端粒酶如何生產?

是否已經有了生產方法?或者知道含有端粒酶催化亞基hTERT的「人工端粒酶」如何生產也行。


謝邀。

我在實驗室就做過很多次人類端粒酶表達和重構,並且可以檢測到顯著的端粒酶活性。如果有足夠的商業價值,工業生產沒什麼特別的。

端粒是染色體末端富含TG序列的DNA重複片段,由於染色體末端複製問題,隨著細胞分裂的代次的增加,端粒逐漸縮短,端粒縮短到一定程度引起染色體不穩定從而啟動細胞程序性死亡。

說白了,如果人類的遺傳信息載體染色體是一條鞋帶的話,端粒就是鞋帶末端的那個鞋帶箍。有了端粒卡住末端,染色體才能穩定住。

人類只有少數細胞(例如胚胎幹細胞、大部分腫瘤細胞)具有端粒酶,端粒酶可以延伸端粒長度,從而使得細胞可以無限分裂。端粒與端粒酶是細胞衰老和腫瘤發生的重要因素之一。人類端粒酶是一個巨大的蛋白複合體,其核心是催化組分hTERT(human telomerase reverse transcriptase)和模板RNA hTERC/hTR(telomerase RNA component),hTERT以hTR為模板延伸端粒的3』overhang,從而延伸端粒長度。

(端粒酶延長端粒機制)

我們體細胞幾乎不產生hTERT,所以幾乎所有的體細胞都沒有端粒酶活性。但是生產端粒酶其實很簡單,使用細胞系或者體外TNT過表達hTERT,再體外轉錄出成熟序列的hTERC;將二者在適當buffer裡面混合(我可以賣技術了,歡迎莆田系前來洽談),30°孵育半個小時,端粒酶就生產出來了。如果需要,可以使用融合標籤對合成的端粒酶複合體進行純化。

(重組的端粒酶正在延長端粒,大概是這樣的)

當然,千萬別買這家的端粒酶膠囊。

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有需要找我談 &>-&<

參考文獻:

Structure of the Tribolium castaneum telomerase catalytic subunit TERT.

Gillis AJ, Schuller AP, Skordalakes E.

Nature. 2008 Oct 2;455(7213):633-7. doi: 10.1038/nature07283. Epub 2008 Aug 31.


回答得很專業,這讓我看到了希望


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