要保小命,遠離核酸染料?
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在生物化學實驗室中,小夥伴們經常與毒性很強、有腐蝕性、易燃燒和具有爆炸性的化學藥品直接接觸,常常使用易碎的玻璃和瓷質器皿以及在煤氣、水、電等高溫電熱設備的環境下進行著緊張而細緻的工作,因此,必須十分重視安全工作。對於醫學小夥伴而言,最常接觸到的就是核酸染料,核酸染料主要有EB、GoldView、GelRed 和 GelGreen,要保小命,遠離核酸染料?今天給各位小夥伴補補腦。
——by酸菜
EB染料
在研究數以千計的實驗室殘留性有毒物質,最值得一提的就是溴化乙錠(EB,3, 8-二氨基-5-乙基-6-phenylphenanthridinium甲基溴),該物質的潛在毒性作用已被大眾廣泛的認知。EB屬於核酸分子嵌入劑,通常用於分子遺傳學、DNA和染色質結構分析等研究中,特別是國內很多實驗室仍在使用EB進行凝膠核酸電泳實驗的染色。
EB是極易滲透細胞膜與胞內DNA嵌合的小分子,它具有平面共軛大環結構,是典型的DNA 分子插入試劑,菲啶環插入到DNA分子的鹼基對之間,與DNA嵌合形成穩定的複合物,並影響DNA 的複製,破壞正常的遺傳生理現象。EB作為誘變性的化合物,它在人體中誘導突變的機制是不可逆轉的。
網路上有多數網友反映,周圍長期進行生化實驗的女性老師,都生產出不同程度畸形兒的現象。還有長期做凝膠實驗的同事得白血病等。在此提醒廣大EB操作小夥伴,科研誠可貴,生命價更高! 不為自己著想,也要為下一代的希望著想,做好防護措施,規範操作。盡量遠離EB---這個分子實驗頭號殺手!或者選擇相對安全的EB替代品。
GoldView染料
GoldView(GV)是一種可代替溴化乙錠(EB)的新型核酸染料,其靈敏度與EB相當,使用方法與之完全相同。在紫外透射光下雙鏈DNA呈現綠色熒光,也可用於RNA染色。Goldview對於大片段DNA的染色效果還湊合,但是在對於500bp以下的片段效果不是很好,還有一個弱點是它的熒光基團在紫外燈下非常容易淬滅,一般5-10min條帶就會消失。所以應該抓緊時間拍照後再觀察。
實質上,所謂的Goldview就是吖啶橙,也就是傳說中的AO,有一種傳統的細胞凋亡試驗,採用的染料正是吖啶橙,也就是AO/EB染色試驗,EB無法穿透完整的細胞膜,而AO可以穿過細胞膜染上細胞核,以此來區分凋亡和未凋亡的細胞。這個實驗其實告訴我們的是,由於AO會穿過細胞膜,所以雖然GoldView 被說的多麼不具有毒性,我們還是要謹慎待之。
GelRed 和 GelGreen染料
GelRed 和GelGreen 是兩種集高靈敏、低毒性和超穩定於一身的極佳的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國環保局安全認定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環境污染。GelRed 和 GelGreen 的特殊化學結構使其難以穿透細胞膜進入細胞,正是這一特性降低了染料的細胞毒性。不過也正是因為如此,其價格大約是GoldView的十倍左右。
但是我們想想,不管一些核酸染料宣傳的時候如何說它們具有多高的安全性,至今小鼠皮下注射未發現致癌性,但是為安全起見,我們強烈建議操作時依然應該每次帶手套,不小心接觸皮膚後應該立刻清洗,並妥善處理廢棄物。
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