續集
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來自專欄 愛上微生物![]()
1.4 cwp2（阻止囊泡的形成，發現在ERES區有cwp2)在ted1敲除菌株會滯留在內質網區，但是敲除gip7可以回補這種缺陷。
白色箭頭代表滯留，這種滯留在gpi7敲除菌株及雙敲除菌株中都沒有發現，C是內質網特徵的核環染色。泡是ERES區，敲除ted1發現cwp2滯留在內質網，沒有進入ERES區。C圖是定性，D圖是定量
1.5在酵母中表達人的PGAP5的cDNA可以消除由於敲除Ted1所造成的Gas1p在內質網中的積累。
Western blot實驗。
ted1p作用的示意圖
2.ted1p對的活性對於GPI-AP在ERES區的聚集是不需要的。
但這裡我們已經知道ted1p參與了GPI-AP的糖重構的過程，且對於GPI-APs的高效運輸所必需的。前人的研究發現GPI-APs的脂重構參與了GPI-AP集中到ERES區，所以作者想是不是糖重構也是這個作用。
2.1 敲除ted1後並不影響cwp2在ERES區的聚集。
cwp2的熒光顯微鏡圖片，sec31-1是溫敏，在37度後活性突變，因此抑制囊泡的形成，點狀染色代表的是cwp2在ERES區的積累（補充材料證明了其可以與sec13共定位），bst1是脂重構相關基因，敲除其影響聚集，敲除ted1不影響。
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此圖為上面的熒光圖的定量實驗
2.2 敲除ted1p並不影響脂重構
WT（野生型的脂質的提取作為標準），其餘泳道的脂來自於GPI-AP，完整的脂重構的最終產物應該是IPC-B，圖中可得出敲除ted1沒有影響脂重構，敲除bst1影響脂重構，且是影響其脫脂醯化作用，cwh43是將神將醯胺錨定。
3.貨物受體P24複合體作為GPI-聚糖重構的凝集素。
既然已經證明GPI-聚糖的重構對於GPI-AP在ERES區的聚集沒有作用，那麼是不是它在於P24複合體的識別中發揮作用呢？
3.1cwp2可以特異的集合p24複合體，不結合無關的貨物受體Erv29p（可溶分泌蛋白的貨物受體）
CO-IP實驗。利用綠色熒光蛋白抗體與cwp2特異的結合，可以將與cwp2相互作用的蛋白質共同沉澱下來。IP證明了抗體的特異性，T是對照組，表明體系中的抗原的含量。結果證明了cwp2與Emp24p的特異性的相互作用。
3.2 ted1p的磷脂酶活性的失活會影響p24與cwp2的特異性識別。
CO-IP實驗。T為對照組，IP證明抗體的特異性。
3.3 ted1p的磷脂酶活性丟失造成EtNP的滯留，阻礙了P24與cwp2的識別。
CO-IP實驗。敲除gpi7後發現對識別無較大影響，且它可以彌補敲除ted1造成的無法識別的錯誤。
3.4 p24複合物與移除EtNP的GPI-聚糖部分相結合。
SDS-PAGE+Western blot T作為對照，GPI-glycan是體外合成的成熟的聚糖，用三種不同的抗體將三種不同的抗原沉澱下來。這裡的GPI-glycan結合在瓊脂糖珠上，通過離心可將相互作用的複合物分離。
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