為什麼 DNA 複製的引物不是 DNA?
12-30
如果用DNA做引物不就可以省去把RNA引物切掉的麻煩了嗎?還是說因為用RNA比較好識別?
因為DNA polymerase不能從頭開始複製DNA,而DNA Primase可以先合成一個短鏈的RNA然後提供3"的複製端(最短為兩個)。原因有好幾個,例如細胞核里大量分布的是dNTP而非dNMP,所以從頭開始複製會導致最上端有個高能磷酸鍵,而由於DNA本身很穩定所以這一端不好處理。ps提醒題主所有的生化理論與機制都是根據實驗結果推出來的,所以我提到的這些「結論」都是因為DNA polymerase的反應中心需要鎂離子和新添加dNTP的磷酸相互作用來激活其與已合成鏈的3"-OH反應,如下圖:
但是這個活性中心需要大於等於3個(兩個已有的和一個新加的)脫氧核苷酸殘基。
如果將來人們在海底(或者外太空?)找到了一種生物不用RNA primer,這個理論就作廢了。Reference: DNA Polymerases: Structural Diversity and Common Mechanisms這論文目測要在學校購買的情況下才能看。。。
才發現 @梁書嘉 已經回答了,最重要的就是 DNA polymerase只能在3』 -OH 端加 dNTP。不過我想對題主說的「用 DNA 做引物就可以把 RNA 引物切掉的麻煩省去」的概念發展一下:在 DNA 複製中用 RNA做引物有什麼好處? DNA polymerase 5』端到3』端延伸的特性決定了總有拖後腿的一條鏈(lagging stand)。解旋之後,雙鏈需要『同速』完成 DNA 複製,不然就像壞了的拉鏈,卡在某處。2006年一篇很有趣的文章發現 primase合成 RNA primer 使得leading strand 放慢腳步。
文章鏈接放在下面,繼續搬磚。。。有空再補。
Reference:http://www.nature.com/nature/journal/v439/n7076/pdf/nature04317.pdf
不是這個領域的,但是正在上一門edx的課,所以討論一下,望批評指正。
1、DNA polymerase需要一個primer或者更確切是primer:template junction,它自己不能利用ssDNA(single strand DNA)從頭複製。
2、DNA polymerase也無法自己合成一個primer,這個primer是由另一種酶Primase來合成的。3、這個Primase能夠複製一段ssDNA,生成一段5-10 nucleotides的primer。4、Primase是一種特殊的RNA polymerase,可以根據DNA合成出RNA,而且是一段ssDNA template合成出一段RNA。5、在細胞中DNA polymerase使用RNA primer:template junction的。但是在實驗室中,DNA polymerase也可以使用DNA primer:template junction。6、這個RNA primer在DNA polymerase複製之後,會被RNase H、5" exonuclease切掉,再由DNA polymerase和DNA ligase給接上。這一步驟可以看作為一種DNA repair。7、至於為什麼細胞中沒有出現一種酶可以根據ssDNA合成一小段DNA primer,然後既滿足DNA polymerase需要primer,又可以免去RNase H等之後的修復,我不是很清楚。也許 @員炊事提供了一種解釋,合成RNA primer是為了使得leading strand降速來等待lagging strand(不好意思,不是這個領域的,所以文章沒看)。但是我還是有個疑問,lagging strand的RNA primer更多,更需要Primase。所以你只降低了一次leading strand的速,但是卻降低了多次lagging strand的速。這如何解釋呢?以上答案均是參考edx的《molecular biology: DNA replication》這門課和James Waston的《Molecular biology of the gene》這本書。推薦閱讀:
※DNA複製時核小體上的結構會不會干擾,或者說是如何被去掉的?
※如何評價人類第一次拍攝到DNA複製過程?
※每個人體細胞都帶有主人的 DNA,那麼進行器官移植後,兩種 DNA 同時出現在一個人體內,為何不會造成衝突?
※人類為什麼這麼脆弱,非得靠各種疫苗存活?是不是打這藥物是為了讓人類的松果體僵化跟破壞DNA從而使人類無能更好受管制?
※編碼DNA缺失一個鹼基,蛋白質結構一定改變嗎?