早期胚胎性別的鑒定

06-21

胚胎的性別鑒定方法有很多種，近年來分子生物學的發展給胚胎性別鑒定帶來了技術性的革命。

（一）細胞生物學方法

利用X、Y染色體形態上的差異，通過染色體核型鑒定胚胎細胞性染色體，進而鑒定胚胎的性別。分析性染色體需要用分裂中期的細胞，這對胚胎是一種損傷。

（二）免疫學方法

在8-細胞期至早期胚泡期，哺乳動物的雄性胚胎表達雌性胚胎所沒有的細胞表面因子，即H-Y抗原，利用H-Y抗原和抗體免疫反應的原理可以進行胚胎的性別鑒定。

（三）測定卵裂球

X染色體連鎖基因劑量鑒別胚胎性別，從胚胎中取出一個卵裂球，採用雙重微量測定法，測定其與X染色體連鎖的轉移酶和與常染色體連鎖的轉移酶的活性。由於在8-細胞階段雌性胚胎中的兩條X染色體均有活性，因此可根據HPRT活性在基因劑量上的兩倍差異，鑒別出雄性和雌性胚胎。

（四）分子生物學方法

1.Y染色體特異性DNA探針

利用Y染色體特異的DNA探針與Y染色體的DNA進行特異性結合是鑒定胚胎性別的一種方法。早在20世紀80年代就有將牛的Y染色體特異的DNA重複序列作為探針用於牛胚胎的性別鑒定的研究報道。這種方法的準確率很高，特異性強，操作繁瑣。

2.PCR技術應用於胚胎性別鑒定

PCR技術來進行檢查有較高的準確率，且操作簡單，快速，微量。

用PCR鑒定胚胎性別的主要程序：

根據Y染色體上的性別決定基因或特異性片段設計引物，同時設計一對公母共有基因引物作為內對照，避免假陽性的發生；

用顯微操作或徒手從胚胎中取出幾個細胞熱處理後進行PCR擴增；

電泳檢測, 能同時擴增出Y-染色體上相應片段和公母共有基因片段的胚胎即為雄性胚胎，而只能擴增出共有基因片段的胚胎即為雌性胚胎。