【未止科技】Nature重磅：抗體質量問題讓乳腺癌治療陷入二十年的僵局！你還能相信市場上的抗體嗎？

近二十年來，研究人員始終在尋找一種靶向雌激素受體，希望通過對該受體加以干預來改善乳腺癌的存活率。《Nature Communications》上剛剛發表的一篇文章認為，這一努力可能永遠不也無法達成目的，因為研究人員們所尋找的靶標根本不在他們所預想的位置上。過分依賴於未經充分驗證的抗體，導致乳腺癌治療在20世紀90年代發現雌激素受體β（ESR2）以來再無重大進展。正如未止科技在多篇報道中指出的事實，抗體質量問題正嚴重危害著生物科研的進步。

斯德哥爾摩KTH皇家理工學院生命科學實驗室（SciLifeLab）聯合研究中心的研究員Cecilia Williams表示：「β受體的發現改變了我們對雌激素信號傳導的理解。它也提出了新的內分泌治療方法，例如補充雌激素阻斷藥物他莫昔芬。」

靶向雌激素受體α（ESR1）是乳腺癌中第一個被發現並且也是最重要的生物標誌物，ESR1同時也可以幫助預測哪些患者對抗雌激素治療有反應。但是在治療中，大約一半的乳腺癌腫瘤對抗雌激素療法沒有反應，或者隨著時間的推移會產生耐藥性。

Cecilia Williams表示：「我們發現大多數的ERβ抗體的結果呈現假陽性。」隨後該研究團隊通過WB和質譜儀等方法在眾多陽性結果中篩選並確認了抗體PPZ0506的親和性。（圖1）

接下來，他們通過同時對陽性細胞（表達ERβ的HCT116細胞系）和隱性對照細胞（ERα陽性未表達ERβ的T47D細胞系）進行檢測，發現了14C8和PPG5/10可以進行「特異性不足」的綁定，也具有親和性。（圖2）

基於PPZ0506與ERβ的親和性特徵，研究人員進一步檢測了ERβ受體在癌細胞和正常細胞中的不同形態，並確認了ERβ是表達在內分泌和淋巴組織當中的。（圖3）

最終通過對ERβ受體在乳腺中的表達數據的分析得出結論，ERS2與ERS1具有相反的作用，在乳腺癌治療中，β受體不應該被阻斷，而是被激活，這種狀態下可以提高存活率。（圖4）

Cecilia Williams說：「目前世界上正在進行大量的有關ERβ的臨床試驗，我們的數據並不是孤立無援的，相當一部分研究採取了激活乳腺癌患者的ERβ受體。雖然我們還不能說這種受體在乳腺腫瘤中完全不存在，不能完全證實過去的看法是錯誤的，但我們確實正在挑戰受體在那裡的概念。」

該研究團隊表示，他們研究了12種用於檢測雌激素受體β的抗體，僅有一種抗體除外，其他的抗體都是無效的。威廉姆斯說：「這些抗體將其他蛋白質誤認為ESR2，因此用這些抗體產生的數據是不可信的。」正如未止科技在之前的報道中指出的：幾年前，瑞典HPA項目的科學家對5000餘種抗體進行了檢測，只有49%能正常工作（請參考：【深度】科研抗體的水究竟有多深？起底抗體產業最大隱憂）。

研究還指出，這僅有的一種可以成功應用於β受體的PPZ0506抗體可以在腫瘤組織或健康乳腺組織中同時發現少量的受體。

受該研究的影響，其他多種組織和疾病有關的雌激素的研究的正確性也遭到了挑戰。威廉姆斯說：「這些年來許多錯誤的潛在原因可能是由於免疫組織化學（IHC）領域使用了大量的「特異性不足」的抗體。」

目前研究人員們以前所未有的嚴謹程度進行了抗體的驗證。該團隊包括烏普薩拉大學和卡羅林斯卡研究所的研究人員，他們使用陰性和陽性實驗組進行對照，並應用了多種基於抗體的應用。比較了44種不同人類組織類型的不同抗體的性能，並通過更大規模的質譜技術進一步鑒定了所結合蛋白。

他們還搜索了大量的基因表達資料庫，包括「癌症基因組圖譜」、「基因型組織表達」和「人類蛋白質圖譜」等，發現在乳腺組織中普遍缺乏雌激素受體β的mRNA。

「我們的研究有助於在使用生物製劑或抗體的研究中提高重現性，並且闡明了以前的在雌激素和乳腺癌領域的爭議，從而有助於推動這一領域的發展。最後，我們希望我們的研究將有助於獲得更多研究經費和研究時間。「威廉姆斯說（關於促進可重複性的研究，請參考：【最新】GBSI報告：改善生物科研的可重複性，勢在必行！）。

烏普薩拉大學研究員安娜·阿斯普倫（Anna Asplund）說：「這項工作應該引起人們的關注。抗體驗證工作不過關的問題最近已經被包括《Nature》在內的主要期刊列為頭條新聞，我們希望我們的研究與其他正在進行的抗體驗證工作能夠為該領域帶來改。」除去瑞典研究型大學的參與外，埃及Dokki的國家研究中心製藥工業部以及美國得克薩斯州休斯敦大學也紛紛參與了這項工作。

未止科技認為，改善抗體質量，提高抗體的可重複性，需要抗體生產商、科研機構以及抗體用戶的共同努力。這項研究的發表，無異於再次吹響了抗體驗證行動的號角。在未來的抗體市場，抗體驗證數據將變得越來越重要 - 未止科技將與各位讀者一起，持續關注這個領域。