1000 倍光鏡能否看得到細胞器？

01-16

我是製冷與低溫的研究生，做的項目和細胞有關;目前手頭設備只有光鏡沒有電鏡，已經做過的實驗中，觀測過蘋果、梨、毛豆等的細胞組織，感覺看不到細胞器；從別處看到有說染色，但是染色後細胞是否會死亡？
我要觀測活細胞的生理特性；果蔬採摘下來，在冷庫（0度左右）中放十幾天，細胞是否還是活著的？

我不是搞生物或者食品的，所以對於器材這些不是很懂，門外漢。。。手頭有兩台顯微鏡
1.下圖是徠卡的顯微鏡
2.下圖是奧林巴斯的

應該是帶偏振片的上面兩個顯微鏡左右兩側都帶有可抽取的鏡片
老師說他是按照南開大學生物系的徠卡顯微鏡買的，應該不是很次吧
如徐志超所說，可能確實是因為我觀察的材料的原因，洋蔥、蘋果，等細胞除了看到細胞核之外，其他細胞器基本看不到的

能，也不能。

首先，觀察對象是什麼細胞？如果是像草履蟲之類的單細胞原生動物，那相對會非常簡單。題主提到了蘋果和梨等果肉細胞。這些細胞往往特化很嚴重，整個細胞除了一個小小的細胞核，基本都被一個大液泡佔據，所以基本看不到什麼。

草履蟲，來自百度百科。

第二，觀察的是什麼細胞器？正如 @滿江紅提到的，不同細胞器大小及其不同，而且有的透明，有的有顏色。可以輕易觀察到的包括大部分細胞的細胞核、植物綠色組織細胞的葉綠體、一些肝臟細胞的溶酶體等等。而像高爾基體，內質網等透明結構則無法被最簡單的光學顯微鏡觀察到。

第三，題主對觀測方法描述，限制不夠多，只有「1000倍光鏡」和「活體觀察」兩者。如果對顯微鏡稍有研究，就知道「光鏡」這個叫法太籠統，一般教學用的顯微鏡屬於最簡單的光鏡（就彷彿照相機中的傻瓜機），功能很簡單，不能要求太高。但是如果是更高級一點的光學顯微鏡，那可以做的事就多很多。

例如相差顯微鏡。利用光通過不同介質發生的偏振效應，使得透明結構被觀察起來有立體感。

同樣是光鏡，左邊是普通光鏡，右邊是相差光鏡（Gregor T. Overney, California, USA）再比如利用當今強大的熒光蛋白和熒光顯微鏡，可以觀察幾乎所有你想觀察的細胞器。但是這要求被觀察的生物擁有成熟的轉基因技術。首先選擇一個目標細胞器特異表達的蛋白，設計融合蛋白結構，然後將被熒光蛋白標記的融合蛋白基因轉入目標生物並啟動表達，最後用熒光顯微鏡觀察。這樣的話，像微管束這種直徑幾十至幾百納米的結構都可以看得一清二楚，而且是活細胞哦。

老鼠成纖維細胞的熒光蛋白和微管 (結構蛋白)(1000x),熒光。/ Torsten Wittmann,Scripps 研究院。

沒做過植物細胞的死活，所以不知道如下的方法是否可行。

取出來做個切片，看死活的話用個死活染色，在普通倒置熒光顯微鏡下就能非常好的觀察到細胞死活的情況。要統計死活細胞的多少的話，用果膠酶消化細胞壁成單個懸浮細胞，用流式細胞儀定量。

你要僅僅簡單的看個死活的話沒必要看到細胞器。要看細胞器的話，看你具體的目的是為了說明什麼問題。更好的成像手段自然是激光共聚焦顯微鏡（CLSM），當然，你做CLSM的話，需要切得更薄，或者直接消化後點片子，染色並觀察。具體的步驟要根據相關文獻來定奪。

細胞器大小參考數據:

核糖體：最小

溶酶體：直徑為0.2～0.8 μm

線粒體：直徑為0.5～1 μm,長度為2～3 μm

中心粒：直徑為0.2～0.4 μm

細胞核：直徑為5～10 μm

看的話，應該沒問題，但是不染色，一般分不清細胞器和細胞胞質。

活的細胞由於細胞膜的主動轉運能力，不會被染色；只有死的細胞能被染色。所以題主可以用這一個小的區別，觀察死細胞和活細胞。

至於觀察生理特性，題主需要選擇相應的項目進行觀察，比如ROS，應激，形態學方面研究吧。

其實要檢測細胞細胞活性，觀測活細胞狀態只是其中直觀的一項而已。光鏡能力畢竟有限，大的細胞器可能還好，效果肯定也一般，小的就更不說了。

還有其他檢測方法，雖然我是做動物，但是植物應該也有類似的方法，比如抽取樣品組織切片染色，抽取樣品檢測活性分子表達指標，或者應該還有其他檢測植物細胞活性的方法，當然這些方法抽取的樣品的細胞最後大多是活不了的

參考樓上細胞器的大小，而光鏡的極限解析度是0.2um...這是由自然光的波長導致的，有公式可以計算