細胞培養經驗(一)
前段時間我發了一個軟體的使用教程,知乎網友說我在打廣告,還要舉報我。我這個人一向比較慫,吃一塹長一智,近期更一些細胞培養心得吧,軟體使用教程還更不更?看心情吧。
細胞培養的過程大概是這樣的:失敗—成功—體味—收穫—思考—交流。然後升華。
1、心肌細胞培養體會
記得剛養心肌細胞時候,開始時候很順利,但有一次突然細胞就不怎麼貼壁了,換液時候一吹打,就發現有許多細胞脫落。我檢查了培養箱,可是別人的細胞都長的很好,培養基的問題?我仔細觀察了一下,培養基粉紅透亮,絕對不會污染,血清也沒有問題,大家都是公用的血清。
當時我很迷惑,後來我向老師如實反映問題,他聽完我的敘述後想了想,讓我把培養基拿給他看,然後告訴我,你的培養基顏色太深了,肯定偏鹼,細胞在偏鹼的情況下培養,耐受能力會逐漸下降,可能是產生脫壁現象的原因。
後來我重新測了一下培養基,為 7.5 左右,我用滅菌的 HCL 調了一下,培養基顏色變成淡紅透亮。再次培養,發現細胞貼壁比較好了,搏動效果也不錯。因此,我以後每次培養前都要重新調好 pH 值,我覺得很多因素是能影響 pH 值的,這也算是實驗的一點收穫吧。
2、昆蟲細胞培養體會
首先,要廣泛閱讀細胞培養方面的專業書籍,打造自己紮實的專業基礎,為以後的操作做準備。這方面的書有很多,《體外培養的原理與技術》,薛慶善主編,科學出版社;《細胞實驗指南》,D.L.斯佩克特,etc著,黃培堂等譯;《細胞培養》,司徒鎮強等。
其次,每種細胞的培養條件都不相同,別人的經驗和書本上的 protocal 都只能作為參考,真正重要的是自己培養過程中的不斷摸索,這就需要對自己培養過程中細胞出現的狀況作詳細記錄,隨時總結。
再次,培養要有極大的耐心,過程中的影響因素又很多,這又是細活,其過程需要考慮各種影響因素,當出現問題時一一加以排除,找到最佳解決方案。我在這裡沒有討論細胞培養的細節問題,因為那樣的話是說不完的。
被細胞虐了好多次,但是我始終愛的很深沉,誰讓它有可能是我的衣食父母呢。好心累。就先這樣吧,下次更些其他的細胞培養心得。
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