有人了解黑膠蟲污染么?這個到底是真的還是假的?國外有相關文獻么?


越傳越玄學,實際就是支原體污染,支原體不可見,但被殺死的細胞產生的碎片會黏上培液里的蛋白和細胞外基質蛋白之類的東西,粘成一小團一小團,即所謂黑膠蟲。

解決辦法有:

定期監測支原體,一有發現立即丟棄細胞和用過的培液、PBS並消毒培養箱。這時候檢測同培養箱甚至同實驗室所有細胞,一般都是驚喜連連......因為支原體很容易通過飛沫傳播。

因為支原體普通過濾器不能去除,56度滅活也不能殺死,所以需要使用進口大廠血清,使用大廠瓶裝培液、PBS和胰酶,不要自己用粉末配。因為工業上使用100 nm以下孔徑的濾膜低壓過濾(高壓會把支原體擠壓變形,"擠"過孔隙去),有些產品還使用γ射線滅菌。

支原體對酒精有一定抗性,但對UV敏感,所以操作時必須戴手套,裸手擦酒精也不行,兩個人使用間隔照UV至少5分鐘。移液槍要麼放超凈台里常年照UV,要麼就用一次性5/10/20mL移液管,避免把槍體伸進培瓶,抹過酒精也不行。

平時建議添加Gibco antibiotic antimycotic,但它並不能完全阻止嚴重支原體污染,只能作為預防。

經某文章測序研究,大多數培養物中的支原體實際上與人口腔和鼻腔中的支原體同源。也就是說,細胞操作時一般提倡不說話、輕輕呼吸,要說話就戴口罩。


感覺應該是支原體污染吧……新手養細胞都糾結黑膠蟲的問題……

不要用高倍鏡看細胞啊


是細胞房的詛咒。午夜之後,拿著鏡子嘴裡叼根槍尖在細胞房的門後面做細胞實驗並且保證蘋果皮不會斷,然後在嘴裡的槍尖不會掉進培養皿的情況下對著培養基里的倒影問「你是怎麼死的」,就很容易使細胞出現黑膠蟲污染。不過我們一般認為是血清的問題。


多半是操作不規範污染

我沒遇到過,但經常聽大陸來的學生提起。猜測是操作不規範或實驗材料本身就有污染導致的。


這個目前沒有統一的說法。。。。。


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