關於克隆方面的gibson組裝？

有沒有人幫我解釋一下gibson組裝？以及分子克隆裡面的「酶切與連接」？謝謝，盡量簡單寫啊，我初一······就是寫寫它們的意義、方法、原理。

最近正好剛學了合成生物學，也在寫關於DNA assembly方法的綜述，看到問Gibson assembly的問題好親切啊~作為一隻知乎小透明，獻上我第一次回答~

Gibson assembly是一種one step, one pot的快速基因組裝方法。它只需要將基因片段和需要的三種酶混合在同一個管內在50度下培養一到兩個小時就可以得到組裝好的DNA。

裝配原理基於DNA片段間的重疊區域，過程依賴於三種酶：DNA 外切酶（T5 exonuclease）, DNA聚合酶 （Phusion polymerase）和DNA連接酶 （Taq DNA ligase）的共同作用。首先，T5 核酸外切酶消化DNA片段的鏈 方向是從5『到3』. 每個DNA片段分別形成一個單鏈的突出部分，由於著這兩個相鄰的突出片段有一部分具有同源性能夠互補，所以DNA片段退火，互補的序列重新配對連接。然後，在空缺的部分DNA聚合酶以另一條DNA單鏈為模板，沿3方向將對應的脫氧核苷酸連接到單鏈上，填補缺口。最後，連接酶將兩條DNA 單鏈黏合起來，密封裂縫。這樣具有重疊區域的DNA片段就組裝成一整條DNA分子了。下面是組裝的示意圖，很清楚明了。

https://www.neb.com/~/media/Catalog/All-Products/E13C03EA3FE14F12BEA0A0ECE9490093/Long%20Description/E5510a.jpg

不知道有沒有講清楚，有不明白的地方可以問我。