crispr基因編輯會引入數百種unintended基因突變的發現會對基因編輯技術的發展有什麼影響?

https://futurism.com/4-crispr-may-cause-unintended-mutations-new-study-shows/

http://mp.weixin.qq.com/s/QA7X0w0efMebu9Kgl1ViyQ


今天就這個問題討論了一下午,整理下討論的結果。

1. 這個實驗是否設計完善?目前的看法是,由於篇幅,實驗的許多細節沒有提及。如果是在胚胎里注入了過多的sgRNA,脫靶不奇怪。這就好像該結合的特異位點都被結合了,多出來的sgRNA就去搞事情了。

2. 怎麼能檢驗第一條?一個教授說,多一點對照組。比如,設置一個加了Cas9,但不加sgRNA的對照組。條件允許的話,再做個濃度梯度。這樣sgRNA的作用一目了然。

3. 這個實驗還有哪裡不靠譜的地方嗎?有人八出來說這個sgRNA不是特異性評分最高的一條(只有50幾分,最高的有80幾分),因此脫靶也可以接受。作者的解釋是說用了活性最強的一條sgRNA。至於為啥?篇幅原因,沒談。

4. 對CRISPR的應用有啥影響?最直觀的影響,美股幾家做CRISPR的公司今天跌成狗(已補倉,勿念)。將來的任何應用,免不了要做更深度的檢驗(我倒是雙手贊同)。

5. 我們需要擔心嗎?不知道。有人說張鋒的一些高保真CRISPR系統在細胞系也都做了全基因組測序,沒有啥脫靶效應。也有人說細胞系和這研究里的活體動物豈能同日而語?

6. 那我們該做啥?我建議用最嚴格的CRISPR系統,設計幾組良好的對照,弄一條大家都接受的sgRNA,再做一次in vivo的實驗。脫靶效應究竟如何,到時候就知道了。


CRISP是從細菌中發現的,那麼為什麼在進化過程中這一抵禦病毒入侵的系統被拋棄掉了呢?


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