泌尿生殖道支原體藥物敏感性試驗結果動態分析

堯榮鳳， 李 智， 沈菊英， 徐 龍

（同濟大學附屬楊浦醫院檢驗科，上海 200090）

摘要：目的分析泌尿生殖道感染患者支原體[解脲脲原體（Uu）和人型支原體（Mh）]的感染情況及其藥物敏感性情況，為臨床診療提供依據。方法將2009年1月至2014年12月1 638例門診就診的泌尿生殖道感染患者送檢的樣本進行支原體培養鑒定及藥物敏感性試驗。結果1 638例臨床樣本中，支原體陽性樣本佔45.6％（747/1 638），Uu和Mh的陽性率分別為44.4％和9.5％；單純Uu、單純Mh、Uu和Mh混合陽性率分別為36.1％、1.2％、8.4％。女性支原體陽性率（48.6％）明顯高於男性（20.9％）（P＜0.01）。2009至2013年支原體的陽性率呈現逐年上升的趨勢，分別為19.3％、29.3％、41.4％、46.9％和56.0 ％。2014年支原體陽性率為44.2 ％，明顯低於2013年（P＜0.05），減少的部分為Uu，Mh感染呈逐年上升的趨勢。Uu和Mh對喹諾酮類抗菌藥物的敏感性最差，敏感率＜20％，而對強力黴素、美滿黴素和交沙黴素的敏感性較高，敏感率＞70％；Mh對各抗菌藥物的敏感率均低於Uu；女性患者Uu、Mh對四環素類和交沙黴素的敏感率明顯高於男性患者。結論Mh的感染呈逐年上升的趨勢，且Mh多以與Uu混合感染的形式出現，Mh對各抗菌藥物的敏感率均低於Uu，這將給支原體感染的治療帶來更大的挑戰，應引起臨床的高度重視。

關鍵詞：解脲脲原體；人型支原體；藥物敏感性試驗

支原體是常見的泌尿生殖道感染的病原體，是目前性傳播疾病的主要病原體之一，其可引起男性前列腺炎、附睾炎，女性宮頸炎、尿道炎、盆腔炎、異位妊娠、輸卵管不孕症及早產等[1-2]。目前，支原體檢測及其藥物敏感性受到臨床高度關注。為了解泌尿生殖道感染患者支原體感染狀況及藥物敏感性，本研究對同濟大學附屬楊浦醫院性病皮膚科門診、泌尿外科門診及婦科門診就診的泌尿生殖道感染患者支原體檢測結果和藥物敏感性試驗結果進行了回顧性分析，以期為臨床提供最新的流行病學資料，為合理選擇抗菌藥物提供參考依據。

材料和方法

一、研究對象

選擇來自2009年1月至2014年12月因泌尿生殖道感染來同濟大學附屬楊浦醫院性病皮膚科門診、泌尿外科門診及婦科門診就診的非重複患者共1 638例，其中男211 例、女1 427例，年齡（41.7±15.2）歲。樣本採集前1周內未全身及局部使用抗菌藥物。

二、方法

1.樣本採集 男性：用無菌拭子從前尿道2～4 cm處採集尿道分泌物，根據病情需要，也可採集前列腺液或精液。女性：常規清潔外陰後，用陰道窺器暴露研究對象宮頸，取棉拭子於宮頸管內2～3 cm 處採集分泌物，取材時拭子旋轉並停留20 s 以上，以獲取宮頸上皮細胞。所有樣本採集後立即送檢。

2.檢測方法 在廣東珠海麗拓公司提供的支原體分離、鑒定和藥物敏感性試驗一體化試劑盒中，藥物敏感性試驗選用的是目前臨床常用於解脲脲原體（ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原體（mycoplasma hominis，Mh）治療的3類抗菌藥物，共12種，選用高、低2個水平，包括四環素類（4～8 mg/L的四環素、強力黴素和美滿黴素）、大環內酯類（除交沙黴素為2～8 mg/L外，羅紅霉素、克拉黴素、阿齊黴素和紅霉素均為 1～4 mg/L）、喹諾酮類（1～4 mg/L的氧氟沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和諾氟沙星）。試劑盒均在有效期內使用，設陰性、陽性對照，陰性顯示黃色，陽性顯示紅色。將無菌方法採集的分泌物拭子置液體培養管內，置37 ℃恆溫箱中培養24～48 h，觀察培養液的顏色變化。所有操作嚴格按照產品說明書進行。

4.結果觀察 在37 ℃恆溫箱中培養24 h～48 h，通過觀察藥物敏感性孔中培養液的顏色變化得出培養結果：微孔培養基清亮，顏色由黃色變紅色，104孔和陽性對照孔變紅色，陰性對照孔不變色，表明有支原體屬生長（ 其中Uu於24 h 觀察，Mh於48 h 觀察）；培養孔變渾濁，表明有細菌或酵母生長，不記錄結果。藥物敏感性判斷標準：敏感，藥物低濃度孔和高濃度孔均不變色；中度敏感，藥物低濃度孔變紅色，高濃度孔不變色；耐葯，低濃度和高濃度孔均變紅色。

三、統計學方法

採用SPSS 11.5軟體進行統計分析，組間率的比較用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

一、支原體培養

1 638例樣本中，培養出支原體陽性樣本747例（45.6％），Uu和Mh的陽性率分別為44.4％（728/1 638）和9.5％（156/1 638），Uu為主要病原體。其中單獨感染Uu者佔36.1％（591/ 1 638），單獨感染Mh者佔1.2％（19/1 638），同時感染Uu和Mh者佔8.4％（137/1 638），Uu和Mh均未感染者佔54.4％（891/1 638）。在747例支原體陽性樣本中，以Uu感染為最多，佔97.5％（728/747），明顯高於Mh（20.9％，156/747）（P＜0.05）。

二、支原體感染的性別差異

女性支原體陽性率為48.6％（693/1 427），明顯高於男性[25.6％（54/211）]（P＜0.01）。見表1。

三、不同年份泌尿生殖道支原體感染情況

2009至2013年支原體的陽性率呈現上升趨勢，分別為19.3％（17/88）、29.3％（41/140）、41.4％（67/162）、46.9％（76/162）、56.0 ％（313/559），但2014年的陽性率為44.2 ％（233/527），出現了明顯下降，其中Uu的陽性率下降，但Mh的陽性率卻出現增加，Mh感染呈逐年上升的趨勢。見表2。

表1 男、女性患者泌尿生殖道支原體感染情況 [例（％）]

組別例數Uu陽性Mh陽性Uu+Mh陽性合計男性組 211 37（17.5） 6（2.8） 11（5.2 ） 54（25.6 ）女性組1 427554（38.8） 13（0.9） 126（8.8 ）693（48.6 ）合計1 638591（36.1） 19（1.2） 137（8.4 ）747（45.6 ）

表2 不同年份支原體感染情況 [例 （％）]

時間（年）例數Uu陽性Mh陽性Uu+Mh陽性合計2009 88 15（17.0） 1（1.1） 1（1.1） 17（19.3）2010 140 34（24.3） 0（0.0） 7（5.0） 41（29.3）2011 162 57（35.2） 2（1.2） 8（4.9） 67（41.4）2012 162 62（38.3） 6（3.7） 8（4.9） 76（46.9）2013 559262（46.9） 4（0.7） 47（8.4） 313（56.0）2014 527161（30.6） 6（1.1） 66（12.5） 233（44.2）合計1 638591（36.1） 19（1.2） 137（8.4） 747（45.6）

四、抗菌藥物的敏感性

Uu和Mh對喹諾酮類抗菌藥物的敏感性最差，敏感率＜20％，而對強力黴素、美滿黴素和交沙黴素的敏感性較高，敏感率＞70％。另外，Mh對各抗菌藥物的敏感率均低於Uu，且對大部分抗菌藥物的敏感率都＜40.00％（除外強力黴素、交沙黴素和美滿黴素）。女性患者Uu、Mh對四環素類和交沙黴素的敏感性明顯高於男性患者，而對於大環內酯類（除交沙黴素外）和喹諾酮類抗菌藥物的敏感性卻明顯低於男性患者。Uu對四環素的敏感率從2011年開始逐漸增高，而2014年Uu對大環內酯類藥物（除交沙黴素外）及司帕沙星、左氧氟沙星的敏感率出現了明顯下降。見表3、表4。

表3 2009至2014年支原體對抗菌藥物的敏感率和耐葯率 （％）

抗菌藥物UuMhUu Mh男性女性男性女性敏感率耐葯率敏感率耐葯率敏感率耐葯率敏感率耐葯率敏感率耐葯率敏感率耐葯率強力黴素93.384.6571.5523.2886.3611.3693.804.0746.1546.1574.7620.39美滿黴素93.564.2970.9422.2286.369.0993.993.8853.8546.1573.0819.23四環素75.0016.6150.4339.3250.0031.8276.7915.4723.0876.9253.8534.62交沙黴素94.823.2171.7922.2286.369.0995.362.7146.1546.1575.0019.23克拉黴素73.5716.9615.3879.4984.096.8272.9217.6038.4653.8512.5082.69羅紅霉素41.9625.008.5582.0570.4513.6439.6525.7330.7753.855.7785.58紅霉素10.7166.795.9889.7420.4536.3610.0669.8330.7769.232.8892.31阿齊黴素9.4662.145.1388.8922.7334.098.3264.0223.0869.232.8891.35司帕沙星18.2554.038.5580.3420.4543.1817.8354.6523.0876.926.7380.77左氧氟沙星16.8244.1910.2677.789.0945.4517.4443.6015.3876.929.6277.88氧氟沙星6.2665.653.4288.899.0968.186.0165.127.6984.622.8889.42諾氟沙星1.2694.220.0097.392.3383.721.1794.920.0091.670.0098.06

表4 不同年份檢測的Uu對抗菌藥物的敏感率和耐葯率 （％）

抗菌藥物2009年2010年2011年2012年2013年2014年敏感率耐葯率敏感率耐葯率敏感率耐葯率敏感率耐葯率敏感率耐葯率敏感率耐葯率強力黴素92.860.0094.292.8691.535.0891.943.2395.654.9891.016.74美滿黴素92.860.0088.570.0091.535.0890.326.4596.524.1593.265.62四環素50.0042.8625.0047.2240.6837.2972.5812.9080.8710.3783.710.11交沙黴素92.860.0088.892.7889.835.0895.161.6198.262.9092.704.49克拉黴素92.860.0080.568.3381.366.7883.8711.2984.3516.6056.1824.72羅紅霉素71.430.0066.6711.1149.1522.0340.3224.1947.8325.7326.9731.46紅霉素50.000.0016.6727.7816.9552.549.6841.9417.3968.465.0691.01阿齊黴素50.007.1433.3319.4416.9537.293.2364.526.9676.764.4960.67左氧氟沙星28.5742.8617.1457.148.4762.7114.5254.8421.7438.1712.9237.08司帕沙星28.5735.7122.8671.4310.1761.0222.5850.0022.6148.5511.8057.30諾氟沙星14.2978.570.0090.320.0088.140.0095.160.8795.421.6993.26氧氟沙星7.1471.438.5774.295.0877.973.2377.425.2261.415.6260.67

支原體的陽性率各地報道不同，本研究結果顯示，同濟大學附屬楊浦醫院2009至2014年泌尿生殖道感染患者支原體陽性率為19.3％～56.0％，與李進等[3]的報道一致，但低於徐傳和等[4]的報道；其中單純Uu的陽性率為36.1％，單純Mh的陽性率為1.2％，Uu和Mh混合的陽性率為8.4％，以Uu感染為最多，明顯高於Mh感染，和國內文獻報道[5]基本一致，但比孟曙芳等[6]報道的陽性率高，這與檢測方法、地區差異、樣本構成不同有關。造成Uu陽性率高的主要原因可能與Uu菌體頂部的一些特殊結構可使菌體和宿主靶細胞間的黏附力較強有關，故而，支原體特別是Uu被認為是非淋菌性生殖泌尿系統感染最常見的病因之一。本研究顯示，2009至2013年支原體的陽性率呈現逐年上升的趨勢，雖然2014年陽性率出現明顯下降，但Mh陽性率卻明顯增高，Mh多以與Uu混合感染的形式出現，這將給臨床治療帶來更大的挑戰。另外，女性患者陽性率高於男性，這可能與男女泌尿生殖道的結構差異使得女性感染支原體的概率更高，且癥狀輕微而易被忽視有關[7]。

支原體是能自行複製的最小、最簡單和無細胞壁的原核生物，通過免疫刺激作用損傷器官或組織，通過有毒代謝產物破壞機體微生態，甚至損傷宿主組織器官。由於支原體無細胞壁結構，β-內醯胺類藥物治療無效，只對干擾蛋白質的某些抗菌藥物敏感[8]，因此四環素類、大環內酯類和喹諾酮類抗菌藥物為治療支原體感染的常用藥物，但抗菌藥物的濫用易誘導生成支原體耐葯株[9-12]。由表3可見，Uu和Mh對喹諾酮類抗菌藥物的敏感性最差，但Uu和Mh感染對強力黴素、美滿黴素、交沙黴素的敏感性較好且穩定，因此這3種藥物可作為治療支原體感染的首選藥物。Uu與Mh的耐葯譜及耐葯率存在一定差異，Mh對藥物的敏感率低於Uu，且對大部分抗菌藥物的敏感率都＜40.00％（除外強力黴素、交沙黴素和美滿黴素）。本研究顯示，2014年Mh陽性率出現增加。國內曾有報道Uu與Mh混合感染易出現交叉耐葯[13-15]，這表明Uu合併Mh感染增強了對藥物的耐受性，擴大了耐葯的範圍，應引起臨床的高度重視。Mh對各抗菌藥物的耐葯率更高的原因可能是Mh本身耐葯，也可能是Uu先出現了陽性，而影響到Mh藥物敏感性試驗結果的判讀。Mh多與Uu混合感染，因此希望今後能有更好的實驗方法用於泌尿生殖道患者支原體的藥物敏感性檢測。

綜上所述，本研究泌尿生殖道患者支原體陽性率較高，且呈逐年上升的趨勢，耐葯株的增加，給臨床治療帶來很大困難。因此，疑似泌尿生殖道感染患者應作支原體培養和藥物敏感性試驗，確定其病因以及是否為混合感染，以檢驗結果指導臨床治療，選擇合適的藥物或聯合用藥，提高療效，從而有效防治支原體的感染。參考文獻

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Dynamic analysis on the drug susceptibility of mycoplasma from urogenital tract

YAO Rongfeng，LI Zhi，SHEN Juying，XU Long. （Department of Clinical Laboratory，Yangpu Hospital of Tongji University，Shanghai 200090，China）

Abstract：ObjectiveTo analyze the infection status and drug susceptibility of ureaplasma urealyticum（Uu） and mycoplasma hominis（Mh） among patients with urogenital tract infection，and to provide a reference for diagnosis and treatment.MethodsUu and Mh were cultured and identified from 1 638 outpatients with urogenital tract infection from January 2009 to December 2014，and drug susceptibility test was performed simultaneously.ResultsThe positive rate of mycoplasma infection was 45.6％（747/1 638）. The positive rates of Uu and Mh infections were 44.4％ and 9.5％，respectively. There were 36.1％ patients infected only with Uu，1.2％ patients infected only with Mh and 8.4％ patients infected with Uu and Mh. The positive rate of mycoplasma infection was higher in females（48.6％） than that in males（20.9％）（P＜0.01）. From 2009 to 2013，the positive rate of mycoplasma infection increased in turn from 19.3％，29.3％，41.4％，46.9％ to 56.0％. The positive rate of mycoplasma infection in 2014 was 44.2％，which was lower than that in 2013（P＜0.05），which the positive rate of Uu infection decreased，while that of Mh infection increased year by year. The drug susceptibility rates of Uu and Mh to quinolones were the lowest（＜20％），but those to doxycycline，minocycline and josamycine were higher（＞70％）.The drug susceptibility rates of Mh to antibiotics were lower than those of Uu. The drug susceptibility rates of Uu and Mh to tetracycline and josamycine in females were higher than those in males.ConclusionsThe positive rate of Mh infection increases year by year，and patients with Mh infection are often infected with Uu simultaneously. The drug susceptibility of Mh to antibiotics is lower than that of Uu，which would bring challenges to treatment. Therefore，clinicians should pay more attention to it.

Key words：Ureaplasma urealyticum；Mycoplasma hominis；Drug susceptibility test

文章編號：1673-8640（2016）12-1050-05

中圖分類號：R378.2

文獻標誌碼：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2016.12.09

（收稿日期：2016-01-23）

（本文編輯：姜 敏）

作者簡介：堯榮鳳，女，1976年生，碩士，主管技師， 主要從事中藥活性成分抗感染免疫研究。

通訊作者：李 智，聯繫電話： 021-65690520-333。