大腸桿菌微生物檢測培養基的配方及原理

本文主要針對大腸桿菌微生物檢測培養基的配方及原理進行介紹，為檢驗人員提供相應的參考。

1. 月桂基硫酸鹽胰蛋白腖肉湯(LST)

原 理：

月桂基硫酸鈉，別名月桂醇硫酸鈉，表面活性作用強，具有乳化作用。

一種優質蛋白腖，是以新鮮牛肉和牛骨經胰酶消化，濃縮乾燥而成的淺黃色粉末。具有色淺、易溶、透明、無沉澱等良好的物理性狀。含有豐富的氮源、氨基酸等胰蛋白腖或胰酪腖 20g 提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求 。

配方：（g/L）

2. 煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯

原理：

膽鹽（Bile Salt）：是一種膽酸的鈉鹽，是膽酸的羧基和甘氨酸或牛磺酸(C2H7NO3S)的氨基(C2H5NO2)，通過醯胺鍵結合而成。

① 可降低培養基與細菌細胞膜界面上的表面張力，使細胞膜紊亂，導致細菌自溶。

②腸桿菌科細菌在腸道內長期與膽汁接觸。對膽鹽有一定的抵抗力。合適的膽鹽量能促進該科細菌的生長。

③膽鹽遇酸生成沉澱，使菌落色素不致擴散從而有利於鑒別。

④ 膽鹽中含有一定量的膽紅素、粘蛋白、色氨酸，對不受膽鹽抑制的細菌生長有營養作用。

煌綠（亮綠）：抑製革蘭氏陽性菌和大多數非沙門氏菌的革蘭氏陰性桿菌，通常抑制發酵乳糖、蔗糖的細菌。煌綠和枸櫞酸鈉對大腸菌的生長、菌體蛋白質的合成和糖的利用都有顯著的抑制作用,以煌綠的作用為較強。枸酸鈉能抑制大腸菌的呼吸,而煌綠的抑制作用則較弱。混合膽鹽及硫代硫酸鈉對大腸菌的上述代謝活動都沒有抑制作用。

配方：（g/L）

用法：

將蛋白腖、乳糖溶於約500 ml蒸餾水中，加入牛膽粉溶液200 ml（將20.0 g 脫水牛膽粉溶於200 ml 蒸餾水中，調節pH至7.0～7.5），用蒸餾水稀釋到975 ml，調節pH，再加入0.1%煌綠水溶液13.3 ml， 用蒸餾水補足到1000 ml，用棉花過濾後，分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管10ml 。121 ℃高壓滅 15 min 。

3 伊紅美藍瓊脂(EMB)

原理：

伊紅美藍瓊脂含有伊紅和美藍兩種苯胺類染料，它們可以抑製革蘭氏陽性菌的生長。伊紅為酸性染料，美藍為鹼性染料。當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍結合形成紫黑色菌落，並帶有綠色金屬光澤。而產氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。

在鹼性環境中不分解乳糖產酸的細菌不著色，伊紅和美藍不能結合，故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養基上不生長。

常用的伊紅美藍乳糖培養基，可用來鑒別飲用水和乳製品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌，因其強烈分解乳糖而產生大量的混合酸，菌體帶H+，故菌落被染成深紫色，從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。

配方：（g/L）

用法：

稱取本品 37.4g,加熱攪拌溶解於 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌 15分鐘, 備用。

4 EC肉湯

用途：

用於糞大腸菌群、大腸桿菌的測定(GB2008、SN標準)

配方：（g/L）

5 營養瓊脂斜面 營養瓊脂（NA）

用途：

細菌計數、不含糖，可作血瓊脂基礎和傳代用(GB標準)。

配方：（g/L）