中國克隆猴研究極具價值，走出實驗室須過四道坎

? 神經所研究人員克隆猴工作，引起國際關注

撰文 | 韓毅冰（澳門鏡湖醫院）

責編 | 葉水送

知識分子為更好的智趣生活 ID：The-Intellectual

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2018年1月25日，《細胞》雜誌以封面文章的形式，發表了中國科研人員體細胞克隆猴的研究結果。這是人類第一次使用體細胞（分化細胞）的核作為供體而獲得克隆猴（1997年和1999年，在美國分別誕生了使用胚胎分裂和胚胎細胞核做為供體的克隆猴），所以這次是「里程碑式」的研究結果。

在克隆過程中，由於研究人員使用了控制基因表達的藥物，「中中」、「華華」才能夠順利誕生。所以我覺得稱「中中」、「華華」為「治療性體細胞克隆猴」最為合適。

體細胞克隆不是一般人能夠操作的，因為每種動物的卵子生長與受精時機等等都有所不同，會克隆猴，可能不會克隆狗，會克隆狗也不一定會克隆猴。

克隆可理解為在最早生命體—胚胎上做手術，而且是很大的手術。體細胞克隆就等於在肉眼幾乎看不到的胚胎上，在高倍顯微鏡下，利用比頭髮絲還細的手術刀，把細胞最主要的「器官」換一遍的微置換手術。

還有很多人認為，克隆動物已經做得很多了。有了克隆羊「多莉」的技術，克隆中國黑山羊、白綿羊有意義嘛？克隆非人靈長類有哪些更深刻的意義？

體細胞克隆猴的價值

很多人類的疾病治療方法，都是在動物上進行早期的實驗，獲得肯定的結果後，才能開展臨床研究。尤其是神經系統疾病，更是依靠與人比較相近的靈長類進行研究。譬如說，試管嬰兒技術，就是在小鼠和兔子成功後，沒有經過靈長類的實驗動物研究，而直接應用到人身上的。這是因為生殖系統的調控和早期胚胎髮育，人類與這些實驗動物有著很大的相似性。但是其他疾病的研究，例如阿茲海默症等神經系統疾病，低等動物都不會得，就必須使用非人靈長類動物進行前期研究。

科學研究的基本方法就是「循證醫學實驗」，其中常用的方法之一就是「對照實驗」，就是把給葯的一組動物（處理組）與沒有給葯的、但具有相似背景的動物（對照組）進行比較，最後得出處理方法是否有效的結論。「對照實驗」方法的前提是，處理組與對照組的動物，都具有相似，最好是相同的遺傳背景。

做對照試驗需要的處理組與對照組動物的數量，與預期研究結果的允許誤差、樣本測量時的錯誤概率、預期標準偏差、預期失訪的數量（實驗動物死亡等）和統計方法都有關係。一般通過下面的公式來計算一個實驗的最小樣本量n。

現代醫學已經發展到單基因研究水平，對於實驗動物的要求也逐漸提高，希望減少由於遺傳背景不同帶來的不同基因敏感性。如果實驗動物的遺傳背景相同或者相似，那麼，一類概率錯誤的U值大大減少，從而降低實驗所需的最小樣本量。本文最後會提供一個例子，說明最小樣本量是如何計算的。

此次成功克隆的是獼猴。獼猴屬於靈長目，類人猿亞目，猴科，獼猴屬。獼猴主要生長於亞洲，以中國最多，體型比較小。獼猴一般每胎產一仔，妊娠期平均為5個月左右，哺乳期約4個月。雌猴2.5-3歲性成熟，雄猴4-5歲性成熟，但最早於6-7歲參與交配。在飼養條件下壽命長達25-30年。獼猴的飼養方式也是放養式的，它們的婚姻是暫時的一一對應的關係，猴王享有最多的交配權，其次是二猴王。猴王的爭奪戰每四年進行一次（類似美國大選）。猴子的性交頻繁，而且過程非常短暫，懷孕後的父親比較難以確認。獼猴存在同性戀現象，在一個繁殖期里，一隻雌獼猴可以先後與數只雌獼猴搭上關係。即使是通過人工受精獲得的IVF猴子，也做不到完全相同的遺傳背景。

根據不同的前瞻性對照研究要求，最小樣本量從幾十個到上萬個都有可能。目前，一隻獼猴的網上價格是4500元人民幣到幾千歐元不等，每天的飲食標準大約50-200美元，昂貴的價格使很多研究由於經費的不足而不能進行。如果能夠提供遺傳背景相同的獼猴作為研究，降低一類和二類錯誤的U值，就能夠降低所需實驗動物的數量。所以克隆猴研究具有極大的經濟價值。

克隆猴為疾病提供治療思路

如果說黑猩猩是人類的近親（基因組相似度98%），那麼獼猴則是人類的遠親（基因組相似度93%）。雖然在進化上離人類比較遠，但是，人類的一些易患疾病卻更容易發生在獼猴身上，而不是黑猩猩身上（見2007年《科學》的一項研究）。所以選擇獼猴作為研究對象，對於人類疾病的研究，意義更加重大。

前面已經說明因為體細胞的細胞核，已經不是胚胎狀態的細胞核了。這次成功的克隆，使用了控制表觀遺傳基因的藥物。孫強博士使用的是胎猴成纖維細胞作為核供體，這些皮膚下的成纖維細胞的活躍基因只是胚胎細胞基因的一部分，其他大部分基因都沉默了。因此，不使用藥物改變成纖維細胞的基因表達狀態，是不會生出克隆猴。這些藥物究竟打開了哪幾個基因，是全世界專家學者最想知道的，因為知道了哪些基因能夠使成纖維細胞變為全能型的胚胎細胞，就等於知道了怎樣把成纖維細胞通過全能型胚胎幹細胞，進一步變為各種醫學上緊缺的細胞，如肝細胞、角膜細胞等，對克隆器官的研究具有指導意義。

更重要的是，如果將魔法反過來應用，就有可能知道怎樣把癌細胞（類似於胚胎幹細胞的基因表達）的控制開關關閉，從而使癌細胞失去致癌性，或者變為正常專職的分化細胞，從而用來治療癌症。所以孫強博士的克隆猴實驗等於將幹細胞分化、逆分化的機制掀開了一角，有著重要的基礎研究意義。

克隆猴如何實現自身價值

體細胞克隆猴文章的發表，只是漫漫科研長路的開始。為了實現其潛在的價值，筆者認為，它必須經過以下幾個考驗：

• 技術方法能被驗證，並且成本不能過高

通過媒體報導來看，克隆猴的關鍵技術是操作的熟練程度，克隆需要的設備也沒有超過一般克隆動物的需求，特殊的設備可能就是偏振光顯微鏡，以期看到猴細胞的細胞核。獲得猴子的成熟卵母細胞也很重要，但在試管嬰兒技術的帶動下，越來越多的藥物可以控制猴子的卵泡發育，可實現猴子的超數排卵，降低實驗成本。

• 產生克隆猴的健康沒有問題

目前來看，兩個體細胞克隆猴是健康的。但不代表這兩隻猴子的一生都是健康的。人類還有「胎兒起源成年疾病」的概念。要證明克隆猴子長期的健康狀態，有待於大規模生產出克隆猴，產生大數據，才能準確回答。

證明使用了「基因表達控制藥物」後的克隆猴基因表達與正常猴子沒有差別。

在胚胎髮育早期，接觸到生命中本來不會出現的這種藥物，是否影響猴子成年後的基因表達？如果說沒有，那麼藥物的作用是如何消失的。如果說有，那麼這種影響，是否會影響克隆猴作為神經科學研究實驗動物的候選資格？

• 克隆猴之間的基因表達沒有差別

每個克隆動物都來自與同一品系、同一個體的體細胞，但不是同一個體細胞。所以，嚴格地講，克隆猴的基因表達也不是100%的相同，更何況操作過程中使用的藥物處理，是不是均衡地影響每個原則上遺傳基因相同的供體細胞DNA，也有待進一步考證。

• 克隆技術的發展需社會大眾認可

科學技術不僅是知識和技能的體系，它同時還是一個社會事業、社會活動，科學家也有社會責任，不研究和處理這些倫理問題，顯然不利於社會的穩定和健康發展。

克隆猴價值主要體現於科學上，已在主流科學界獲得了認可。但處在非科學界的社會大眾的觀點也要傾聽。大多數老百姓害怕克隆技術。且不論造福社會的植物轉基因技術，還被偽科學的「著名人士」之流搞得灰頭土臉，單單是將克隆猴技術簡單地理解為克隆人的「預實驗」，就讓人中國克隆猴團隊捏把汗。克隆猴就像發明了一把菜刀，有人會說，這把菜刀會被壞人拿去殺人，那麼科學家就是助紂為虐了。為了真理，500年前布魯諾被活活燒死。倫理的發展，一定要跟上科學的進步，否則真理的火種分分鐘會被社會的壓力撲滅。所以，科學家一定不能在實驗室裡面關起門來做實驗，有義務宣揚科學，宣揚真理。

韓毅冰回應公眾關注克隆猴的倫理問題

問題一：克隆以「科研的名義挑戰人類的底線」。國外做不出克隆猴子，是因為政策不允許。所以，中國在性細胞克隆猴成功二十年之後，做出克隆猴沒什麼了不起。

對這個問題的回答是，每個國家對克隆動物的使用有不同的倫理學規定，但西方從來沒有限制克隆猴研究的規定。實際上，使用胚胎分割和胚胎細胞做供體的克隆猴都是出生於美國（操作者是中國人）。這裡所說人類的底線就是指拒絕克隆人。

實際上，人類的底線也是隨著科學的進步而改變，40年前還拒絕試管嬰兒。更何況克隆猴子與克隆人是完全不同的概念。會克隆猴子也不一定會克隆人。從邏輯上講，克隆人永遠不會實現，至少不會在遵守法律、嚴謹的科學家手中實現。

問題二：「克隆動物97%殘疾和早亡，生存痛苦，極不人道」。

早期的克隆動物可能會由於摸索實驗方法，成功率比較低。著名的克隆羊「多莉」是在六歲半時安樂死的，由於患有羊普遍都有的關節炎。有人比較了與「多莉」同時期出生的非克隆羊，它的關節炎比「多莉」還嚴重呢。

2016年,《自然-通訊》雜誌發表了一篇文章，成功生產出另外四隻克隆羊，「多莉」的妹妹們。長期觀察這批妹妹們，她們的健康和衰老情況與非克隆羊完全沒有區別。所以克隆動物的缺陷在於成功率低，而不是出生動物的「生存痛苦」。

問題三：違背科學倫理，挑戰人類「普世」價值。

倫理學的四個原則是有利、無傷、尊重與公正。克隆猴的研究，究竟違背了哪條原則？克隆猴的研究對整個人類是有利的，對人類和猴子本身也無傷害。本著對科學的尊重與追求，在全世界分享克隆猴的技術經驗，也保持了絕對的公正。「普世」價值觀，顧名思義，就是普遍適用的價值觀。它超越民族、種族、國界和信仰，是全人類共同擁有的價值觀，是衡量是非善惡的最低尺度，或者說是人類道德的共同底線。具體地說，普世價值觀由三個基本要件組成：公平、正義、自由。說克隆猴挑戰人類的「普世」價值，那更是無稽之談。從「普世」的概念分析，克隆猴技術卻是正是發揚光大了「普世」價值觀。像某些私人公司曾經試圖壟斷人類基因組序列寶庫，私自研製「克隆人」技術等，那才是真正的挑戰人類的「普世」價值。

總之，孫強博士體細胞克隆猴的誕生，是人類認識克隆技術，研究細胞功能和治療性克隆的里程碑式研究結果。同時，也是人類幹細胞研究方興未艾事業的一個開始。

製版編輯： 常春藤｜

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