美最新測序技術能用單個細胞分析基因組
[導讀]美國科學家對現代基因測序演算法進行了改良,只需從一個細菌細胞中提取的DNA就可組裝成接近完整的基因組,準確率達到90%,
美國物理學家組織網9月18日報道,最近,來自美國加利福尼亞大學聖地亞哥分校、克雷格-文特爾研究院和Illumina公司的科學家對現代基因測序演算法進行了改良,只需從一個細菌細胞中提取的DNA(脫氧核糖核酸)就可組裝成接近完整的基因組,準確率達到90%,而傳統的測序方法至少需要10億個相同的細胞才能完成。這一突破為那些無法培養的細菌提供了測序方法。研究發表在9月18日的《自然·生物技術》網路版上。
實驗室無法培養的細菌範圍極廣,約佔99.9%,從產生抗體和生物燃料的微生物,到人體內的寄生菌。它們的生存條件特殊,比如必須和其他菌種共生,或只能生存在動物皮膚上,因此很難進行人工培養。
論文合著者、文特爾研究院的羅傑·拉斯肯教授10年前曾開發出一種多重置換擴增(MDA)技術,可對實驗室無法培養的細菌測序,能恢復70%的基因。其工作原理是對一個細胞的基因片斷多次複製,直到其數量相當於10億個細胞那麼多。不過,這種技術卻給測序軟體帶來很多麻煩,它在複製DNA時會出現各種錯誤,而且並非完全統一放大,有些基因組被複制數千次,有一些卻只被複制一兩次。但測序演算法不能處理這些不一致,而是傾向於捨棄那些只複製了少數次的基因,即使它們對整個基因組來說很關鍵。
加州大學聖地亞哥分校雅各布工程學院計算機科學教授、現代基因測序技術演算法創建人帕維爾·帕夫納和同事改進了這一方法,保留了那些少量複製的基因片斷,並用新方法對一個大腸桿菌測序以檢驗其精確性,發現它能恢復91%的基因,接近傳統的培養細胞水平。這已足夠解答許多重要的生物學問題,比如該細菌能產生什麼抗體。
人體細菌占體重的約10%,它們有些會造成傳染病,但也有的能幫助消化,最近研究還發現,它們能改變人的行為方式,比如引誘人吃更多的東西。新方法也有助於科學家理解細菌行為,研究人體內細菌能產生哪種蛋白質和多肽,這些蛋白質和多肽是細菌之間、細菌和宿主之間互相溝通的工具。
研究小組還用新方法對一種以前未曾測序過的海洋細菌進行了測序,獲得了相當完整而且能解釋的基因組,掌握了它是如何生存和運動的,該基因組將被存入美國國家衛生研究院的基因銀行(GenBank)。研究人員表示還將對更多迄今未知的細菌進行測序。
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