移液槍的原理是什麼?為什麼可以如此精確?有哪些因素會影響其移液效果?
01-14
作為一個分子生物狗,拆移液器簡直就是必備技能。
大概就是像下面這個圖這樣的原理,其實就是一個加了彈簧和活塞位置調節機構的針筒。至於你問為什麼那麼精確,其實微量注射器(微量進樣器)也很准,只不過不能像移液器一樣標準化使用操作。移液器確保反覆使用的要素,主要和密封性有關。任何廠牌的移液器,最後其實都是首先拼密封性,其次是調節機構的準確性。密封良好的移液器,只要調節機構經過校準並且可以穩定保持精度,就不必擔心有問題。移液器的密封性主要有幾個因素:
1)活塞的品質活塞的材質很重要,要經得起長期與套筒相互摩擦2)套筒的品質不能容易彎曲變形或熱脹冷縮3)O型彈性密封圈這個是耗材,一定要定期檢查更換,否則很容易漏氣導致失准4)Tip和槍尖的密合度這個還關係到Tip的質量和設計
5)真空潤滑脂(感謝提醒)一旦有液體意外進入移液器需要在清理後補潤滑脂,通常校準的時候廠家會補移液器的調節機構是否準確是僅次於密封性的因素
不同的廠家有不同廠家的專利技術,但是好在這個因素是可校準的,其實到最後拼的是維持精確度的穩定性。不好的移液器就需要頻繁校準,很是麻煩。--------------------------------分割線-------------------------------
好多答案提示移液器沒有移液管精確——沒錯,通常情況下移液器的精度和移液管是沒有辦法比。不過既然題主只是問為什麼「如此精確」,我也就沒有評價它是不是最精確的。我覺得沒有那麼絕對,剛剛校準過的移液器我個人認為精度可以達到同等量程移液管的水平,這個結論,我相信親自校準過移液器的人都會同意。以上剛接觸不久吧,經手的槍應該在千把左右,離專業還差好遠,不過發言權還是有一點移液器原理如 ople/1667ef52ca31308d7a5079e3ac573f3e所說很簡單,不多贅述,下面主要介紹下影響移液器準確度的原因首先科普:移液器歷史1958年,德國Eppendorf公司發明了第一支單道固定量程移液器1968年,芬蘭Labsystem(雷勃)發明了多道固定量程移液器,大大提高了移液操作的工作效率。20世紀70年代初,法國Gilson推出了第一支單道可調量程移液器,並把它命名為Pipetman。之後,在70年代末期,Gilson又對其進行改造,使吸液/排液按鈕與退吸頭按鈕相互獨立。80年代,丹麥CAPP推出了可半支滅菌、內部全金屬的高精度移液器,Eppendorf推出了可整支滅菌的移液器Reference系列。1984年,美國RAININ(瑞寧)開始讓世人體會電動移液器的快感。2000年,丹麥capp推出世界唯一64道高精度移液器。
分類
工作原理:活塞內置式/活塞外置式量程是否可調:可調移液器/固定移液器動力來源:手動移液器/電動移液器工作通道數量分:單道移液器/多道移液器特殊用途:吸液器,連續分配器準確度與精確度準確度(Accuracy)-系統誤差是指你得到的測定結果與真實值之間的接近程度,以誤差來表示。一般用來表示系統誤差的大小。測量值與真實值接近的程度稱為準確度,兩者之差叫誤差。精確度(Precision)-隨機誤差是指使用同種備用樣品進行重複測定所得到的結果之間的重現性。測量精確度(也常簡稱精度)高,是指偶然誤差與系統誤差都比較小,這時測量數據比較集中在真值附近。
(圖片出處見左上角)影響因素1:移液器本身質量問題之前幾位說的移液器不如移液管準確我不做評論,因為移液器由於生產廠家的不同,材質的不同,隔熱性的差異,有著很大差距。總體來說,目前市面上進口移液器好於國產(當然價格差的也很多),20μl以下的國產移液器很難保持精度,而且幾乎無法校準!其次,定期的對於移液器的保養與清潔也很重要。(當然我明白各位實驗室大咖已經夠苦逼的了,哪有時間對小小移液器費心思,這部分工作應該由經銷商或者廠家來完成^_^)影響因素2:吸頭(圖片出處同上)
左上角是吸頭完美的截面,國內廠家能做到的不多,大多數標準化很差影響因素3:環境溫度,濕度,氣壓,原理我就不多說了,為了避免不準確的移液結果: ①應盡量將移液器,吸頭,和液體保持在同一溫度內 ②對溫度較低的液體進行移液時,在每次分液後更換吸頭,以防止吸管溫度的變化 影響因素4:人為因素(個人認為最重要)移液者經驗對移液結果的影響預洗槍頭對移液結果的影響移液槍是生物、化學實驗室比較常見的定量轉移、稱取液體的一類既準確又精確的儀器。使用起來非常簡單方便,自從使用過移液槍後,就表示再也不想用滴管什麼的了。 移液槍雖然簡單,但要使用好也並不容易,有許多點注意並不長引起人們的關注,但可能會潛移默化的影響它的精度。 1.每次使用完後盡量調回最大量程,這樣可以使彈簧得到自然的伸長,有利於彈簧壽命的提高。 2.使用移液槍時,如果是從大到小轉換量程,順時針調到需要的示數即可,但如果是從小到大,逆時針旋轉最好超過些你需要的量程,再順時針調到你需要的示數,這樣做可以使彈簧得到最大程度的伸長,往往順時針旋轉有利於移液槍壽命的延長。
3.移液槍自然要在規定的量程內使用,否則會造成內部的機械裝置卡住而影響精度。
4.移取液體需要分情況採用不同方法: 對於一般的常規液體: 常規液體:將按鈕壓至第一停點位置。將移液器滴頭置於液面以下並慢慢鬆開按鈕,待滴頭吸入溶液後,將滴頭撤出液面並斜貼在試劑瓶壁上淌走多餘的液體。將移液器移至需要加樣的位置,輕輕壓下操作按鈕至第一停點位置。在繼續向下壓至第二停點,以排盡滴頭內的液體。 對於粘稠狀液體、易起泡沫液體:極微量液體或不更換滴頭的重複操作時,
將按鈕下壓至第二停點處,將移液器滴頭置於試劑液面以下,然後慢慢鬆開按鈕吸液。待滴頭吸滿液體後,將滴頭撤出液面並斜貼在試劑瓶壁上淌走多餘的液體,將移液器移至需要加樣的位置,輕輕壓下操作按鈕至第一停點位置,放出預設定的液體。
5.為了提高精確度,可以預洗一下。使得移液槍內部管壁的表面張力達到飽和,不影響移液。
6.慢吸慢放,控制好彈簧的伸縮速度。吸液速度太快會產生反衝和氣泡,導致移液體積不準確。
7.移液槍不得移取有腐蝕性的溶液,如強酸、強鹼等。
附校正水的密度隨溫度的變化
進實驗室用移液槍的時候老師說的第一句話就是「這個東西並不精確,真的做精確度比較高的實驗還是要用移液管」,你跟我說它精確???
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