生物信息學100個基礎問題 —— 第3題 Illumina測序技術細節探究

目前我們最常使用的就是Illumina公司的測序技術,Illumina公司的測序技術最明顯的幾個特點是:價格低,通量高,測序讀長短。那麼我們今天的問題,就是圍繞Illumina測序技術的細節來提問的。

1. 什麼是Illumina測序adapter?同一批上機的adapter序列一樣嗎?它的作用是什麼?

2. 一個完整的Illumina測序過程是那幾步?

3. 什麼是橋式PCR技術?為什麼要進行橋式PCR?

4. 我們都說,測序結果會包含index,那麼index是什麼?有什麼作用?

5. 我們所說的flowcell,lane,tile都是什麼意思?

6. Illumina測序結果質量表示方法採用的是Phred33還是Phred64?

參考資料1:

孟浩巍:20160405 illumina 測序原理介紹?

zhuanlan.zhihu.com圖標

參考資料2(Illumina官方測序宣傳視頻):

https://www.zhihu.com/video/957543741846798336

最後,說一個事情。很多朋友都私信我說,我們在挖這個100個問題的大坑的時候,能不能逐漸開放一部分答案,我想了想,確實可以。不過答案不是每天更新,而是大約至少半個月更新1次。我們的提問頻率也要盡量保證1天1問,把我們的周期縮短。謝謝大家的支持!


硬廣時間:

3D基因組分析從入門到進階?

www.zhihu.com圖標

這個是我本月的知乎Live,重點講述3D基因組相關的背景介紹與數據分析。3D基因組是目前非常火熱的1個方向。請大家不要錯過呀!

長久以來,我們都知道DNA在真核生物中並不是裸露存在的,而是會形成複雜的高級結構,但是結構與序列的相關關係一直沒有很好的技術去探索。

直到2009年,Job Dekker教授提出了Hi-C技術,從此開啟了3D基因組領域的大門。

Hi-C技術是3D基因組領域的一項基本技術,在Hi-C技術的基礎上又衍生出了很多新的技術比如ChIA-PET,Capture Hi-C等等。

目前3D基因組領域非常火,幾乎各行各業都開始嘗試用3D基因組的方法去解釋一些科學問題。與3D基因組相關的文章也基本保持在SCI 10分以上,非常適合大家結合自身課題方向衝擊高分文章。

本次 Live 主要包括以下內容

? 課程內容及形式說明

? 為什麼要進行三維基因組的研究

? 3C, 4C, 5C技術

? 從3C, 4C, 5C到Hi-C技術

? Hi-C測序數據的回貼(mapping)策略

? Hi-C測序數據的reads 水平過濾

? Hi-C測序數據的fragments 水平過濾

? Hi-C測序數據的raw matrix

? Hi-C測序數據的矯正方法(廣義線性回歸與迭代矯正法)

? 如何尋找3D拓撲結構(TAD)

? 如何尋找染色體結構區域(compartment)

? 總結與提問環節

? 代碼分享


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