你真的懂PBS嗎

在我們平時的實驗中，經常要用到PB和PBS，那麼，你真的了解什麼是PBS嗎？

PB 是「phosphate buffer」的縮寫，一般稱為「磷酸緩衝溶液」，依靠磷酸緩衝對（H2PO4-和HPO42-）起到維持溶液pH值的作用，陽離子則一般是Na+或K+。

PBS 是「phosphate buffer saline」的縮寫，中文通常稱其為「磷酸緩衝鹽溶液」，但更準確地譯名應該是「磷酸緩衝生理鹽水」，是生物實驗廣泛使用的一種緩衝溶液。通常是在PB的基礎上加入NaCl，擁有和人體體液類似的滲透壓和pH值。為了滿足其它需求，有時也加入K+，Ca2+或Mg2+。

1.緩衝pH範圍

磷酸緩衝液的緩衝pH值範圍非常廣泛，可配置各種pH值的酸性、鹼性和中性緩衝液。

• 酸性緩衝液：可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH範圍在1-5；

• 鹼性緩衝液：可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH範圍在9-12；

• 中性緩衝液：用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液按照不同比例進行混合，pH在5.5-8.5。

2.濃度計算

通常所說的磷酸緩衝液的濃度，比如0.1M、0.01M，是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度，包括解離的和未解離的，而不是Na+或者K+的濃度。

正是因為如此，在配製中性緩衝液時，用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，並不影響磷酸根離子的濃度。

3.配置方法

PBS的配置方案有很多，最常見的如下所示。至於我們組目前在使用的方案，大同小異，原理是相同的，同學們在使用的時候自己判斷吧。

1×PBS配置方法（1L）：

1. 按上表稱取物質，溶於800ml水中。

2. 調節pH至7.4，然後定容至1L。

由於使用量比較大，頻率比較高，所以我們一般都會配置10×或者20×的母液，使用的時候直接稀釋，這樣比較方便。

10×PBS配置方法（1L）：

1. 按上表稱取物質，溶於800ml水中。

2. 調節pH至6.8，然後定容至1L。

3. 使用的時候稀釋10倍，pH就會變至7.4了（搜到的資料里都這麼說，但是每個實驗室的實驗條件不一樣，所以具體情況具體分析）。

4.磷酸緩衝液優缺點

優點：

• 易配製各種濃度的緩衝液；

• 適用的pH值範圍寬，可配置各種pH值的緩衝液；

• pH受溫度影響較小；

• 緩衝能力強，緩衝液被稀釋後pH變化小。

缺點：

• 易與常見的鈣離子Ca2+、Mg2+及一些重金屬離子締合形成沉澱；

• 會抑制某些生化反應過程，如抑制某些酶的催化過程等。

5.參考資料

1. 緩衝對_百度百科

2. 磷酸緩衝液_百度百科

3. pbs緩衝液_百度百科

4. Wikipedia. "Phosphate-buffered saline."

5. Cold Spring Harbor Protocols

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