能否用熒光計代替熒光分光光度計?

本科生,我們做的實驗是熒光分光光度計測定維生素B2的含量。

實驗報告里的討論部分,老師提出了問題:能否用熒光計代替熒光分光光度計測定熒光光譜和激發光譜?為什麼?

我查閱了各種資料均無解,故求各位大神解答?

這兩種儀器有何區別?能替代否?


腆著臉不邀自來

先說一點題外話。看到這個問題的時候,我衛生化學的課程已經結課了,而且考試月即將開始,沒有閑時間給我來查找資料。當時還截圖立說說為證一定要來答這個問題,可惜考完放假,一切學習的想法都炸到年貨裡面去了。刷知乎在另一個問題下偶然點開題主主頁,居然再次發現了這個問題,激動得我喲,必須怒答一發。

~~~~~~~講正事專用分割線~~~~~~~

首先,我看到問題的時候,也愣了一下,熒光計是什麼?

好在我們有萬能的檢索工具(我才不會說我就用的百度)

http://bbs.instrument.com.cn/topic/962567(順便安利一下這個儀器信息網,好多專業問題這上邊都能找到答案,大神不少。沒有利益相關,只是覺得好)

我找到了這個

⑶ 儀器部件:

a.光源:在熒光計中常用鹵鎢燈作光源;熒光分度計常採用高壓汞燈或氙弧燈做光源。

b.單色器:熒光計的單色器是濾光片,只能用於定量分析;熒光分光光度計採用兩個光柵單色器,可獲得激發光譜和熒光光譜。

c.檢測器:熒光計採用光電管作檢測器;熒光分光光度計採用光電倍增管作檢測器。

意思很明顯了:

不考慮光源和檢測器的優劣,就單色器條件的限制,熒光計相當於一個固定波長條件下的熒光分光光度計。

如果考慮光源和檢測器的優劣,它還是一個性能不佳的光度計。

現在,問題就好解釋了。

熒光計只能測定某一特定波長條件下的熒光強度。當然,理論上可以換不同波長的濾光片來測定一系列的數據來繪製熒光光譜和激發光譜,不過由於濾光片的單色性能不佳,實際上並不不能達到繪製熒光光譜和激發光譜的要求。而熒光分光光度計使用的是光柵單色器,可以自動化地掃描測定出一系列波長條件下的熒光強度。因此不能用熒光計代替熒光分光光度計測定熒光光譜和激發光譜。


你邀請了同樣是本科生水平的我啊……作業還是要自己做。

我也沒見過熒光計是什麼,剛才去看了這個介紹Qubit? 3.0 熒光計。所以如果是要求定量分析的話熒光計和熒光分光光度計都可以滿足要求啊。然而這個實驗我還是做過的,要點是要得到熒光激發光譜和發射光譜啊,這個只能用熒光分光光度計分別掃描波長得到表觀光譜才行。熒光分光光度計的原理要仔細看教材(づ ̄ 3 ̄)づ

所謂思考題就是這樣不會有現成資料告訴你的,要靠自己猜……共勉。


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