國際上有沒有人重複做出多利羊,真正利用分化成熟的體細胞?


謝邀

第一,如果你說嚴格重複「多利羊」,沒有。但是有部分重複!

先介紹下多利的克隆過程。

黑綿羊提供卵細胞然後把細胞核去掉;

白綿羊提供體細胞,然後留下核;接下來二者完成了生命的大和諧,然後把這個合體卵細胞丟給了第三頭綿羊的子宮。

2007年,另一個團隊用和多利一樣的細胞株進行了克隆,介紹見末尾部分。

第二,其他克隆生物有沒有?有

其實多利羊不是第一個被克隆的生物

最早克隆的生物是它

1952年羅伯特·布里格斯成功的克隆了北方豹蛙。

中國人第一次克隆成功是1963年,大名鼎鼎的童第周先生,我們小學課本還學過他。童第周克隆了鯉魚。

但是發現沒,上述生物都是非哺乳動物,就比如蛙這種兩棲類,跟我們生殖方式都不一樣,而且還要經歷變態發育(小蝌蚪到蛤),沒有可比性,所以這是多利羊的最大優勢。

1998年,牛克隆成功,接下來,豬也克隆成功,獼猴、兔子、騾子、鹿和馬都克隆成功。

當然還有大家關注的喵星人和汪星人,都克隆成功。

其中2004年,韓國人黃禹錫用卵細胞培養出人類胚胎幹細胞,被發現造假,然後砰一聲,炸了,從韓國的民族英雄成為民族罪人。

第三,多利羊其實有核心缺陷

至少對於多利羊,當時研究了不少文章,發現多利羊存在很多問題

克隆個體的預期壽命要遠遠低於母體。並且,克隆成功率非常低---多利是從277個胚胎中脫穎而出的,其它276個,都因為畸形而夭折了。

而且最關鍵的是,體細胞衰老問題無法避免

當時最終多利綿羊,出了好幾篇大文章,也讓大家見識到了體細胞直接克隆的核心缺陷

Signer E N, et al. DNA fingerprinting Dolly[J]. Nature, 1998, 394(6691): 329-330.

Ashworth D, et al. DNA microsatellite analysis of Dolly[J]. Nature, 1998, 394(6691): 329-329.

Evans M J, et al. Mitochondrial DNA genotypes in nuclear transfer-derived cloned sheep[J]. Nature genetics, 1999, 23(1): 90-93.

2009年諾獎授予了端粒的研究,端粒可謂是細胞生命的時鐘。它DNA末端的那一段特殊序列,每複製一次,端粒就會縮小一次,當端粒縮小到一定極限的時候,細胞的大限就到了,收拾好行囊,凋亡去了。

下圖的藍色區域就是端粒,

而在生物學裡,很早已前就發現這個問題了,他發現細胞的壽命大概是50-65代左右,一代到達這個數字,細胞就狗帶了,無論你如何續都沒用,這個人叫海弗里克,這個極限叫做海弗里克極限。

那麼,有沒有人類細胞可以突破這個呢?

當然有,大名鼎鼎的癌細胞就突破了這個極限,它有個修復機制,每複製一次,就把缺口補上,所以癌細胞的端粒一直保持著。

其實,江山代有才人出,各領風騷數百年。

細胞也是如此,該死的時候就要死,何必強行續呢。

其他問題包括炎症感染等一系列老化問題。

一句話:用成熟老化細胞直接克隆手段,太low了,這種out的技術基本上會進入歷史的舞台。

而今天大家準備採用更新的技術,我們把體細胞年輕化——讓細胞恢復到幹細胞狀態,然後重新開始新的生命,就像一顆受精卵一樣。

第四、用誘導幹細胞技術克隆

因為我們有了新的技術,誘導幹細胞技術(iPScell)。也就是2012年諾貝爾生理與醫學獎的得主山中伸彌的作品。

我在這個答案下詳細論述了這個發明的過程

有哪些科學家是實在不得已的情況下發明或發現了對人類有重大意義的研究? - 知乎用戶的回答

大體上,是用成熟的細胞,然後加入四種因子,最後讓這個細胞去分化,最後成為了幹細胞。而幹細胞,可以發育成一個完整的個體,就像從受精卵開始一樣的新生命,而不是多利羊那種原始的老細胞。

這個技術是2006年搞出來的,可以說是近幾年最偉大的技術,發展迅速,而且應用廣泛。目前IPS已經成為很多生物實驗室的標配

這是現在的克隆做法

第五,其他新的科技技術

當然,除了克隆技術外,我們還有很多新鮮的技術

1,用卵細胞直接製作個體

這是上海生科院李勁松的研究,他把一個卵細胞偽裝成精子然後實現兩個卵細胞融合的偽受精。

如果一個女性同時排出兩個卵子,有可能結合成「受卵卵」嗎? - 李雷的回答

拉拉無限好,依然可以生。

2,不要y染色體,然後可以正常發育為雄性並且生育後代

人類停止進化了么? - 李雷的回答

3,當然也可以直接從身體各個部位提取細胞,比如尿液。

這種無痛提取人體活細胞的辦法,還是很有市場的

小心:你的尿液可能被用來造人(長文) - 生生不息 - 知乎專欄

總結:類似成熟體細胞克隆基本上常見哺乳動物都做了,現在大家都尋找新辦法。

tips:難道克隆生物就沒救了?

也不見得,今年nature communication發了一篇文章,用了和多利一樣的卵細胞來源,結果多利的兄弟姐妹們獲得很健康,也是醉了。

可見,當年,也許多利的操作過程中,有很多問題!

ref.Sinclair K D, Corr S A, Gutierrez C G, et al. Healthy ageing of cloned sheep[J]. Nature Communications, 2016, 7.


你的問題是不對的,分化成熟的體細胞跟克隆動物是不一樣的。

分化為成熟的體細胞分為兩種,一種是多能幹細胞直接分化,這個叫體外的定向分化。另一種叫做轉分化,可以由另外一種細胞通過病毒也好通過小分子也好,把一種細胞變為另外一種細胞,這個具體你可以看下北大鄧宏魁 同濟裴剛 清華丁勝的工作。

樓上都在說ips的事情,ips 問題其實非常大,很多人把ips跟細胞核移植獲得多能幹細胞做比較,ips的功能要差很多...


有了 iPS誘導幹細胞技術之後,傳統的核轉移體細胞克隆技術進行哺乳動物克隆已經不再是首選途徑了。


我是外行,僅引用媒體報導

2000年6月16日,由西北農林科技大學動物胚胎工程專家張涌教授培育的世界首例成年體細胞克隆山羊「元元」在該校種羊場順利誕生。6月18日,「元元」由於肺部發育缺陷,於凌晨1時05分死亡,只存活了36小時05分。

  同年6月22日,第二隻體細胞克隆山羊「陽陽」出生。

6月22日,我國首隻成功克隆養育的克隆羊「陽陽」,在楊凌西北農林科技大學克隆動物基地迎來14歲生日。據工作人員介紹,如今已是五代同堂的「陽陽」已進入老齡期,體形偏瘦,滿口的牙齒也都已掉得差不多了。 

靜靜卧在羊圈 像遲暮老人

昨日上午,在楊凌西農大克隆動物基地,華商報記者見到剛過完14歲生日的克隆羊「陽陽」,作為我國首隻成功克隆養育的克隆羊,2000年6月22日出生的它,比世界上第一隻克隆羊「多莉」(6歲半時因病死亡)已多存活了7年多。

  「從2000年出生到現在,『陽陽』整整14歲了,如今『陽陽』已繁殖了四代子孫。」一直看護「陽陽」的飼養員隋彩霞稱,「陽陽」相當於80歲高齡的老人,不僅開始變瘦,滿口的牙齒也都基本掉光了,毛色也變得乾枯灰白,沒以前油亮順手了。

  羊圈裡,「陽陽」和兒孫們比起來,確實顯得很蒼老,靜靜卧在羊圈最裡面,「它現在體重有40多斤,和同類的羊相比稍微瘦一些,一天除了吃食外,都靜靜卧在羊圈角落,像一個遲暮的老人。」隋彩霞說,因為牙齒基本掉光,「陽陽」吃的苜蓿、花生秧等都要剁得比較碎。

  現在來看它的人少了

  「別看它現在有些老態龍鍾,來看它的人少了,但是從它出生到2004年左右,基本每天都有全國各地的人慕名而來排隊幾個小時看它,那時它的待遇絲毫不比明星差,排隊參觀的車子把基地外面的路都堵了。」據西農大宣傳部工作人員支勇平講,當時一天要接待幾十個旅遊團,「雖然沒有對參觀人數做過統計,但據估計也超過150萬人次,它應該算是中國知名度最高的羊了。」

  「雖然知名度不一般,但『陽陽』在生活待遇上也沒搞特殊,一直都和其他的羊同吃同住,開頭幾年還有專門的飼養員和獸醫,現在每個月還要給它做個檢查。」隋彩霞說,她照顧「陽陽」14年,基本上就把它當半個家人看待,「好在這些年『陽陽』沒有生過大病,能看到她兒孫滿堂、慢慢老去也算是一種幸福。」


多利羊沒有重複。但是實際上利用分化成熟的體細胞進行克隆的研究很多。比如豬的克隆中常用成體的皮膚成纖維細胞。這種細胞就是直接從成年豬的皮膚上分離出來的。另外還有用卵丘細胞的。不過克隆效率隨著供核細胞的分化程度增加而降低。分化程度越高的細胞,其克隆效率越低,理論上用幹細胞做克隆的效率最高,但是實際上這種理論只在小鼠中得到了驗證。在其他動物上,該理論還有待進一步驗證。


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