DNA甲基化與肺癌療效及預後判斷

06-11

前面我們已經初步認識了主要的導致肺癌的抑癌基因的甲基化。事實上這些甲基化的抑癌基因作為分子標誌物不僅可早於傳統的腫瘤標誌物輔助腫瘤的診斷，它們對於肺癌的療效評價及預後判斷也密切相關，下面來詳細了解這些甲基化基因在預後和療效評估方面的應用：

1、MGMT

MGMT是一種重要的DNA 修復酶，在修復烷化劑造成的DNA 損傷中發揮重要作用。MGMT啟動子區的超甲基化會導致腫瘤細胞對烷化劑的敏感性增加，從而引起細胞損傷及死亡。有臨床試驗證實，對於複發的SCLC患者，MGMT啟動子高甲基化者，對烷化劑替莫唑胺的反應性優於MGMT未甲基化者[7]。然而，有研究發現，對於腦轉移的NSCLC 患者，MGMT 啟動子的高甲基化，可能意味著切除轉移瘤後更大的複發可能性[4]和更短的患者生存期（2.5個月 vs. 9.7個月）[8]。

2、人類mutL同系物1（hMLH1）

hMLH1基因是DNA 錯配修復基因之一，主要功能是修復DNA 複製錯誤，維持基因穩定性。

有研究認為，hMLH1甲基化可能在腫瘤化療耐葯中發揮了重要作用，甚至可能介導順鉑耐葯。吳芳等通過MS P 分析，發現NSCLC耐順鉑細胞株中存在hMLH1啟動子的高甲基化失活，而在敏感株中未發現甲基化，用去甲基化藥物作用於耐受細胞株後可增強細胞對順鉑的敏感性[10]；並證實hMLH1甲基化狀態與NSCLC患者的無病生存期相關，是手術切除後、順鉑輔助化療後發生腫瘤複發和轉移的危險因素[11]。

3、RASSF1A

RA S S F1A 是一種抑癌基因，是近年來發現的在腫瘤中甲基化程度最高、最多見的基因之一。張卉[12] 等檢測了150 例NSCLC 發現，RASSF1A 啟動子高甲基化的患者預後較RASSF1A 未甲基化的患者差（中位生存期：22個月 vs.57 個月），Cox 回歸顯示，RASSF1A啟動子甲基化狀態是NSCLC術後的預後相關因素。Yanagawa N等[13]亦發現，RASSF1A甲基化的病例五年生存率顯著低於未甲基化組（58.6% vs.78.1%）。Jun Wang等的回顧性meta 分析證實，對於手術治療的NSCLC患者，R A S S F1A 高甲基化是一項獨立的預後影響因素，其無病生存期及總生存期均顯著低於未甲基化的患者[14]。

4、胰島素樣生長因子結合蛋白3 (IGFBP-3)

IGFBP-3是IGFBP 家族的成員，可阻斷IGF-I 介導的促有絲分裂和抗細胞凋亡，被認為是一種候補抑癌基因。Caceres 等[16] 通過基因表達晶元分析，發現順鉑耐受組IGF B P -3 高甲基化比例顯著高於順鉑敏感組（14/19 v s .2/17,p<0.001），而用s i R N A 沉默敏感株的I G F B P -3 表達可誘導細胞對順鉑的耐受。Cortes- Sempere M等[17] 進一步發現，腫瘤細胞中IGFBP-3 啟動子甲基化導致IGFBP-3 蛋白表達缺失，順鉑治療時可能通過特異性抑制IGFIR 通路轉而活化PI3K/AKT 通路，從而誘導對順鉑耐葯。

5、p16

p16基因的蛋白產物是細胞周期依賴性激酶（CDK）的抑制因子，通過抑制R B 蛋白的磷酸化，將細胞周期阻滯於G1 期。Brock 等發現p16、CDH13、RASSF1A和A P C 的甲基化狀態與肺癌的複發的相關性。腫瘤組織和縱隔淋巴結中同時檢測到p16 和C D H13 高甲基化的患者，其術後短期複發的可能性顯著高於未甲基化組（HR：15.5）[18]。研究者認為這些基因在正常淋

巴結中高甲基化提示可能存在顯微鏡無法檢測到的微轉移灶，對預測疾病的複發情況可能有意義。

其他基因的異常甲基化與肺癌的療效評價及預後判斷

1、DAPK

DAPK是一種鈣離子和鈣調素依賴的絲氨酸和蘇氨酸蛋白激酶，參與干擾素-γ、腫瘤壞死因子-α、Fas等誘導的細胞凋亡過程，具有促進凋亡的功能，DAPK的表達缺失與其基因CpG島過甲基化有關。近來，有研究認為DAPK超甲基化與NSCLC細胞株對西妥昔單抗和厄洛替尼耐葯有關[5]。此外，DAPK甲基化與NSCLC預後相關，DAPK啟動子超甲基化的NSCLC總生存率顯著低於未甲基化組[23]。

2、TFPI-2

TFPI-2是一種絲氨酸蛋白酶抑製劑，可抑制多種金屬蛋白酶。下調TFPI-2可增強腫瘤細胞的侵襲潛能。TFPI-2的甲基化狀態是NSCLC的獨立預後影響因素，對於無遠處轉移的NSCLC 患者而言，TFPI-2甲基化的患者預後較差（5年無病生存率：6.1%vs. 35.5%）[6]。

此外，NSCLC中報道較多的預後相關的甲基化位點還有結腸腺瘤性息肉病基因（APC）、脆性組胺酸三聯體（FHIT）、H鈣粘蛋白（CDH13）等[24]。

由上文可見，肺癌相關抑癌基因的甲基化除了有望應用於腫瘤的早期診斷和良惡性區分，且在肺癌的療效跟蹤和預後評估等方面也具有一定的應用潛力。我們期待通過發掘更優性能的甲基化標誌物或幾項基因標誌物的組合檢測，制定更早期、準確的臨床篩查及預後評估方案，從而不斷提高腫瘤患者的存活率和生活質量！

來源：王紀文. DNA甲基化與肺癌的療效評價及預後判斷[J]. 醫藥前沿, 2013(34):74-75.