怎樣測定溶酶體 pH?

溶酶體最適 pH 在5左右,可是對於這麼小的細胞器,其 pH 值要怎麼測定呢


研究溶酶體這樣的酸性細胞器,可以用嗜酸性pH熒光探針PDMPO[2-(4-pyridyl)-5-((4-(2-dimethylaminoethylaminocarbamoyl)methoxy)phenyl)oxazole]。

下圖是PDMPO的合成步驟:

這種熒光探針在pH值較低時釋放黃色熒光,pH值較高時釋放藍色熒光,並且選擇性的標記活細胞內的酸性細胞器。通過計算髮射光的比值,可以測出相應細胞器的pH值。

下圖是PDMPO檢測到的熒光比值和pH值的標準曲線:

參考文獻:

Diwu Z, Chen C-S, Zhang C, Klaubert DH, Haugland RP (1999) A novel acidotropic pH indicator and its potential application in labeling acidic organelles of live cells. Chem Biol 6:411–418.


推薦閱讀:

傷口癒合的時候為什麼發癢?
梨肉裡面的硬顆粒是什麼?
請教生物學的研究論文如何體現研究質量?像Nature雜誌論文,怎麼有些文章通篇沒看到一個數學公式?
男人和女人的性染色體xy與xx,x上比y上多出幾千的基因,那是否證明女性生來就比男性優秀或不同?
能確定我們觀測同一物體大家會有一致的顏色感受嗎?

TAG:生物學 | 生物化學 | |