水產養殖水體弧菌實用檢測方法
06-26
弧菌實用檢測方法 一、器材和試劑 (如圖A) 電爐一台、培養皿(大)10個、100ml量筒1個、移液管1支、酒精燈1個、三角塗布棒1個、三角燒瓶500ml1個、250ml燒杯1個、天平1個、TCBS培養基1瓶、酒精1瓶,棉布2張。
二、樣品採集 1、用無毒塑料瓶採集水下約10cm處水樣,採好的水樣需蓋緊瓶。 2、採得的水樣立即送檢,否則,應將樣品置於冰瓶或冰箱中,但也不得超過24h,否則將影響檢驗結果。 三、檢驗步驟 1、倒平板 (如圖B)
1) 稱量100克TCBS弧菌瓊脂粉和1000ml冷卻開水,倒入三角燒杯中,加熱攪拌,溶解瓊脂粉,直至沸騰。 2)在滅菌操作台上,將沸騰後的培養基冷卻到50~60℃,分別倒人經滅菌的各培養皿中,每個培養皿約10~12mL,待其冷卻凝固,倒置於無菌泡沫箱內保存備用。 注意:倒好的平板內不能有水珠或水層。 2、菌液接種 (如圖C)在滅菌操作台上,取水樣(可稀釋)0. 05mL,滴入制好的培養皿培養基上,用滅菌的三角塗布棒將菌液塗抹均勻,平放於操作台上數分鐘,使菌液滲入培養基。
3、弧菌培養 (如圖D)將接種培養皿倒置滅菌泡沫箱內培養20小時左右,取出計數菌落。4、菌落計數 (如圖E)分別點數綠色菌落和黃色菌落數量,乘取水樣的稀釋倍數,即可得該水樣的綠色和黃色弧菌總數。
5、廢物處理 (如圖F) 經計數後不用的培養基,需經滅菌煮溶後,方可到人排水溝。經常性檢測蝦塘水體的弧菌密度。要求總弧菌的密度控制在5000菌株/毫升以下,綠弧菌的密度控制在300菌株/毫升以下。
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