仿製葯一致性評價成功案例介紹

山東則正醫藥技術有限公司成立於2016年1月。2月3日公司與山東一家大型製藥企業簽署了戰略合作協議，承接其全部基葯目錄品種的一致性評價。3月31日又與江蘇一家企業簽署了戰略合作協議，承接其十個品規的一致性評價。公司目前已開展了七個品種的實驗工作，品種涵蓋普通口服固體製劑、緩釋片和腸溶製劑。公司目前與多家企業進入了商務簽約階段，包括一家大型跨國企業。

本公司的最大特色就是參比製劑的「反向工程」研究。本文以公司目前進展最快的HQ-001片作為案例介紹我公司一致性評價的思路、流程，並介紹具體的實施成果。公司於今年3月份獲得HQ-001的參比製劑，隨後開展了涵蓋溶出曲線和有關物質的預實驗，繼而對參比製劑進行了逆向剖析、小試處方工藝研究等，僅用了3-4個月的時間，即確定了HQ-001片的處方，特徵溶出曲線f2最高達到了91。

1、思路

（1）採用「逆向工程」研究方法，對參比製劑處方、工藝進行詳細剖析，提高仿製葯與參比製劑體外溶出曲線的相似度，進而提高體內BE試驗的一次通過率；

（2）按照DoE理論進行實驗設計，借鑒工程學中的量綱分析理論，採用「無量綱」 准數來描述製劑工藝放大過程，保證工藝放大的相似性；

（3）基於品種的特點，處方完成初步研究和中試放大後，儘快開展預BE試驗，如結果預示二者在正式人體BE中等效，則開展正式BE試驗，提高研發效率與質量，降低風險並節約時間及成本。

2、逆向工程

（1）文獻調研與參比製劑選擇

HQ-001片的原研公司為輝瑞。本品在國內曾有生產及上市，規格：5mg，但供貨不穩定，市場佔有率很低。我們根據CFDA頒布的《普通口服固體製劑參比製劑選擇和確定指導原則》，推薦客戶選擇了輝瑞美國生產的HQ-001片備案作為參比製劑。同時，我們購買了輝瑞美國生產的HQ-001片，用於一致性預評價實驗、參比製劑逆向剖析和小試處方開發等non-GxP工作。。

（2）生產企業所提供產品的體外一致性評價

通過生產企業所提供產品與參比製劑體外溶出行為、有關物質等關鍵指標的對比，確定是否進行二次開發。

參考CFDA《已上市化學藥品變更研究的技術指導原則》，《普通口服固體製劑溶出度試驗技術指導原則》；《FDA口服固體製劑溶出度試驗技術指導原則》，日本厚生勞動省《仿製葯生物等效性試驗指導原則》選擇合適溶出介質制定合適的體外溶出行為對比方法，對生產企業所提供產品與參比製劑的體外溶出行為進行對比，結果表明生產企業所提供產品即自製製劑與參比製劑體外溶出不一致，需對處方工藝進行二次開發。

（3）參比製劑「逆向工程」研究

參比製劑的輔料為乳糖、澱粉、微晶纖維素、硬脂酸、二氧化硅，通過相應的分析檢測手段對參比製劑進行逆向工程研究，測得各成份的含量。同時，採用X射線粉末衍射（XRPD）中的透射方法，對參比製劑中的原料葯存在晶型進行剖析。

l 晶型剖析

採用X射線粉末衍射（XRPD）中的透射方法，對HQ-001參比製劑中原料葯晶型定性分析，結果確認參比製劑中原料葯的存在晶型為文獻報道的晶型V。

l 硬脂酸處方量剖析

方法：氣相色譜法

線性範圍：10.6-170.2μg/ml（r=0.9999）；

檢出限：2.128μg/mL；定量限：4.256μg/mL；

系統精密度試驗：RSD%≤0.86%；

平均回收率：100.9%，RSD%=1.38%；

重複性試驗：RSD=0.48%；

結論：適用於硬脂酸的檢測。

l 澱粉處方量剖析

方法：碘顯色法

線性範圍：12.0-14.0μg/ml（r=0.9999）；

精密度試驗：RSD%＜0.5%；

平均回收率：82.8%；

重複性試驗：RSD=6.3%；

結論：適用於澱粉的檢測。

l 乳糖處方量剖析

方法：高效液相色譜法蒸發光檢測器

線性範圍：0.33-1.67mg/ml（r=0.9998）；

平均回收率：103.4%；

重複性試驗：RSD=1.7%；

結論：適用於乳糖的檢測。

l 二氧化硅處方量剖析

方法：電感耦合等離子體發射光譜法測定二氧化硅含量

檢測限0.0681 μg/ml；定量限0.2271μg/ml；

精密度試驗：RSD%=4.84%；

線性範圍：0.0～8.0μg/ml（r=0.9989）；

平均回收率： 91.7%，RSD%=3.12%；

結論：適用於二氧化硅的檢測。

l 微晶纖維素處方量剖析

總片重減去原料葯、硬脂酸、乳糖、澱粉、二氧化硅後剩餘量，即為微晶纖維素的處方量。

3、原料藥理化性質分析

（1）晶型一致性研究

採用X射線粉末衍射（XRPD）的方法，對HQ-001仿製製劑中原料葯晶型及其所用原料葯定性分析，結果確認所選原料葯及自製產品的晶型與參比製劑一致，均為文獻報道的晶型V。

（2）雜質譜比較

選擇歐洲藥典、美國藥典和中國藥典方法對原料葯有關物質情況進行分析，比較原料葯與參比製劑的雜質譜，制定原料葯內控標準。

4、原輔料相容性試驗

通過原輔料相容性試驗選擇合適的輔料型號及廠家，以降低產品出現穩定性問題的風險，提高處方開發成功率。同時考察不同來源的輔料（進口或國產）對產品穩定性的影響。

5、實驗室處方工藝確定

在參比製劑剖析所得的各輔料用量基礎上，設計合適的用量範圍，並採用均勻設計試驗，以f₂值為評價指標，確定最佳處方工藝。

結果：用確定的處方工藝製備的樣品體外5條溶出曲線相似度均高度重合，最有區分力的溶出介質的溶出曲線相似度f₂達到了91。

6、小試處方工藝的確定

在實驗室處方工藝的基礎上，採用小試生產設備，使用國產或進口輔料，連續生產1000-5000片，以f₂值為評價指標，確定小試規模最佳處方工藝，並評估使用國產輔料的風險。選擇粘合劑的用量、高剪切的速度和時間為關鍵參數，設計三因素兩水平的正交試驗，同時考察顆粒水分對壓片過程的影響，建立了粘合劑用量和高剪切的速度與時間對顆粒粒度分布，流動性和可壓性，以及f₂值的影響。

結果：用小試設備製備的樣品體外5條溶出曲線相似度均高度重合，最有區分力的溶出介質的溶出曲線相似度f₂最高達到了90。小試結果及隨後的研究表明，澱粉，硬脂酸和二氧化硅可採用國產來源，乳糖和微晶纖維素推薦使用進口來源。

以體外溶出實驗結果作為最終評價依據，確定以處方6的配方和工藝作為小試處方工藝，並以此指導中試放大。

以下為處方6-1、處方6-2（處方6平行製備2次）和參比製劑的溶出曲線，其中處方6-1的f2值為90，處方6-2的f2值為86。所用溶出介質為pH值6.5的磷酸鹽緩衝液，該緩衝液是所選溶媒中最有區分力的。

圖：6-1、處方6-2（和參比製劑的溶出曲線）

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