寨卡病毒被分離對抗擊寨卡病毒有什麼意義？

01-07

我覺得這個成就是對軍醫科的褒獎。

軍醫科五所在全軍建立的病原檢測體系試運行了幾年，作為最終的參比實驗室，需要對大量的確診標本進行病毒分離，所以可以說積累了豐富的經驗，這一次分離到毒株也就理所應當了。相比之下，可能CDC拿到的標本在病毒載量上達不到分離的下限，同時他們得出全基因組序列的時候也說了，拷貝數只有100左右；也可能和江西確診病例是在過年放假期間，而CDC上班要等到初七，所以標本的活性可能受到影響。

2月22日晚，中國疾病預防控制中心發布消息稱，與江西省疾控中心合作，該中心從我國大陸首例輸入性寨卡病毒感染者血液標本中獲取病毒，完成了寨卡病毒全基因組測序。同日，軍事醫學科學院發布消息稱，從我國大陸發現的第二例輸入性寨卡病毒感染者的尿液中提取病毒，也完成了全基因組測序。

李德新透露，搞清寨卡病毒的真面目並不容易。「主要是病毒載量較低。」李德新說。首例感染者血液內每毫升的病毒載量僅為103，屬於能檢出病毒的下限。「這就好比100個犯罪分子入境與10個犯罪分子入境，二者相比，後者的查找難度要遠遠大於前者。」李德新說，中國疾控中心釆用高通量序列分析，結合優化的分析技術，克服這一困難，成功從病毒感染者血清樣本中直接獲得了病毒全基因組序列。
軍事醫學科學院微生物流行病研究所的專家表示，從尿液中提取病毒，因為尿液容易獲取，且樣本量大，給病毒提取提供了便利。

外部鏈接：破解病毒基因後，寨卡疫苗還遠嗎 --快訊--新聞 --生物360 --中文生命科學界資訊站

本報北京2月25日電庄穎娜、特約記者沈基飛報道：今天上午，記者從軍事醫學科學院了解到，自我國確診首例輸入性寨卡感染病例以來，該院微生物流行病研究所與國家質檢總局所屬單位、廣州市第八人民醫院密切合作，成功分離出2株寨卡病毒，一株來源於從委內瑞拉入境廣州的患者尿液標本，另一株來源於從薩摩亞入境深圳的患者血液標本。這也是我國首次成功分離出寨卡病毒，對於我國防控寨卡疫情具有重要意義。

外部鏈接：我國首次成功分離出寨卡病毒

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閑話不多說，這學期剛好給本科生上《病毒感染的檢查方法與防治原則》這一章，我就分離到病毒的意義扯一點。

首先，寨卡病毒感染病例是新出現的，我國以前並沒有，所以構成了衛計委規定的「首發病例」。而我們看新聞也可以看到，確診病例主要是參考國家衛生計生委辦公廳關於印發寨卡病毒病診療方案的通知。

五、診斷和鑒別診斷
　　（一）診斷依據。
　　根據流行病學史、臨床表現和相關實驗室檢查綜合判斷。

　　（二）病例定義。

　　1.疑似病例：符合流行病學史且有相應臨床表現。
　　（1）流行病學史：發病前14天內在寨卡病毒感染病例報告或流行地區旅行或居住。

　　（2）臨床表現：難以用其他原因解釋的發熱、皮疹、關節痛或結膜炎等。
　　2.臨床診斷病例：疑似病例且寨卡病毒IgM抗體檢測陽性。

　　3.確診病例：疑似病例或臨床診斷病例經實驗室檢測符合下列情形之一者：
　　（1）寨卡病毒核酸檢測陽性。
　　（2）分離出寨卡病毒。

　　（3）恢復期血清寨卡病毒中和抗體陽轉或者滴度較急性期呈4倍以上升高，同時排除登革、乙腦等其他常見黃病毒感染。
　　（三）鑒別診斷。
　　需要和以下疾病進行鑒別診斷：

　　1.主要與登革熱和基孔肯亞熱進行鑒別診斷。
　　2.其他：與微小病毒、風疹、麻疹、腸道病毒、立克次體病等相鑒別。

目前國內所有的確診病例都是根據這個步驟來的：「第一步——患者有發熱、皮疹癥狀，同時又是從疫區回來的；第二步——直接進行核酸檢測出來陽性，得到確診病例，跳過了IgM的階段。」

從診斷來說，病毒分離出來更是對確診的加強，但是僅對確診病例來說只能算錦上添花，分離出病毒的意義更大程度上在於得到病原體之後的研究應用上。

最初拿到的可以叫「野毒株」，同時命名（SZ01、GZ01）。後續的研究則基於實驗室里培養這些病毒。

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拿到病毒可以幹什麼？我們研究疾病是不是考慮這幾個方面：疾病是為什麼發生的？機理是什麼？能不能治療？能不能預防？我下面就這幾個方面簡述一下分離到病毒的意義。

【1】疫苗效果評價

其實疫苗的研究不需要拿到活病毒，因為按現代疫苗的研發流程來說，只要有病毒的序列，就可以進行疫苗的研究。

對於黃病毒來說，因為黃病毒目前有兩個非常好的減毒活疫苗——黃熱病疫苗17D和乙型腦炎疫苗SA14-14-2。理論上，將這兩個疫苗的結構蛋白替換成寨卡病毒的結構蛋白就可以說是一種疫苗了，至於疫苗的安全性則需要進行後續大規模的研究。而且並不僅僅可以這樣，因為中和抗體是病毒糖蛋白誘導的，所以知道寨卡病毒糖蛋白的序列，體外表達出糖蛋白，這蛋白本身也是一種潛在的疫苗。

關鍵的關鍵是，疫苗效果的評價，你怎麼知道你研究出來的疫苗有保護作用？這就牽扯到「攻毒」的概念了。疫苗研究一般是先從動物模型開始，疫苗注射動物之後（一般三次），動物是不是有免疫力了？這就需要大劑量注射活病毒，看動物是不是能挺住，相比對照組，如果動物活下來了，那疫苗可能是有效的。

【2】抗病毒藥物的藥效評價

其實和疫苗的效果評價差不多，現在抗病毒藥物可以是核苷類似物，也可以是蛋白酶抑製劑，或者其他的一些藥物。但你如何知道這些藥物對病毒有作用？核苷類似物可以擾亂病毒基因組的合成或者基因的表達，蛋白酶抑製劑可以擾亂病毒相關酶活性的發揮，進而阻斷病毒的生活周期（了解抗病毒藥物可以參考——為什麼沒有像抗生素對抗細菌一樣有效的抗病毒藥物？ - Vigorous Cooler 的回答）。

所以這就需要病毒，我們評價這些藥物有沒有抗病毒作用的關鍵指標就是，體外使用這些藥物的時候，病毒增殖的滴度是不是下降了。所以，這項研究必須要有病毒。

【3】病毒致病機理的研究

病毒是怎麼致病的？寨卡病毒的神經細胞嗜性的原因是什麼？病毒感染造成的損傷是病毒本身在細胞里增殖破壞引起的還是因為免疫系統發現了病毒的擴增，進行免疫反應造成的機體損傷？

所有這些問題的解答都需要在體外動物模型和相關細胞研究中進行確認，比如，病毒的受體是什麼等等科學問題。

【4】病原學研究

其實上面三條都是醫學角度來考慮問題，這也是大家最關心的事情，而拿到病毒也可以從生物學角度來研究，不過，大家感興趣的不多。這方面主要是病原學的研究，不過病原學的研究是上述2、3的基礎。比如，病毒的結構是什麼樣子的，核酸酶和蛋白酶的結構是什麼樣子的，怎麼發揮作用的等等，這方面也就不多做介紹了。

暫時想到這麼多，如果後續有想到的隨時補充。

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20160228 by Vigorous Cooler

分離病毒，是對該病、乃至其病原學研究的基礎。