液相色譜&質譜聯用分析檢測方法（實例講解）

06-26

大家好，我是配方師小在。

之前測評過的四款面膜，我答應過給大家做一下安全性的篩查。

因為手頭標樣有限，我們並沒有做已知所有的抗生素和激素項。（有的標樣買都買不到）因此，我主要還是針對國標和超國標內違規幾率較大的項進行篩查。

上次的潔顏粉結果公布的時候，很多小夥伴們不是說內容太少了么，那麼這次除了公布結果之外，今天我也會給大家講講檢測的一些原理，以及怎麼看這些譜圖。感興趣的同學就繼續看下去。

【抗生素篇】

由於我們主要是做初篩，測定激素和測定抗生素所用的方法有差異性。那麼這裡我們先來講一下抗生素的初篩檢測方法，抗生素我們是用的液相色譜法。

液相色譜法的基本原理是塔板理論，可能有個別同學在分析化學課程上在打瞌睡，這裡順便來補下課。

塔板理論

這個理論是色譜法的基石，但其實直接理解起來還是比較複雜，所以我用很通俗的語言給大家解釋。（希望分析課老師不要打我）

看見這個黑色的塔了么。假如我用玻璃球，鐵球，木球，石球從塔頂一下倒進去。根據高中物理知識，我們可以想像一下，不同材質，不同大小的球和塔里的塔板的摩擦力會有差異，所以他們滾動下落的速度會有不同。我們忽視掉球之間的碰撞（但不忽視摩擦），那麼只要這個塔足夠足夠的高，能讓這個球滾很久的話，我們就會發現一個規律，相同的材質和大小的球會集中在一段時間內陸續從塔底出來。

這個簡單的解釋換成色譜柱的話也好理解了，大家把待測分子和色譜柱之間的分子間作用力看成剛才說的摩擦力就比較好理解了。

另外，塔板理論中這個現象會有著很好的重複性，換句話，不管做幾次，相同的球都會在相同的時間段內陸續滾出來。所以這個特點就可以被我們很好利用起來，鑒別一些成分了。

明白這個，我們現在來延伸到應用上。

標準樣品

但是還有一個問題，就是我們怎麼知道哪種球（分子）是我們要找的呢？於是我們首先要做一件事，就是先放一個這種球下去，看看這貨多久的時間段滾出來。那麼我們放的這個球，就叫做標樣。

色譜圖

6種抗生素混標標準色譜圖

1-磺胺（保留時間：4.142min）

2-甲硝唑（保留時間：6.983min）

3-鹽酸美滿黴素（保留時間：9.231min）

4-土霉素（保留時間：16.345min）

5-去甲基金黴素（保留時間：21.009min）

6-氯黴素（保留時間：27.957min）

這個圖裡面的六個出峰的地方就是我們放入的抗生素標樣。他們在特定的時間流出，同時有一個最高位置，我們把這個最高出峰的時間叫做保留時間。

那麼，如果我們再後續的產品裡面有這個物質，也就勢必會在相同的保留時間內有一個峰出現。所以，當我們把待測樣品打進色譜的時候，如果在譜圖中出現和標樣相同或者無比接近的保留時間，那麼就表明，有可能添加了此種抗生素，那我們就需要做進一步的確定。

拿春雨這款面膜舉例，因為我們並沒有找到和標樣保留時間重合的峰，因此這次初篩表明沒有檢出這幾種抗生素，其它面膜依次類推，也沒有檢出這8種抗生素。所以最後總結出這麼一份報告。

【激素篇】

講完了抗生素檢測，我們來講一下激素檢測，激素檢測我們用的是液相色譜&質譜聯用。剛才色譜知識已經和大家講過了，相信大致的原理大家也能理解，那麼這裡我們介紹下質譜。

質譜法

我們剛才說到，如果出現和標樣保留時間重合的峰，就表明有可能含有和標樣相同的成分。但這裡也可能會出現特例，什麼意思？如果把保留時間比喻成一個人的名字，那麼同樣有可能出現相同名字的人，所以，如果我們要進一步辨別這個人，就得採用另外的方法了，這個方法就是質譜。

我們知道，人除了有自己的名字以外，還有基因這種更加本質的所在。所以如果是同一個人（同一種分子），那麼他的基因分離出來對比也是必然重合的。這就可以接地氣的理解成為質譜的原理。（再次希望分析化學老師不要打我）

一般來說，質譜儀的工作原理，首先是將這個分子進行電離，然後打碎成一些碎片離子，這些碎片離子就是這個分子的「基因片段」，然後通過電場進行統一的分離後，我們就可以得知碎片的信息。當我們擁有某種標樣的時候，就可以輕鬆比對兩者是否有不同。

所以，如果我們參考的離子碎片高度重合，那麼表明和標樣是同一種物質，但如果這些碎片都不重合，即使是在前面液相處理的時候有相同的保留時間，它們也不是一個東西。

另外，我們還可以通過質譜儀的信號強弱來確定物質的百分比含量。

液質聯用

液相色譜&質譜聯用，簡單來說，就是把這一堆同樣名字的人（同樣保留時間的物質）單獨叫出來（分離出來），然後依次比對他們本質的基因片段（質荷比）。雖說直接對比基因片段（質荷比）有時候也可以出結果，但是先用名字（保留時間）來結合辨別效率會更快，準確度也更高，這也就是為什麼要做液相色譜&質譜聯用的原因。

說了這麼多，大家應該都能明白了，那我們直接來看一下圖。

質譜圖

三種激素標樣的質譜圖

這個就是我們幾種激素標樣的譜圖，前面兩張收集時間的圖大家不用看。只用看一下最後一張圖裡面的豎線，比如激素-地索奈德，有兩條豎線323.1和399.1，表明是其中被打碎了的兩個特徵性碎片離子。當然，我們做簡單鑒別，可以只選取其中一個做比較，但如果這個碎片重合了，那我們就需要同時借用兩個離子來進行再次的確認。

蒂佳婷面膜的質譜圖

那麼現在請看到這個圖，這是我們測的蒂佳婷面膜的其中三個激素項檢測的質譜圖。

1.標樣的質荷比參考圖，這個前面介紹過了。

2.總離子流圖，代表這段時間有物質通過。

3.待測樣品的質荷比響應情況，Not Found 表明沒有檢出這項激素。

以此類推，這次檢測的四款面膜在我們範圍內也都沒有檢出相關的激素項。

此次抗生素和激素檢測，這四款面膜在我們篩查的範圍內均未檢出違禁物，因此相對來說是安全的。那麼後期，我們也將代替消費者加強此類物質的篩查，並擴展篩查的範圍，給大家提供一個安心的護膚品購買環境，並幫助凈化行業風氣。

最後，希望這篇文章能給予對分析化學這門課程搞不太懂的同學一些簡單的啟發。

我是配方師小在，正式測評再見吧。