲狀腺炎。多核巨細胞,背景有多種炎性細胞成分。缺乏膠質。(Papanicolaou; x64.)惡性細胞學乳突狀癌是最常見的甲狀腺惡性疾病,很容易通過FNA診斷。典型的細胞學表現為:乳突狀結構,細胞核大而不規則,可有核溝。砂粒體可有可無,但一旦出現則乳突狀癌的可能性非常大(圖9)
圖9。乳突狀甲狀腺癌。A 濾泡細胞結構,核大而不規則,可有核溝,染色質暗淡。(Papanicolaou;x400)B 組織準備表現出典型的乳突狀結構。(Hematoxylin-eosin;x50)甲狀腺髓樣癌在甲狀腺癌中佔5% ~ 10%,可表現為甲狀腺結節或頸部腫塊。甲狀腺髓樣癌的抽吸物通常富含細胞。常有澱粉樣物質,但也有例外,沒有膠質。(圖10)
圖10.甲狀腺髓樣癌A,免疫過氧化物酶染色示降鈣素陽性(x100.)。B.鬆散連結的紡錘樣細胞;澱粉樣物質呈無定型的藍染物質,與瘤細胞關係密切。(巴氏染色; x400.)FNA結果高度惡性的腫瘤可經細胞學診斷,但要鑒別為原發癌或轉移癌並不容易。過去二十年的實踐已經證實了FNA診斷的可靠性和有效性(11-14,16,19-23)。FNA活檢在診斷甲狀腺結節中的作用已被充分肯定。由於FNA的安全性和經濟性,目前已成為甲狀腺結節診斷的首選檢查方法。在大多數診所,FNA已經成為一種通常由內分泌專家進行的標準檢查。細胞學診斷一個有足夠細胞成分且塗片和染色較好的標本可看作是可以作出診斷或滿意的標本,其診斷結果可以是良性,可疑或惡性。細胞學診斷的良性病變佔50%~90%(平均70%) (10,14, 22,24,25);可疑惡性或不確定性病變為10%~30%(平均20%)(24,25);惡性或陽性細胞學診斷比例自1%~10%不等(平均5%)。Caruso 和 Mazzaferri (24)對9個系列包括9,000多名患者在內的統計結果如下:良性,74%;惡性,4%;標本量不足和可疑病變各佔11%。我們通過對7個大的系列18000多例細胞學標本的分析得出了相似的結論:良性,69%;惡性,4%;可疑,10%;標本量不足,17% (25)。假陰性診斷假陰性結果意味著對惡性病變的漏診。假陰性率一般為1.5% ~ 11.5%(平均<5%)16,19,24,25)。假陰性率是指細胞學診斷為「良性」,後來在甲狀腺手術後確定為惡性的百分率。細胞學診斷的假陰性率取決於後來進行外科手術及組織學檢查患者的數量。在大多數回顧性分析中,細胞學診斷為良性的患者中有不足10%後來進行了外科手術,因此應抱著懷疑的態度來看待假陰性結果(24,25)。儘管這一點很重要,但是大多數專家認為即使所有患者都進行了甲狀腺手術,真實的假陰性率仍然不會超過5%。一些穿剌很有經驗且有專門甲狀腺細胞病理醫師的研究中心其假陰性率更低。假陽性診斷假陽性率自0 ~ 8%不等(平均3%)(19,24,25)。假陽性是指FNA細胞學診斷「惡性」,但後來的組織學檢查為良性。誤診原因閱片或穿剌取材異常是導致誤診的主要原因(12,13,25,26)。橋本氏甲狀腺炎很可能是最常引起細胞學假陽性診斷的原因。其次是誤將濾泡細胞及嗜酸細胞腺瘤當作乳頭狀癌診斷。甲狀腺淋巴瘤行FNA活檢時對其淋巴細胞可能會診斷為橋本氏甲狀腺炎,從而引起假陰性診斷。取材不當或抽吸出細胞成分太少是引起假陰性結果的部分原因。例如:直徑小於1cm的結節可能太小,很難準確的穿刺取材,而直徑大於4cm的結節又很難對所有部位都取材,這些都會增加誤診的可能性。最終應由細胞病理專家通過確定診斷標準並按照其標準來排除惡性診斷(5)。腫瘤細胞的問題從濾泡性病變或嗜酸細胞性病變穿剌出大量細胞的標本一般不會直接診斷為惡性,但可能有提示惡性的一些細胞學表現(8,10,12,13,27)。因此,細胞病理學家將其稱作「可疑惡性」,因為其細胞學特徵不能肯定診斷為惡性,但也不能排除。必須行組織檢查才能確定診斷。有些非腫瘤性病變的標本也可呈大量細胞,淋巴細胞甲狀腺炎可有嗜酸性變細胞。細胞學診斷為濾泡性腫瘤其中14%可能為惡性,診斷為嗜酸細胞性腫瘤者有15%為惡性(20,25)。Kini (28)認為濾泡性腺瘤和濾泡性癌通常可以通過核的大小來進行鑒別,但細胞學對嗜酸細胞病變的確定有困難。其他病理學家則認為良性和惡性濾泡/嗜酸細胞腫瘤僅靠穿剌細胞學檢查難以區分,必須手術切除行組織病理學檢查。有些專家已經研究了有關濾泡細胞性腫瘤的問題。Tuttle等人(29)對149例細胞學診斷為濾泡細胞性腫瘤的患者進行了研究,認為男性、單結節且結節直徑大於4cm者惡性的危險性較高。Schlinkert等人(30)對219例濾泡細胞性腫瘤患者的研究表明,年輕患者,男性,如果為單結節,且直徑大於4cm者則很可能為惡性。最近,Baloch等人(31)研究了184例濾泡細胞性腫瘤患者,認為惡性危險因素為:男性,年齡較大(>40歲),大結節(>3cm)。總體來說,他們發現70%的腫瘤是良性的。細胞學不能確定診斷如果標本中細胞成分太少則稱之為不能確定診斷或標本不滿意,所佔所有標本的2%~20%(平均15%)(19,24,25)。影響FNA不能確定診斷率的因素有:操作者的技術,結節的血運情況,不滿意標本的認同標準,及結節囊性成分的多寡。總體來說,一張質量好的FNA塗片至少含有6組保存好的細胞簇,每簇至少有10—15個細胞。對首次穿剌為不能確定診斷者再次穿剌,至少有50%可取得滿意標本。儘管增加穿刺次可以提高診斷率,但對最佳的穿刺次數仍然有爭議。一般來說,大多數報道認為每個結節行2—4次穿刺就足夠了。在Cho最近的報道中,153例最初不能確定診斷者中7%為惡性。在27例外科手術者中37%為癌。在超聲引導下重複穿剌的診斷率為66%;不用超聲引導重複穿剌的診斷率為56%;總體來看,重複穿剌的診斷率為62%。診斷的準確性數據資料顯示FNA的敏感性為65%~98%(平均83%),特異性為72%~100%(平均92%)(19,24)。陽性或可疑結果預測值大約為50%。細胞學診斷總的準確性接近95%。FNA指南出台指南是為了幫助提高準確性和樣本的合格率(36).FNA活檢應該由受過甲狀腺物理檢查和甲狀腺活檢訓練的人來進行。有經驗的操作者進行甲狀腺FNA可大大提高診斷準確性。穿刺標本應該有序的從結節的不同部位取得,尤以外圍部位較隹。確保標本中有足夠濾泡細胞十分重要。應有細胞病理醫師,尤其在甲狀腺細胞學方面有經驗的醫師閱片並作出診斷。如果重複穿刺仍不能取到足夠標本,我們採用超聲引導下穿剌。如果最後結果仍不滿意,對大多數結節而言應行外科切除。有幾位專家已經提出了減少假陰性率的建議(1,3,10,16). 在對甲狀腺FNA最近的一篇綜述中, Belfiore 和 La Rosa (37)認為通過下面的步驟可減少假陰性結果:·熟練的活檢技巧·避免根據不滿意標本作診斷·對囊性退變,嗜酸性細胞及淋巴細胞的診斷要謹慎·隨訪中至少重複一次FNA·當臨床或者超聲檢查有可疑跡象時應再次行FNA檢查或建議外科手術為了最大限度的降低假陽/陰性結果,我們遵循列於表1的指南*表1.提高細針抽吸細胞學檢查的準確性和更好處理甲狀腺結節的步驟步驟說明內分泌專家行活檢操作利於較好的甲狀腺物理檢查及積累FNA經驗有豐富經驗的細胞學專家閱片提高細胞學診斷水平小於25px或大於100px結節應謹慎處理增加誤診的可能;超聲引導FNA提高診斷準確性在結節不同部位穿剌2-4次改善細胞學取材難以確定診斷者重新活檢重新活檢可使一半得以診斷細胞學難以確定診斷者不是陰性5%-10%不能確定診斷的結節隱藏有惡性病變無濾泡細胞的穿剌為不滿意此標本不能認為是排除惡性的陰性切除大於100px或複發性囊腫惡性可能性很大切除細胞學診斷可疑的結節惡性可能性為10%—30%切除臨床上可疑但細胞學診斷為良性的結節除非用其他方法證實,否則應認為假陰性超聲引導FNA活檢高頻超聲檢查能顯示頸部解剖和甲狀腺形態學上細微結構 (1)。現在的超聲設備可為攜帶型,可在辦公室使用,操作簡單,機器價格也比以前實惠很多,因此越來越多的內分泌專家將超聲設備作為辦公室設備之一。超聲應用範圍很廣。當頸部觸診比較困難,如頸部比較短、豐滿或者肥胖時,超聲可以彌補體格檢查的不足。超聲檢查不僅可以顯示不能觸診到的小結節(< 1 cm),還能顯示直徑2.0~ 3.0cm但是因為位置的局限性或者頸部的解剖原因而不能觸診到的結節。超聲也可用於協作排除囊液或對原來單純觸診條件下穿剌不能確定診斷者在超聲引導下再次穿剌。最近的幾項研究結果表明,超聲引導FNA的診斷準確性要優於單純觸診FNA(40-43)。超聲引導FNA取材的滿意活檢比率為85%~95%。應用超聲引導,可以準確的選擇活檢穿刺點,可在囊腫的壁上或實質部分取材,從而可大大提高診斷的準確性(40-42)。此外,超聲引導FNA可完全排出囊腫內中容物,使囊腫完全萎陷。有報道顯示,聯合應用FNA和超聲檢查可使甲狀腺癌的檢出明顯提高,並能較早發現。應用超聲引導行經皮酒精注射最早用於治療持久性或複發性甲狀旁腺功能亢進症,尤其是那些外科手術高風險性的患者。近來酒精治療已經應用於甲狀腺結節(44-48)。Lippi等報道了一項包括429例患者在內的大型多中心義大利研究,其中56%為毒性結節,44%為高功能非毒性結節。在超聲引導下將酒精注入到結節內,治療後12個月74%患者的甲狀腺功能生化指標轉為正常。Papini 及同事(45)近來綜述了經皮注射乙醇在治療甲狀腺結節方面的作用。他們提出經皮注射乙醇治療甲狀腺結節的適應症包括毒性熱結節,非毒性熱結節,毒性多結節性甲狀腺腫以及甲狀腺囊腫。單髮結節,結節體積小於10 mL者經治療後結節完全消失的可能較反應較那些結節體積大者大的多。經皮注射乙醇治療一般在門診進行,治療過程不超過10分鐘就能完成,也不需要局部或者全身麻醉。經皮注射乙醇治療一周一至兩次,通常治療四到八次就可完成。經皮注射乙醇治療的併發症有暫時性發音困難,單側聲帶局部麻痹,疼痛以及發熱。尚無發生持久損傷的報道,已經證明,如果操作熟練的話其副作用很輕微。值得注意是,治療後血清甲狀腺球蛋白水平常急劇而顯著升高,但是血清甲狀腺激素水平僅輕微升高。沒有證據表明注射的酒精進入了血液循環,因為經皮注射乙醇治療後血清乙醇水平並沒有升高。Zingrillo 和 colleagues (49)最近報道了對41例大(>10 mL)的良性冷甲狀腺結節應用經皮注射乙醇治療的結果,隨訪時間12至36個月。這些患者的癥狀都明顯的減輕了。他們總結認為經皮注射乙醇對於有癥狀的大的良性冷結節也為一安全而有效的治療方法,應該作為手術風險性高或者拒絕行手術治療患者的另一種選擇。在最近的前瞻性隨機研究中,Bennedbaek 和他的同事(50)比較了單次經皮注射乙醇治療與T4抑制治療對甲狀腺功能正常患者的單發實性膠性甲狀腺結節的療效,要求參與者甲狀腺結節較小(體積<10 mL)。12個月後,經皮注射乙醇治療組結節減小的均數優於T4治療組,表明單次經皮注射乙醇治療比甲狀腺素治療更有效。很明顯,這還需要更長時間的繼續跟蹤研究。FNA的失誤細胞病理學者的專長及其經驗避免診斷失誤的關鍵。確定穿剌是否合適,細胞的非典型性,是否應用免疫染色及淋巴細胞性甲狀腺炎與淋巴瘤的區分等都是重要的影響因素。結節較大時更容易產生假陰性結果。為了提高取材的可靠性,穿刺應該選取結節的多個位點,而不是在一個點反覆穿刺。在一個細胞成分很少的樣本中找不到惡性細胞並不能排除惡性的可能。如果是多結節的甲狀腺,應該儘可能對每個結節都進行穿剌。重複活檢需要重複活檢的指征為:結節進行性增大,抽吸後囊腫又複發者,原來的FNA不能確定診斷以及經T4抑制治療後結節無變化者。一般來說,細胞學診斷為良性結節者不需要再次穿剌。但是,對剛開始從事FNA活檢的人來說,在FNA 6~12分鐘後再作一次活檢,有助於給診斷提供更多資料以減少假陰性率,提高FNA的檢查質量。在最近的報道中,Chehade等人認為重複FNA可以將假陰性率降低到1.3%。因此,重複穿刺活檢可以看作是防止漏診癌腫(假陰性)的保障,而FNA癌腫漏診較高是大家公認的局限性。微信名:超聲介入技術微信ID:chaosheng120
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