PCR定點誘變和基因打靶技術有什麼區別阿,體細胞和ES細胞同源基因重組方式有什麼不同?
01-15
謝邀。同源重組,好熟悉啊,每天都接觸這個……
PCR定點突變和基因打靶技術有什麼區別?
先給定義
PCR定點突變是指通過聚合酶鏈式反應(PCR)等方法向目的DNA片段中引入所需變化,包括鹼基的添加、刪除、點突變等。基因打靶是指通過DNA定點同源重組,改變基因組中的某一特定基因,從而在生物活體內研究此基因的功能。兩者的目的都是改變為了生物體的特定基因來研究基因的功能。不同處:
1、從手段上,PCR是通過PCR反應在引入突變位點,基因打靶則是利用同源重組的方式引入突變;2、研究範圍的局限性,PCR定點突變只能在體外對某個基因進行突變,並通過體外表達研究基因的功能,而基因打靶則是在基因組上引入突變,是基因功能在體內研究手段,甚至可以研究非編碼基因;3、這兩個技術不是一個水平上的,PCR定點突變是基礎技術,而基因打靶則需建立在PCR定點突變的技術上,因為基因打靶技術需要在體外構建重組載體,在體外引入點突變後在體內進行重組;4、基因打靶技術改變基因組的基因且具有遺傳性,能應用於哺乳動物中。這樣基因打靶技術則可應用與生物體層面而不僅僅是基因或細胞層面。體細胞和ES細胞(胚胎幹細胞)同源重組方式有什麼不同?
正面回答這個問題,我認為沒有不同。ES細胞也是體細胞的一種吧,更準確的提問方式是已分化細胞與未分化細胞同源重組方式有什麼不同?胚胎幹細胞是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細胞,它具有體外培養無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內環境,ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。
目前的研究還沒有發現胚胎幹細胞同源重組會與體細胞有什麼不同。
同源重組的發生會出現在染色體複製的過程中或者當DNA受到嚴重損傷需要利用同源重組修復的時候,下圖所展示的是酵母細胞中同源重組過程及參與該過程的蛋白。
題主問這個問題想必和基因打靶有關,因為基因打靶用到了ES細胞。其實並不是ES細胞在同源重組過程中有什麼不同,而是因為ES細胞具有分化的潛能。
為什麼基因打靶需要用ES細胞?通過基因打靶技術完成定向突變的ES細胞可以發育為動物的生殖細胞,從而得到突變的生物體。1989年,利用胚胎幹細胞,美國科學家馬里奧·卡佩奇和奧利弗·史密斯與英國科學家馬丁·埃文斯,將基因打靶技術成功地應用於小鼠;他們也因此獲得了2007年諾貝爾生理學與醫學獎。推薦閱讀:
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