實驗室?●基礎篇:實驗室毒物大清點
科研是世界的,身體是自己的。進入實驗室只是一個起點,而不是終結。希望大家進入實驗室之前都學會如何保護自己!
最近武漢某大學的事情鬧得沸沸揚揚,不少同學在肩負繁重實驗任務的同時面對來自導師、同僚和畢業的壓力,實屬不易。但是,科研是世界的,身體是自己的。進入實驗室只是一個起點,而不是終結。今天,小編就為大家介紹一下分子生物實驗室中幾種常見的有毒物質以及防護措施,希望能夠幫助生物學子在實驗室更好的保護自己。
1 溴化乙淀(EB)
溴化乙錠(EB)是一種高度靈敏的熒光染色劑,其含有一個可以嵌入DNA堆積鹼基之間的一個三環平面基團,用標準302 nm紫外光透射儀激發能放射出橙紅色信號,一般在生化實驗室用於觀察瓊脂糖和聚丙烯醯胺凝膠中的DNA。它與DNA的結合幾乎沒有鹼基序列特異性。在高離子強度的飽和溶液中,大約每2.5個鹼基插入一個溴化乙錠分子。當染料分子插入後,其平面基團與螺旋的軸線垂直並通過范德華力與上下鹼基相互作用。這個基團的固定位置及其與鹼基的密切接近,使得與DNA結合的染料熒光增強數倍。
由於溴化乙錠可插入DNA的特性,它具有一定的毒性,刺激眼睛、皮膚、黏膜和上呼吸道,嚴重的可誘導突變並可能致癌。戴好手套和護目鏡,穿好實驗防護服,在通風櫥內小心操作。現在實驗室中還有許多溴化乙錠的替代品,比如說GelRed、GoldenView等,相對來說比EtBr更安全。還有一些實驗室採用先跑膠,然後在小型染色缸內進行染色,也可以減小EB帶來的污染。
2 丙烯醯胺(Acrylamide)
聚丙烯醯胺是SDS-PAGE凝膠中的主要成分。雖然現在已經有按比例配置好的丙烯醯胺/甲叉雙丙烯醯胺溶液賣,但還有很多實驗室是買試劑自己配置。不管是溶液還是乾粉,我們都得認識到,未聚合的丙烯醯胺是一種潛在的神經毒素,可通過皮膚吸收。丙烯醯胺的危害主要是引起神經毒性,同時還有生殖、發育毒性。有試驗顯示丙烯醯胺是一種可能致癌物,職業接觸人群的流行病學觀察表明,長期低劑量接觸丙烯醯胺會出現嗜睡、情緒和記憶改變、幻覺和震顫等癥狀,伴隨末梢神經病如手套樣感覺、出汗和肌肉無力。具有累積毒性,不容易排毒。因此在稱量丙烯醯胺和甲叉雙丙烯醯胺粉末時,戴好手套和面罩,在化學通風櫥內操作,在倒制SDS-PAGE凝膠時也要注意做好防護。聚合的丙烯醯胺是無毒的,使用時也應小心,因為其中可能含有少量未聚合的丙烯醯胺,雖然說是少量,但是相比薯片和咖啡之類的,還是很大量的哦。
二硫蘇糖醇(DTT)
二硫蘇糖醇(DTT),同三(2-羧乙基)膦(TCEP)一樣是很強的還原劑,散發難聞的氣味。結構如下圖示:
可用作蛋白質的保護劑,用於防止蛋白質內的半胱氨酸被氧化。也可用於SDS-PAGE電泳時樣品的添加劑,用於徹底打破蛋白質中的二硫鍵。可因吸入、咽下或皮膚吸收而危害健康。當使用固體或高濃度儲存液時,戴手套和護目鏡,在通風櫥中操作。另外常用的還原劑還有β-巰基乙醇,是一種具有特殊臭味的無色透明液體,在使用中也要注意防護。
4 苯甲基磺醯氟(PMSF)
苯甲基磺醯氟(PMSF),常用於蛋白質的提取過程中,是胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶的抑製劑,可抑制絲氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶(trypsin)和胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin),也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙醯膽鹼酯酶,是一種高強度毒性的膽鹼酯酶抑製劑。它對呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性。可因吸入、咽下或皮膚吸收而致命。戴合適的手套和安全眼鏡,始終在化學通風櫥里使用。在接觸到的情況下,要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚,已污染的工作服丟棄掉。
5 二乙基焦碳酸脂(DEPC)
DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylpryrocarbonate),可滅活各種蛋白質,是RNA酶的強抑製劑。DEPC是一種潛在的致癌物質,在操作中應盡量在通風的條件下進行,並避免接觸皮膚。DEPC毒性並不是很強,但吸入的毒性是最強的,使用時戴口罩,穿戴適當的防護服,最好在通風櫥中操作。不小心沾到手上注意立即沖洗。
6 甲醇(Methanol)
甲醇也是生化實驗室用的比較多的有機溶劑,具有很大的毒性並易揮發。甲醇的毒性對人體的神經系統和血液系統影響最大,它經消化道、呼吸道或皮膚攝入都會產生毒性反應,甲醇蒸氣能損害人的呼吸道粘膜和視力。急性中毒癥狀有:頭疼、噁心、胃痛、疲倦、視力模糊以至失明,繼而呼吸困難,最終導致呼吸中樞麻痹而死亡。慢性中毒反應為:眩暈、昏睡、頭痛、耳鳴、視力減退、消化障礙。使用時要避免吸入其揮發的汽霧,戴合適的手套和安全眼鏡。
部分實驗室在配置蛋白膠染色液和脫色液的時候也會用到,可以將甲醇換成乙醇使用。Western包「三明治」的時候也盡量在通風櫥中進行,不能仗著自己年輕,以身試毒。
7酚/氯仿
剛進入生化實驗室的小白,應該大部分都經歷過用酚/氯仿抽提DNA的歷史。之所以把酚/氯仿放在一起,也是考慮到其在生化實驗室的廣泛使用。
低濃度酚能使蛋白變性,高濃度能使蛋白沉澱。對皮膚、粘膜有強烈的腐蝕作用,也可抑制中樞神經系統或損害肝、腎功。水溶液比純酚易經皮膚吸收,而乳劑更易吸收。氯仿主要作用於中樞神經系統,具有麻醉作用,對心、肝、腎有損害。如果不小心接觸,立即脫去污染的衣著,用大量流動清水沖洗至少20分鐘,就醫。
仔細通讀下來,正在做實驗的你是不是覺得自己被這些毒物包圍了呢?其實,只要在進入實驗室之前對這些毒物有個基本的認識,做實驗時仔細認真,做好適當的防護,生物實驗室還是相當安全的。當然,這只是小編個人的總結,有遺漏的也歡迎各位小夥伴在下面留言討論!
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